Патент на изобретение №2345424
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПОРАЖЕНИЯ СУСТАВОВ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
(57) Реферат:
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к экспериментальной ревматологии, и может быть использовано для моделирования воспалительного поражения суставов. Для этого вначале осуществляют предварительное охлаждение конечностей в лотке со смесью льда и воды при температуре 2-6°С в течение 13-15 минут ежедневно в течение 1-3 дней. Затем через 1-2 часа после последнего охлаждения проводят инъекции адъюванта в подушечки задних лап. Через 35-40 дней после введения адъюванта на фоне хронизации процесса начинают производить необходимые эксперименты. Способ обеспечивает адекватное воспроизведение модели. 1 табл.
(56) (продолжение): CLASS=”b560m”моделировании адъювантного артрита. – Патол. физиология и эксперим. терапия, 1998, №2, с.20-23. ВАЙТКЕНЕ Д.И. Моделирование иерсиниозного реактивного артрита на фоне введения десферала и препарата Ferram Lek у Lewis крыс. – Иммунопатология, аллергология и инфектология, 2001, №2, с.22-33. RATKAY L.G. et al. Complete Freund
Предлагаемый способ лишен указанного недостатка. Сущность его заключается в том, что инициацию адъювантного артрита производят на фоне предварительного переохлаждения суставов. Вначале подопытных животных, например крыс, помещают в лоток, наполненный водой со льдом, сроком на 13-15 минут, ежедневно в течение 3 дней. Через 1-2 часа после последнего охлаждения проводят инъекции адъюванта в подушечки задних лап. Через 35-40 дней после введения адъюванта на фоне хронизации процесса начинают производить требуемые исследования. Таким образом, технологическая последовательность способа включает предварительное охлаждение конечностей в лотке со смесью льда и воды при температуре 2-6°С в течение 13-15 минут, ежедневно в течение 3 дней. Через 1-2 часа после последнего охлаждения проводят инъекции адъюванта в подушечки задних лап. Через 35-40 дней после введения адъюванта на фоне хронизации процесса начинают производить необходимые эксперименты. Для изучения адекватности и тяжести предлагаемой модели изучено 60 крыс-самцов линии Вистар массой тела 200-250 г, разделенные на 5 групп. Первую группу представляли 11 интактных животных. 11 крысам (группа 2) в течение 3 дней производили охлаждение конечностей при температуре 2-6°С и экспозиции 13-15 минут. 12 крысам третьей группы инициировался адъювантный артрит по способу прототипа. 12 крыс 4 группы подвергались разовому однодневному переохлаждению конечностей по описанной выше технологии, после завершения которого через 1-2 часа производилась инициация адъювантного артрита. 14 крыс 5 группы подвергались разовому трехдневному переохлаждению конечностей по описанной выше технологии (см. гр.2), после завершения которого через 1-2 часа производилась инициация адъювантного артрита. На 35 день производилось исследование прижизненных лабораторных тестов, после чего животные иммунизировались внутрибрюшинно 2,5 мл 10% взвеси эритроцитов барана, на 40-вой день забивались с исследованием внутренних органов. Данные исследований приведены в таблице.
Примечание: 3 охл – 3 сеанса охлаждения 1 охл – 1 сеанс охлаждения БЦЖ – инициация адъювантной болезни 3 охл + БЦЖ – 3 сеанса охлаждения с последующей инициацией адъюванта 1 охл + БЦЖ – 1 сеанс охлаждения с последующей инициацией адъюванта Для адекватной оценки полученных моделей изучены параметры – масса тимуса, клеточность селезенки и фагоцитарный индекс лейкоцитов. Именно эти параметры свидетельствовали как о генеральной реакции имунокомпетентных органов на воспаление, так и о фагоцитарном эффекте. Полученные результаты свидетельствуют о четкой общеорганизменной реакции как на повреждающие факторы – переохлаждение и воспалительный процесс в суставах, так и о взаимно потенцирующем патогенетическом действии указанных факторов. Способ может быть проиллюстрирован следующими примерами. 1. Интактная крыса-самец линии Вистар №32, масса тела – 222 г. Дополнительных воздействий не получала. Исследование животного осуществлено одновременно с животными опытной группы (на 39-40 день после инициации адъювантного артрита). Масса тимуса – 300 мг, клеточность селезенки – 107,4·106 л/100 мг, ФИЛ – 2,16 бед. 2. Крыса-самец линии Вистар №2, масса тела – 220 г подвергались разовому трехдневному переохлаждению конечностей по описанной выше технологии (см. гр.2), после завершения которого через 1-2 часа производилась инициация адъювантного артрита. Исследование животного осуществлено на 39-40 день после инициации адъювантного артрита. Масса тимуса – 189 мг, клеточность селезенки – 61,0·106 л/100 мг, ФИЛ – 1,02 ед. 3. Крыса-самец линии Вистар №5, масса тела – 190 г подвергались разовому трехдневному переохлаждению конечностей по описанной выше технологии (см. гр.2), после завершения которого через 1-2 часа производилась инициация адъювантного артрита. Исследование животного осуществлено на 39-40 день после инициации адъювантного артрита. Масса тимуса – 181 мг, клеточность селезенки – 44,0·106 л/100 мг, ФИЛ – 1,36 ед. 4. Крыса-самец линии Вистар №1, масса тела – 170 г подвергались разовому трехдневному переохлаждению конечностей по описанной выше технологии (см. гр.2), после завершения которого через 1-2 часа производилась инициация адъювантного артрита. Исследование животного осуществлено но 39-40 день после инициации адъювантного артрита. Масса тимуса – 256 мг, клеточность селезенки – 93,0·106 л/100 мг, ФИЛ – 1,02 ед.
Формула изобретения
Способ моделирования воспалительного поражения суставов в эксперименте путем подкожного введения в область суставов нижних конечностей адъюванта, отличающийся тем, что вначале осуществляют предварительное охлаждение конечностей в лотке со смесью льда и воды при температуре 2-6°С в течение 13-15 мин, ежедневно в течение 1-3 дней, затем через 1-2 ч после последнего охлаждения проводят инъекции адъюванта в подушечки задних лап, а через 35-40 дней после введения адъюванта на фоне хронизации процесса начинают производить необходимые эксперименты.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
s adjuvant induces an earlier and more severe arthritis in MRL-lpr mice. J Immunol. 1993 Nov 1; 151(9):5081-7. IWATA K. et al. Medullary dorsal horn neuronal activity in rats with persistent temporomandibular joint and perioral inflammation. J Neurophysiol. 1999 Sep; 82(3):1244-53.