Патент на изобретение №2346698

Published by on




РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ



ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
(19) RU (11) 2346698 (13) C1
(51) МПК

A61K36/00 (2006.01)

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

Статус: по данным на 08.09.2010 – может прекратить свое действие

(21), (22) Заявка: 2007141457/13, 07.11.2007

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:

07.11.2007

(46) Опубликовано: 20.02.2009

(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске:
Применение препарата Лигфол при лейкозе крупного рогатого скота. – Зооиндустрия, 2006, №5. КЛЁНОВА И.Ф. и др. Ветеринарные препараты в России. – М.: Справочник Сельхозиздат, 2004, т.1, с.524-525.

Адрес для переписки:

603950, г.Нижний Новгород, ГСП-847, ул. Ветеринарная, 3, ГНУ НИВИ

(72) Автор(ы):

Смирнов Юрий Петрович (RU),
Суворова Ирина Львовна (RU),
Ерзутов Алексей Иванович (RU),
Беркович Александр Михайлович (RU),
Ивашин Евгений Иванович (RU),
Жаркова Ангелина Вениаминовна (RU),
Горельникова Наталья Викторовна (RU)

(73) Патентообладатель(и):

Государственное научное учреждение Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РФ Российской академии сельскохозяйственных наук (RU)

(54) СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

(57) Реферат:

Изобретение относится к области ветеринарии. Способ заключается в том, что телятам 6-месяного возраста внутримышечно вводят лигфол двумя однократными циклами 1 раз в месяц в течение 3 месяцев – первый цикл в дозе 5,0 мл и второй цикл в дозе 10,0 мл. Дополнительно вводят янтарную кислоту в дозе 100,0 мг 1 раз в сутки в течение 10 суток с интервалом в 10 суток в течение 6 месяцев. Способ обеспечивает высокий уровень иммунобиологической защиты организма и профилактирует появление РИД-положительных реакций. 3 табл.

Изобретение относится к ветеринарной медицине, касается способа профилактики вирусных заболеваний крупного рогатого скота и может быть использовано для защиты молодняка от заражения вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС).

Этиология заболевания связана с наличием в лимфоцитах крови больных лейкозом животных РНК-содержащего вируса экзогенного происхождения, онковируса типа С. У инфицированных животных появляется гуморальный ответ на структурные белки вируса с персистентным лимфоцитозом. В крови увеличивается количество циркулирующих В-лимфоцитов, которые составляют 40-80% от общей популяции лимфоцитов, у здоровых они составляют 15-20%.

Известны способы снижения вирулентности заболевания стимуляцией иммунологической резистентности организма, особенно находящегося в инкубационном периоде, с использованием иммуномодуляторов. Так, для профилактики лейкоза использовали интерферон альфа-2 в пяти модификациях телятам 1-6-месячного возраста /1/. Однако продолжительность курса и низкий профилактический эффект поставили под сомнение целесообразность практического применения этого способа. Коррекцию клеточных и гуморальных факторов активности иммунной системы и естественной резистентности, особенно на фоне иммунодефицита, обеспечивает использование иммуномодуляторов природного происхождения Т- и В-активинов /2/, для чего 6 мг лиофилизированного порошка В-активина растворяют в 0,01% растворе Т-активина. Т- и В-активины в комбинации вводят телятам 20-30-суточного возраста, т.е. в период завершения колострального иммунитета и начала активного функционирования собственной иммунной системы, когда под влиянием негативных факторов внешней среды возможно развитие иммунодефицитных состояний, на фоне которых животные чаще заражаются возбудителями бактериальной и вирусной природы, для восстановления активности иммунной системы и естественной резистентности до показателей физиологической нормы, что позволяет профилактировать появление РИД-положительных реакций у животных раннего возраста при слабой профилактической роли у животных более старшего возраста. Предпочтительными являются препараты, способные контролировать пролиферацию вируса в клетках за счет стимуляции эффекторных клеток иммунитета и проявляющих свойства стресс-корректоров, например лигфол. Лигфол в качестве действующего начала содержит гуминовые вещества, полученные при гидролизе древесного лигнина. В его состав входят натрия пирофосфат десятиводный, натрия хлорид и диминерализованная вода. Он обладает адаптогенной и стресс-корректорной активностью, проявляет свойства антиоксиданта, иммуномодулятора, является гепатопротектором и противоопухолевым средством, повышает резистентность к неблагополучным воздействиям, способствует сохранению здоровья и продуктивности животных. В основе его фармакологической активности лежат иммуноантиоксидантные механизмы /3/.

Лигфол исследован в качестве препарата для улучшения качества жизни и продуктивных свойств животных, а также снижения лимфоцитоза на трех группах взрослых коров (группа 1 – условно здоровые животные без клинических или серологических признаков заболевания; группа 2 – больные животные с серологическим подтверждением болезни без клинических проявления лейкоза; группа 3 – больные животные с серологическим подтверждением болезни и клиническими проявлениями лейкоза). Лигфол вводили в дозе 5,0 мл на корову 1 раз в месяц в течение 10 месяцев, что вызывало положительную динамику основного гематологического показателя развития лейкозного процесса – абсолютного лимфоцитоза в периферической крови – у условно здоровых животных (группа 1) при отсутствии статистически значимого отличия от контроля (физиологический раствор) в других группах /4/. Более интенсивная схема применения Лигфола была испытана на больных животных в возрасте 12-18 месяцев с серологическим подтверждением болезни без ее клинических проявлений. Лигфол применяли по следующей схеме: в разовой дозе 5,0 мл на корову 1 раз в 7 дней в течение месяца, затем 1 раз в месяц в течение 3 месяцев. По результатам серологических исследований (РИД, ПЦР) установлена тенденция к сдерживанию развития лейкозного процесса /5/ (прототип).

Задачей изобретения является профилактика лейкоза крупного рогатого скота у молодняка путем коррекции и сохранения в пределах физиологической нормы активности иммунной системы и показателей естественной резистентности и снижения лимфоцитоза.

Актуальность эффективной защиты молодняка от заражения вирусом лейкоза крупного рогатого скота обусловлена тем, что инфицированные ВЛКРС телята 6-месячного возраста заболевают лейкозом в гематологической стадии в соотношении один больной на 23 инфицированных, а с возрастом это соотношение изменяется – 5:1.

Эта задача решена сочетанным применением лигфола и янтарной кислоты.

Сущность способа профилактики заключается в том, что телкам с 6-месячного возраста применяют лигфол двумя однократными циклами (1 раз в месяц в течение 3 месяцев) в дозе 5,0 мл на животное (первый цикл) и 10,0 мл на животное (второй цикл) и янтарную кислоту в дозе 100 мг на корову 1 раз в сутки в течение 10 суток с интервалом в 10 суток.

Опыты проведены на телках 6-месячного возраста черно-пестрой породы в условиях хозяйства с уровнем инфицированности ВЛКРС 5%. Животных подбирали по принципу аналогов (возраст, живая масса, клиническое состояние, иммунологический статус). Были сформированы 3 группы телок 6-месячного возраста с отрицательными результатами серологических исследований (РИД с гликопротеиновым антигеном ВЛКРС) и ПЦР: 1 группа (опыт) – животные 6-месячного возраста, которым внутримышечно вводили лигфол в дозе 5,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение 3 месяцев и в дозе 10,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение 3 месяцев (9 голов) и дополнительно применяли янтарную кислоту в дозе 100,0 мг на животное 1 раз в сутки в течение 10 суток с интервалом в 10 суток в течение 6 месяцев; 2 группа (контроль) – животные 6-месячного возраста, которым внутримышечно вводили лигфол в дозе 5,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение 3 месяцев и в дозе 10,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение 3 месяцев (8 голов); 3 группа (контроль) – животные 6-месячного возраста, которым препараты на назначали (13 голов). За животными вели клинические наблюдения. Лабораторные исследования на лейкоз и иммунобиохимические исследования проводили каждые три месяца с применением современных общепринятых тестов. Результаты представлены в таблицах 1, 2 и 3.

Как видно из таблицы 1, в группах, в которых применяли лигфол,. отмечалась положительная тенденция динамики уровня лимфоцитов – снижение количества лимфоцитов в периферической крови и иммунобиохимических показателей, более выраженная в опыте. Так, абсолютное количество лимфоцитов в 1 мкл крови через 6 месяцев составило в опыте 6324 по сравнению с 5589 в контроле с применением лигфола и 6156 в контроле без применения препаратов, а процентное содержание лимфоцитов в 1 мкл крови снизилось в опыте с до 68,0±2,17% по сравнению с 69,0±2,3% (контроль с применением лигфола) и 76,0±2,16% (контроль без применения препаратов). Концентрация веществ средней и низкой молекулярной массы как показатель степени эндогенной интоксикации через 6 месяцев составила в опыте 15,093±0,51 у.е. по сравнению с 18,246±1,54 у.е. (контроль с применением лигфола) и 18,675±1,94 у.е. (контроль без применения препаратов). Как известно, при эндогенной интоксикации наблюдается выраженное изменение иммунного статуса, проявляющееся иммунодепрессией, а основным патофизиологическим механизмом эндогенной интоксикации является активация перекисного окисления липидов, иницированных свободными кислородными радикалами, поэтому активация системы антиоксидантной защиты организма воздействует непосредственно на этот механизм. У животных, не получавших лигфол, РИД-положительные реакции в течение 6 месяцев отмечались у 3 животных, у которых они повторялись 2 раза, что указывало на развитие лейкозного процесса (таблица 2). Телки опытной группы отличались большей упитанностью, они лучше развивались и у них отмечали получение полноценной половой охоты (таблица 3).

Таблица 1
Реакция иммунной системы и иммунобиохимические показатели телок 5-7-месячного возраста
Показатели До начала работы Контроль Опыт
без применения препаратов (n=13) с применением лигфола
(n=8)
с применением лигфола и янтарной кислоты (n=9)
Через 3 месяца Через 6 месяцев Через 3 месяца Через 6 месяцев Через 3 месяца Через 6 месяцев
Лейкоциты, 109 10,8±1,16 9,5±0,51 8,1±0,73 11,1±0,38 8,1±0,69 7,9±0,51 9,3±1,06
Лимфоциты, % 74±1,23 66,0±1,8 76,0±2,16 72,0±2,33 69,0±2,32 59,0±2,29 68,0±2,17
абс. 7992 6270 6156 7992 5589 4661 6324
ВНСММ, у.е. 11,81±0,27 19,63±1,72 18,675±1,94 18,91±0,84 18,246±1,54 17,031±1,03 15,093±0,51
Общий белок, г/л 69,77±1,1 72,06±1,5 77,74±1,61 79,97±1,02 77,12±0,89 68,13±1,03 78,78±1,09
Альбумины, г/л 30,06±0,51 30,68±0,27 31,91±0,56 31,04±0,30 30,53±0,18 31,4±0,31 30,91±0,39
% 43,87±0,81 42,8±0,96 39,73±0,76 43,67±0,66 39,64±0,38 46,16±0,92 39,31±0,66
1-глобулины, г/л 4,21±0,07 4,34±0,1 4,54±0,23 4,25±0,07 4,65±0,06 4,03±0,07 4,73±0,06
% 6,04±0,02 6,02±0,02 5,69±0,31 5,98±0,02 6,03±0,009 6,05±0,02 6,01±0,03
2-глобулины, г/л 6,37±0,11 6,55±0,16 6,99±0,19 6,4±0,1 7,0±0,08 6,05±0,12 7,5±0,35
% 9,15±0,04 9,08±0,04 8,73±0,28 8,99±0,03 9,08±0,02 8,88±0,04 9,03±0,07
-глобулины, г/л 7,37±0,12 7,68±0,18 8,92±0,22 7,58±0,12 8,41±0,12 7,21±0,13 8,66±0,27
% 10,56±0,03 10,65±0,03 11,09±0,21 10,66±0,02 10,89±0,05 10,58±0,03 11,45±0,25
-глобулины, г/л 21,22±0,77 22,81±1,13 25,38±1,89 30,7±0,67 26,53±0,53 19,44±0,85 26,98±0,71
% 30,38±0,72 31,46±0,87 31,79±2,32 26,08±0,59 34,36±0,33 28,47±0,82 34,20±0,61
Имунноглубины, г/л
G 9,86±0,57 12,4±0,62 9,53±0,52 11,92±0,49 8,68±1,05 11,54±0,56
M 2,61±0,12 3,82±0,19 2,72±0,2 3,33±0,17 2,13±0,25 3,63±0,15
A 2,12±0,19 3,08±0,15 2,01±0,11 2,43±0,4 1,57±0,21 2,97±0,14
A/Г 0,79±0,02 0,75±0,03 0,74±0,08 0,78±0,02 0,66±0,01 0,86±0,03 0,65±0,02
Общий холестирин, мМоль/л 2,48±0,31 2,94±0,11 4,06±0,19 3,23±0,09 3,72±0,04 3,15±0,07 3,75±0,16
Холестирин ЛПВП, мМоль/л 0,81±0,07 0,94±0,03 1,24±0,05 0,97±0,02 1,18±0,04 0,95±0,03 1,16±0,03
Холестирин ЛПВП, мМоль/л 1,3±0,12 1,64±0,06 2,27±0,06 1,92±0,07 2,18±0,09 2,34±0,07 2,23±0,05
Холестирин ЛПОНП, мМоль/л 0,34±0,08 0,34±0,04 0,69±0,08 0,31±0,06 0,64±0,03 0,69±0,04 0,74±0,06
Коэффициент атерогенности 1,94±0,22 2,14±0,1 2,47±0,11 2,33±0,09 2,23±0,04 1,86±0,06 2,23±0,11
Триглецирин общ., мМоль/л 0,73±0,04 0,73±0,02 0,32±0,04 0,67±0,03 0,29±0,01 0,32±0,02 0,34±0,03
-липопротеиды, г/л 2,55±0,15 3,91±0,22 3,01±0,14 3,48±0,,09 2,91±0,1 3,49±0,19

Таблица 2
Динамика РИД-положительных реакций у телок 5-7-месячного возраста
Показатели Контроль Опыт
без применения препаратов (n=13) с применением лигфола (n=8) с применением лигфола и янтарной кислоты (n=9)
через 3 месяца через 6 месяцев через 3 месяца через 6 месяцев через 3 месяца через 6 месяцев
РИД 3 полож. 3 полож. отриц. отриц. отриц. отриц.
Титр антител 1:2 1:2

Таблица 3
Динамика клинико-физиологических показателей
№ п/п контрольных* / опытных животных Живая масса тела контрольных / опытных телок до начала опыта, кг Живая масса тела контрольных / опытных телок через 4 месяца, кг % прироста живой массы контрольных / опытных телок
Телки 5-7-месячного возраста
1/1 150/150 220/230 46,7/53,3
2/2 140/140 170/210 21,4/50,0
3/3 170/175 240/245 41,2/40,0
4/4 140/135 210/210 50,0/55,6
5/5 145/145 240/220 65,5/51,7
6/6 150/150 205/230 36,7/53,3
7/7 150/155 190/225 26,7/45,2
8/8 150/155 225/245 50,0/58,1
9/9 140/135 210/21 50,0/55,6
Общий вес 1335/1340 1910/2025 43,1/51,1
Средне 151±4,0/153±3,3 212,2±10,8/225±5,87
Примечание: контроль с применением Лигфола

Проведенные исследования подтвердили эффективность сочетанного применения лигфола и янтарной кислоты молодняку крупного рогатого скота для защиты от заражения ВЛКРС, о чем свидетельствует отсутствие выявления зараженных животных среди опытных телок 5-7-месячного возраста в течение 6 месяцев и наличие серопозитивных контрольных телок-аналогов в течение этого срока. В условиях отсутствия средств специфической профилактики лейкоза крупного рогатого скота сочетанное применение лигфола и янтарной кислоты обеспечивает высокий уровень иммунобмологической защиты организма и профилактирует появление РИД-положительных реакций, т.е. развитие лейкозного процесса у крупного рогатого скота.

Источники информации

2. RU 2188655 C2, 2002.

3. Наставление по применению лигфола в качестве адаптагена и стресс-корректора в ветеринарии: утв. Департаментом ветеринарии Минсельхоза РФ 03.05.2001, №13-4-03-0063.

4. www.humiphami.ru.

5. Итоги и перспективы применения гуминовых препаратов в продуктивном животноводстве, коневодстве и птицеводстве: Сб. докл. конф. М., 2006. – 62 с.

Формула изобретения

Способ профилактики лейкоза крупного рогатого скота, включающий внутримышечное введение телятам лигфола, отличающийся тем, что телятам 6-месячного возраста применяют лигфол двумя однократными циклами 1 раз в месяц в течение 3 месяцев – первый цикл в дозе 5,0 мл и второй цикл в дозе 10,0 мл и янтарную кислоту в дозе 100,0 мг 1 раз в сутки в течение 10 суток с интервалом в 10 суток в течение 6 месяцев.

Categories: BD_2346000-2346999