Патент на изобретение №2345715
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ (ЭКО) У ПАЦИЕНТОК С АУТОИММУННЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ
(57) Реферат:
Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству и педиатрии, и может использоваться для прогнозирования результатов экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) у пациенток с аутоиммунными заболеваниями. Способ обеспечивает при прогнозе 100% распределение пациенток по группам удачного или неудачного исхода проведения ЭКО. У женщины устанавливают наличие в анамнезе аднексита, наличие в фенотипе HLA-антигенов В 18, Cw3, Cw4 и количество тромбоцитов в коагулограмме. Вычисляют прогностический индекс F по следующей формуле: F=1,4×X1-1,3×X2-2,4×X3-2,1×X4+0,019×X5-2,5; где X1 – наличие (либо отсутствие) в фенотипе женщины HLA-антигена В 18 (1, либо 0); Х2 – наличие (либо отсутствие) в фенотипе женщины HLA-антигена Cw3 (1, либо 0); Х3 – наличие (либо отсутствие) в фенотипе женщины HLA-антигена Cw4 (1, либо 0); Х4 – наличие (либо отсутствие) в анамнезе аднексита (1, либо 0); Х5 – количество тромбоцитов в коагулограмме (109/л). Если F больше 0, прогнозируют удачный исход проведения ЭКО и ПЭ; при значениях F меньше 0, судят о нецелесообразности проведения ЭКО на данном этапе в связи с предполагаемым отсутствием положительного результата ЭКО.
(56) (продолжение): CLASS=”b560m”в полость матки для лечения женского бесплодия. Приказ №301 МЗ РФ от 28.12.1993. MCNATTY КР et al. Control of early ovarian follicular development. J Reprod Fertil Suppl. 1999, 54, p.3-16, реф.
Изобретение относится к области медицины, а именно акушерству. Исторически новое направление в лечении бесплодия – экстракорпоральное оплодотворение яйцеклетки и перенос эмбриона (ЭКО и ПЭ) возникло в 1978 г. в Англии. Метод был разработан Р.Эдвардсом и П.Стептоу и назван in vitro fertilization and embryo transfer. В России этот метод впервые был внедрен в 1985 г. в НИИ акушерства и гинекологии МЗ СССР под руководством Б.В.Леонова и В.И.Кулакова. Частота наступления беременности после ЭКО, по данным всемирного регистра, составляет около 20%. Однако есть страны и центры, в которых этот показатель превышает 30%. По частоте наступления беременности в программе ЭКО результаты в ведущих центрах России практически не отличаются от европейских (26,2%). Поэтому в повседневной работе врача-репродуктолога необходимо иметь недорогой, эффективный и желательно неинвазивный метод, определяющий вероятность наступления беременности и целесообразность применения методов ВРТ (вспомогательных репродуктивных технологий) у каждой женщины. Уровень техники. Аналоги. Существуют методики оценки овариального резерва у конкретной пациентки, позволяющие делать вывод о перспективах ответа яичников на гормональную стимуляцию. В основе этих методов лежит определение базального уровня ФСГ (фолликулостимулирующего гормона), тест с нагрузкой кломифенцитратом, уровень ингибина В, а также оценка объема яичников и количества фолликулов с помощью трансвагинального ультразвукового исследования [1, 3, 4, 7]. Прототип. Известна прогностическая модель эффективности ЭКО, использующая показатели уровня цитокинов в фолликулярной жидкости, а также показателей иммунного статуса и фертилизации ооцитов у женщин на пике стимулированной суперовуляции [5], однако лабораторную оценку уровня цитокинов в фолликулярной жидкости пока еще нельзя признать доступной для широкого использования. К тому же, данные модели применимы уже в проводимом цикле ЭКО, а не на этапе подготовки. Исследования последних лет выявили отчетливую связь между развитием аутоиммунных процессов в организме человека и репродуктивными неудачами в виде бесплодия, невынашивания беременности, неблагоприятного исхода программ ЭКО. Инфекционные процессы в органах репродукции, инвазивные манипуляции (оперативные вмешательства на матке и придатках) инициируют возникновение аутоиммунных реакций, направленных на органы и ткани репродуктивной системы. К повышению титров аутоантител предрасполагают стресс, беременность, возрастной фактор и многие заболевания. Известно, что аутоиммунные процессы играют важную роль в т.н. синдроме репродуктивных потерь (Reproductive failure syndrome), к которому относятся эндометриоз, бесплодие неясной этиологии и спонтанные аборты в результате лечения бесплодия. В успехе программы экстракорпорального оплодотворения особое значение имеет иммунологическая реактивность организма женщины, от состояния которой зависит имплантация перенесенных в полость матки эмбрионов и нормальное развитие беременности. Учитывая влияние аутоиммунных процессов на успех программ ЭКО, представляется важным прогнозировать результаты применения дорогостоящих технологий у пациенток, страдающих аутоиммунными заболеваниями. Сущность изобретения. Целью изобретения является прогнозирование конечных результатов применения экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и переноса эмбриона в полость матки (ПЭ), т.е. наступление или отсутствие беременности у женщин, страдающих аутоиммунными заболеваниями на этапе подготовки к беременности. Поставленная цель достигается с помощью вычисления прогностического индекса, что позволяет сделать вывод о целесообразности проведения ЭКО на данном этапе. Данный способ прогнозирования применим к пациенткам с аутоиммунными заболеваниями (аутоиммунный тиреоидит, антифосфолипидный синдром и др.). Способ осуществляется следующим образом: при изучении акушерско-гинекологического анамнеза уточняют наличие хронического аднексита. Проводят гистотипирование по системе HLA: определяют HLA-антигены I класса у женщины. Для этого проводят забор 5 мл венозной крови натощак утром. Лимфоциты выделяют в градиенте плотности фиколл-верографина. Для типирования HLA-антигенов I класса используют мононуклеары, полученные из периферической крови с помощью градиентного центрифугирования. Лимфоциты, используемые в реакциях серологического типирования, должны быть жизнеспособны. Реакция учитывается под микроскопом по проценту лизиса клеток: негативная реакция (лизировано менее 10% клеток), сомнительная (лизировано от 11 до 20% клеток), слабо позитивная (лизировано от 21 до 50% клеток), позитивная (лизировано от 51 до 80% клеток), сильно позитивная (лизировано 81% и более клеток) [6]. В результате, после проведения реакции определяют фенотип человека по I классу HLA-антигенов, состоящий из 6 антигенов, по два аллеля на каждом локусе: А, В, Cw. В данном способе учитывают наличие в фенотипе женщины следующих HLA-антигенов: В 18, Cw3, Cw4. Далее проводят определение количества тромбоцитов в крови фазово-контрастным методом (G.Brecher et al., 1953) с использованием микроскопа “Standart-20” (Германия) [2]. На основании полученных данных вычисляют прогностический индекс F по формуле: F=1,4×X1-1,3×X2-2,4×X3-2,1×X4+0,019×X5-2,5; где X1 – наличие в фенотипе женщины HLA-антигена В 18; Х2 – наличие в фенотипе женщины HLA-антигена Cw3; Х3 – наличие в фенотипе женщины HLA-антигена Cw4; Х4 – наличие в анамнезе аднексита; Х5 – количество тромбоцитов в коагулогоамме (109/л). При значениях F>0, прогнозируют удачный исход проведения ЭКО и ПЭ; при F<0, судят о нецелесообразности проведения ЭКО на данном этапе в связи с предполагаемым отсутствием положительного результата ЭКО. Вероятность правильного распределения пациенток по группам составляет 100%. Пример 1. Пациентка Кутдусова B.C., 35 лет. Диагноз: Бесплодие II (сочетанного генеза). Спаечный процесс органов малого таза III-IV ст. Аденомиоз. Иммунодепрессия по HLA. Соматические заболевания: Нефроптоз справа I ст. НЦД по гипотоническому типу. Хронический тонзиллит, стадия ремиссии. Диффузный узловой зоб I ст. Гинекологический анамнез отягощен: хроническим аднекситом с 24 лет, привычным невынашиванием (с 1997 по 2001 гг. 5 самопроизвольных выкидышей в сроках 5-7 недель, 1 регрессирующая беременность в сроке 5 недель). С 2001 по 2004 гг. – вторичное бесплодие сочетанного генеза. В 2003 г. установлен диагноз: АФС. Гистотипирование по HLA: HLA-фенотип: А 2, -; В 18, 51; Cw2 Количество тромбоцитов в коагулограмме – 232,0·109/л. Попытка ЭКО и ПЭ – первая. При вычислении прогностического индекса по формуле: F(x)=1,4×1-1,3×0-2,4×0-2,1×1+0,019×232-2,5=1,208 получено значение F=1,208, что >0, следовательно, у пациентки прогнозируют положительный результат данной попытки ЭКО и ПЭ. Проведена процедура ЭКО и ПЭ, перенесено 4 эмбриона хорошего качества, зарегистрирована маточная беременность 1 плодом. Пример 2. Пациентка Галимова Р.Д., 33 лет. Диагноз: Бесплодие II абсолютно трубного генеза. Соматические заболевания: Миопия II ст. Ортостатическая протеинурия. Аутоиммунный тиреоидит. Узловой зоб, компенсация. Гинекологический анамнез отягощен: хроническим аднекситом с 24 лет, в 1999 г. и 2003 г. – тубэктомии (левосторонняя и правосторонняя) в связи с внематочными беременностями. С 2003 г. – вторичное бесплодие абсолютно трубного генеза. Гистотипирование по HLA: HLA-фенотип: А 10, -; В 27, 35; Cw4 Количество тромбоцитов в коагулограмме – 185,0·109/л. Попытка ЭКО и ПЭ – первая. При вычислении прогностического индекса по формуле: F(x)=1,4×0-1,3×0-2,4×1-2,1×1+0,019×185-2,5=-3,485 получено значение F=-3,485, что <0, следовательно, проведение ЭКО на данном этапе нецелесообразно. Однако пациентка настояла на проведении процедуры ЭКО и ПЭ (перенесено 4 эмбриона хорошего качества), беременности не зарегистрировано. Пример 3. Ольховская Е.А., 36 лет. Диагноз: Бесплодие II абсолютно трубного генеза. Соматические заболевания: Хронический бронхит, ремиссия. НЦЦ по гипертоническому типу. Субатрофический фарингит. Миопия II степени. Нарушение жирового обмена I степени. Узловой зоб. С 2001 г. установлен диагноз: АФС. Гинекологический анамнез отягощен: хроническим аднекситом с 22 лет, в 1987 г. – медицинский аборт в сроке 8 недель, в 1993 г. – сочетание левосторонней внематочной беременности с регрессирующей маточной беременностью (удалены обе маточные трубы, проведено выскабливание полости матки), послеоперационный период осложнился эндометритом. С 1993 г. – вторичное бесплодие абсолютно трубного генеза. С 1993 г. по 2003 г. – проведено 9 попыток ЭКО и ПЭ, беременностей не зарегистрировано. Гистотипирование по HLA: HLA-фенотип: А 1, 8; В 8, -; Cw2 Количество тромбоцитов в коагулограмме – 208,0·109/л. Попытка ЭКО и ПЭ – десятая. При вычислении прогностического индекса по формуле: F(x)=1,4×0-1,3×0-2,4×0-2,1×1+0,019×208-2,5=-0,648 получено значение F=-0,648, что <0, следовательно, прогнозируют нецелесообразность проведения ЭКО на данном этапе. Однако пациентка настояла на проведении очередной процедуры ЭКО и ПЭ (перенесено 6 эмбрионов хорошего качества), беременности не зарегистрировано. Пример 4. Жукова Н.В., 30 лет. Диагноз: Бесплодие I неясного генеза (11 лет). Соматические заболевания: Хронический холецистит, ремиссия. НЦД по гипертоническому типу. АИТ, эутиреоз. Гинекологический анамнез отягощен: хроническим аднекситом с 19 лет, генитальным эндометриозом легкой степени тяжести, аденомиозом I степени. Гистотипирование по HLA: HLA-фенотип: А 25, -; В 16, 18; Cw2 Количество тромбоцитов в коагулограмме – 236,0·109/л. Попытка ЭКО и ПЭ – первая. При вычислении прогностического индекса по формуле: F(x)=1,4×1-1,3×0-2,4×0-2,1×1+0,019×236-2,5=2,684 получено значение F=2,684, что >0, следовательно, в данном случае прогнозируют положительный результат ЭКО. После проведения ЭКО и ПЭ, зарегистрирована маточная беременность 1 плодом. Таким образом, данный способ позволяет избежать ненужных попыток ЭКО, а следовательно, и финансовых затрат на проведение процедуры и в конечном счете улучшить результативность ЭКО за счет более точного отбора пациенток на этапе планирования беременности. Источники информации 2. Баркаган З.С., Момот А.П. Основы диагностики системы гемостаза. М.: Ньюдиамед-АО, 1999. 224 с. 6. Теплова С.Н. Антигенные системы эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов / С.Н.Теплова. – Челябинск. – 2000, – 111 с. Формула изобретения
Способ прогнозирования результатов экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов (ЭКО и ПЭ) у пациенток с аутоиммунными заболеваниями, отличающийся тем, что у женщины устанавливают наличие в анамнезе аднексита, определяют наличие в фенотипе HLA-антигенов В 18, Cw3, Cw4 и количество тромбоцитов в коагулограмме и вычисляют прогностический индекс F по формуле F=1,4×X1-1,3×X2-2,4×X3-2,1×X4+0,019×X5-2,5, где X1 – наличие (либо отсутствие) в фенотипе женщины HLA-антигена В 18(1, либо 0); Х2 – наличие (либо отсутствие) в фенотипе женщины HLA-антигена Cw3 (1, либо 0); Х3 – наличие (либо отсутствие) в фенотипе женщины HLA-антигена Cw4 (1, либо 0); Х4 – наличие (либо отсутствие) в анамнезе аднексита (1, либо 0); Х5 – количество тромбоцитов в коагулограмме (109/л); и если F больше 0, прогнозируют удачный исход проведения ЭКО и ПЭ, а при значениях F меньше 0 судят о нецелесообразности проведения ЭКО на данном этапе.
|
||||||||||||||||||||||||||
