Патент на изобретение №2344839

(54) СПОСОБ НАЛИВКИ ДЛЯ ВИЗУАЛИЗАЦИИ ЛИКВОРНОЙ СИСТЕМЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА ПЛОДОВ И НОВОРОЖДЕННЫХ

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине, а именно к патоморфологии, и может быть использовано для улучшения качества наливки ликворной системы головного мозга для визуализации всех ее отделов, что необходимо для морфологической диагностики патологии системы. Предварительно перед наливкой осуществляют фиксацию извлеченного целиком из полости черепа головного мозга плода или новорожденного 22-40 недель гестации в 10% растворе нейтрального формалина в течение 2-3 недель, затем проводят наливку ликворной системы с помощью шприца, соединенного с внутривенной канюлей, введенной на 2-3 мм через срединную апертуру в полость IV желудочка, используя наливочную массу, окрашенную черной тушью, в виде раствора 10 г сухого пищевого желатина в 240 мл горячей воды (80-90°С), профильтрованного, охлажденного до +37°С и введенного под давлением 200 мм рт.ст., при этом последние 5 мл раствора вливают при постепенном выведении канюли из дистальных отделов ликворной системы, после чего головной мозг охлаждают при t +5°C в течение 1-2 часов и производят разрезы, позволяющие визуализировать различные отделы ликворной системы головного мозга. Разработанный способ улучшает качество наливки ликворной системы головного мозга с достижением заполняемости всех ее отделов без травматизации структур мозга, за счет того что не формируются искусственные отверстия и контрапертуры и нервная ткань не повреждается воздействием высокой температуры и давления, что дает возможность дальнейшего патоморфологического исследования.

(56) (продолжение):

CLASS=”b560m”с.40. Проценко Е.Б. Методические подходы к патоморфологическому исследованию головного мозга плодов и новорожденных с гидроцефалией. – Архив патологии. 2007, №6, с.42. LARROCHE, J.C.L., Developmental Pathology of the Neonat. Amsterdam, Elsevier, North Holland, 1977, р.525.

Изобретение относится к медицине, а именно, к патоморфологии, и может быть использовано для улучшения качества наливки, позволяющей визуализировать все отделы ликворной системы головного мозга плодов и новорожденных 22-40 недель гестации, что необходимо для морфологической диагностики различной патологии системы.

Актуальность предлагаемого способа определяется тем, что патоморфологическое исследование головного мозга плодов ранних сроков гестации затруднено вследствие студнеобразной консистенции и легкой повреждаемости структур (1). Причины патологии ликворной системы, в частности вентрикуломегалии, макроскопически установить на таком объекте практически невозможно и место обструкции предполагается гипотетически по локализации расширения. В связи с этим разработка простого, дешевого и доступного в использовании в любых патологоанатомических отделениях и лабораториях способа наливки ликворной системы головного мозга имеет большое значение для практического здравоохранения, который позволяет объективно оценить структуру всех отделов ликворной системы головного мозга плодов и новорожденных 22-40 недель гестации.

Известны способы наливки для визуализации различных анатомических структур наливочными подкрашенными массами, которые применяются в нормальной, топографической и патологической анатомии с 18-19 столетия. Указанные способы использовались в основном для изучения анатомии различных сосудов, топографии и анатомо-топографических взаимоотношений внутренних органов, для обоснования хирургических методов лечения и решения задач, которые не отвечают требованиям нашего исследования (2, 3, 4, 5).

Недостатки способа

1. Осуществлялась наливка только боковых и III желудочков без учета других отделов ликворной системы головного мозга (водопровод мозга, IV желудочек).

2. Использовалась Гиртлевская восковая масса: воск оказывает грубое воздействие (высокая температура) на студнеобразные структуры головного мозга плодов и новорожденных, что может привести к их повреждению.

3. Способ осуществлялся на макропрепаратах головного мозга взрослых людей.

4. Способ осуществлялся через перфорационные отверстия в черепе.

5. Наливка производилась для изучения конфигурации латеральных желудочков, степени их наполняемости и проекции на череп с определением наиболее удобных и доступных точек трепанации для осуществления пункции, расстояния их от желудочков и направления пункции.

Указанные недостатки предлагается устранить в заявляемом способе.

Заявляемым техническим результатом является улучшение качества наливки ликворной системы головного мозга с достижением заполняемости всех ее отделов; осуществление наливки ликворной системы головного мозга плодов и новорожденных 22-40 недель гестации без травматизации структур мозга за счет того, что не формируются искусственные отверстия и контрапертуры и нервная ткань не повреждается воздействием высокой температуры и давления, что дает возможность для дальнейшего гистологического исследования.

Новизна способа

Впервые предлагается проводить наливку ликворной системы предварительно фиксированного головного мозга плодов и новорожденных 22-40 недель гестации через естественное отверстие – срединную апертуру IV желудочка с помощью шприца, соединенного с внутривенной канюлей, введенной на глубину 2-3 мм в полость IV желудочка, используя раствор 10 г сухого пищевого желатина в 240 мл горячей воды (80-90°С), профильтрованного, охлажденного до +37°С и введенного под давлением 200 мм рт.ст.

Данный способ позволяет выяснить гестационные сроки окончательного формирования ликворной системы головного мозга, заключающегося в проходимости всех отверстий и апертур.

Способ позволяет провести дифференциальную диагностику физиологической (дилятация тех или иных отделов ликворной системы при нормально сформированных путях оттока ликвора) и патологической вентрикуломегалии.

Поскольку патоморфологическое исследование головного мозга плодов и новорожденных затруднено вследствие малых размеров, одинаковых по цвету структур и отверстий, студнеобразной консистенции и легкой повреждаемости нервной ткани, разработанный способ наливки позволяет объективно оценить состояние ликворной системы головного мозга в отличие от ранее существующей субъективной морфологической диагностики патологии ликворной системы плодов и новорожденных.

В доступных литературных источниках нам не встретилось описание предлагаемой методики наливки ликворной системы, поэтому подбор необходимых параметров (концентрация, температура, давление, время экспозиции) осуществлялся самостоятельно, эмпирическим путем.

Способ осуществляется следующим образом.

Предварительно перед наливкой осуществляется длительная, в течение 2-3 недель, фиксация в 10% растворе нейтрального формалина извлеченного целиком из полости черепа головного мозга.

Сухой пищевой желатин (10 г) разводится 240 мл горячей воды (t=80-90°С) до полного растворения. При этом раствор желатина должен иметь светло-желтую окраску, быть полупрозрачным, иметь сиропообразную консистенцию. Далее раствор желатина подкрашивается черной тушью из расчета 1-2 мл туши на 250 мл раствора. Полученный готовый раствор фильтруется через двойной слой марли и охлаждается до температуры +37°С.

Для осуществления наливки ликворной системы головного мозга плодов и новорожденных через срединную апертуру IV желудочка предлагаем использовать внутривенную канюлю с инъекционным портом 24 G (Vasofix Certo, фирмы B.Braun). Кроме канюли для осуществления указанной процедуры необходим шприц, рассчитанный на 20 мл раствора.

Головной мозг помещается в лоток вентральной поверхностью вверх. Оценивается наличие и состояние апертур IV желудочка, которые довольно хорошо различимы после удаления мягкой мозговой оболочки, покрывающей продолговатый мозг и мозжечок, и большой цистерны, под которой находится щелевидная по форме срединная апертура. При сформированных латеральных апертурах между клочком мозжечка и оливами продолговатого мозга расположено сосудистое сплетение IV желудочка, которое аккуратно удаляют, поскольку может затруднять заполнение и окрашивание апертур.

Канюля вводится через срединную апертуру в полость IV желудочка на глубину 2-3 мм. К канюле подсоединяется шприц и под давлением около 200 мм рт.ст. вливается 250 мл раствора желатина. Последние порции раствора желатина (около 5 мл) вливаются при постепенном выведении канюли из дистальных отделов ликворной системы головного мозга.

По завершению введения подготовленной массы головной мозг помещается в холодильник при температурном режиме +5°С на 1-2 часа для охлаждения и затвердевания раствора желатина. По истечении указанного времени с контрольной целью производится поперечный разрез на уровне задней трети затылочных рогов боковых желудочков, позволяющий увидеть дистальные отделы боковых желудочков мозга. При правильно выполненной методике и свободной проходимости всех отделов ликворной системы головного мозга полость задних рогов будет выполнена желатином, окрашенным в черный цвет. Несоблюдение основных условий выполнения предлагаемой методики (низкое давление, под которым раствор желатина вводится в ликворную систему головного мозга; недостаточно тщательно выполненная фильтрация наливочной массы, приводящая к закупорке межжелудочковых отверстий крупными частицами раствора; недостаточный объем раствора) может стать причиной неравномерного заполнения ликворной системы. Отсутствие желатина в одинаковых по размеру концевых отделах боковых желудочков свидетельствует о вышеперечисленных погрешностях, совершенных при осуществлении методики. В этих случаях процедуру наливки необходимо повторить.

Для визуализации всех отделов ликворной системы головного мозга производят горизонтальный симметричный разрез через полушария на уровне спайки свода. Разрез позволяет оценить заполнение передних и задних рогов боковых желудочков, межжелудочковых отверстий, III желудочка. Третий желудочек дополнительно оценивается с помощью нескольких параллельных разрезов, проходящих через его полость. Центральная часть боковых желудочков визуализируется после удаления таламуса. С целью оценки состояния нижних рогов боковых желудочков головной мозг укладывается основанием вверх и производится горизонтальный разрез на границе между передней и средней третью верхних и нижних височных борозд. Вскрытие IV желудочка производится сагиттальным разрезом через червь мозжечка по средней линии.

Отличительные признаки способа

Предложен способ наливки ликворной системы головного мозга плодов и новорожденных 22-40 недель гестации, заключающийся в том, что предварительно перед наливкой осуществляют фиксацию извлеченного целиком из полости черепа головного мозга в 10% растворе нейтрального формалина в течение 2-3 недель, затем проводят наливку ликворной системы с помощью шприца, соединенного с внутривенной канюлей, введенной на глубину 2-3 мм через срединную апертуру в полость IV желудочка, используя наливочную массу, окрашенную черной тушью, в виде раствора 10 г сухого пищевого желатина в 240 мл горячей воды (80-90°С), профильтрованного, охлажденного до +37°С и введенного под давлением 200 мм рт.ст., при этом последние 5 мл раствора вливают при постепенном выведении канюли из дистальных отделов ликворной системы, после чего головной мозг охлаждают при t= +5°С в течение 1-2 часов и производят разрезы, позволяющие визуализировать различные отделы ликворной системы головного мозга.

Преимущества способа

1. Заявляемый способ прост в исполнении.

2. Не требуется дорогостоящего оборудования.

3. Исследование может быть проведено в любом патологоанатомическом отделении, лаборатории.

4. Способ является высоко информативным.

5. Возможность применения на головном мозге плодов с 20 недель гестации несмотря на студневидную консистенцию органа.

6. Наливка осуществляется через естественные отверстия без дополнительных искусственных апертур.

7. Исключены такие повреждающие факторы, как высокие температура и давление, которые повреждающе действуют на нервную ткань, делая невозможным дальнейшее гистологическое исследование головного мозга.

8. Способ позволяет визуализировать всю ликворную систему целиком.

9. Способ позволяет провести объективную дифференциальную диагностику физиологической и патологической вентрикуломегалии на макроскопическом уровне.

ЛИТЕРАТУРА

1. Автандилов Г.Г. Основы патологоанатомической практики. Руководство. М.: РМАПО. – 1994. – 512 с.

2. Гуго Глязер. Исследователи человеческого тела от Гиппократа до Павлова. – М.: Медгиз, 1956. – С.56-65.

3. Крутикова И.Ф. Секреторная, кровеносная и лимфатическая системы поджелудочной железы человека: Автореферат дис. к.м.н. – Л., 1960.

4. Епифанов А.Г. Микроциркуляция и регионарная гемодинамика у больных с окклюзионными заболеваниями артерий нижних конечностей до и после воздействия специальных по структуре бегущих импульсных оболочек магнитных полей: Дис. к.м.н. – Рязань, 1981. – 159 с.

Формула изобретения

Способ наливки ликворной системы головного мозга путем введения наливочной массы, отличающийся тем, что предварительно перед наливкой осуществляют фиксацию извлеченного целиком из полости черепа головного мозга плода или новорожденного 22-40 недель гестации в 10% растворе нейтрального формалина в течение 2-3 недель, затем проводят наливку ликворной системы с помощью шприца, соединенного с внутривенной канюлей, введенной на 2-3 мм через срединную апертуру в полость IV желудочка, используя наливочную массу, окрашенную черной тушью, в виде раствора 10 г сухого пищевого желатина в 240 мл горячей воды (80-90°С), профильтрованного, охлажденного до +37°С и введенного под давлением 200 мм рт.ст., при этом последние 5 мл раствора вливают при постепенном выведении канюли из дистальных отделов ликворной системы, после чего головной мозг охлаждают при t +5°C в течение 1-2 часов и производят разрезы, позволяющие визуализировать различные отделы ликворной системы головного мозга.