Патент на изобретение №2343965

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГАЛЛИЯ-68, ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ, А ТАКЖЕ УСТРОЙСТВО ДЛЯ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ УКАЗАННОГО СПОСОБА

(57) Реферат:

Настоящее изобретение относится к способу получения ⁶⁸Ga из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga и к способу получения меченых изотопом ⁶⁸Ga комплексов с использованием полученного ⁶⁸Ga. Кроме того, изобретение относится к устройству, которое можно использовать для получения ⁶⁸Ga, a также комплексов, меченых изотопом ⁶⁸Ga. Заявленный способ включает взаимодействие элюата из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga с анионообменной смолой на основе полистирола-дивинилбензола, включающей НСО₃ ^– в качестве противоионов и функциональные группы четвертичного амина, и элюирования ⁶⁸Ga из указанной анионообменной смолы. Использование заявленных способов и устройства позволяет снизить объем воды, необходимый для эффективного элюирования галлия, что позволяет повысить концентрацию итогового раствора галлия, используемого для мечения, и, как следствие, повысить удельную активность средств, полученных с использованием данных растворов, поскольку нет необходимости в операции концентрирования, в процессе которой в значительной мере теряется активность галлия. 4 н. и 13 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к способу получения ⁶⁸Ga из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga и к способу получения меченых изотопом ⁶⁸Ga комплексов с использованием полученного ⁶⁸Ga. Кроме того, изобретение относится к устройству, которое можно использовать для получения ⁶⁸Ga, и к устройству, которое можно использовать для получения меченых изотопом ⁶⁸Ga комплексов.

Получение изображений ПЭТ – это методика томографической радионуклидной визуализации, в которой используют молекулы с радиоактивной меткой, испускающие позитроны. Когда позитрон встречает электрон, оба аннигилируют, и в результате высвобождается энергия в форме гамма-лучей, которые и детектирует сканер ПЭТ. Используя природные вещества, которые играют в организме роль молекул-меток, ПЭТ не только дает информацию о структурах организма, но также информацию о физиологических функциях организма или определенных систем организма. Хорошо известная молекула-метка – это, например, 2-фтор-2-деокси-D-глюкоза (ФДГ), которая подобна природной глюкозе, но имеет дополнительный атом ¹⁸F. ПЭТ сканер детектирует гамма-излучение от этого атома фтора, и это дает информацию о метаболизме ФДГ в определенных областях или тканях организма, например в мозге или в сердце. Выбор молекулы-метки зависит от обследуемой области. В общем случае выбирают такую метку, которая аккумулируется в обследуемой области, или избирательно поглощается определенным видом ткани, например раковыми клетками. В результате обследования получают либо серию динамических изображений, либо статическое изображение, получаемое после периода, в течение которого молекула с радиоактивной меткой участвует в исследуемом биохимическом процессе. Сканер определяет пространственное и временное распределение молекулы-метки. ПЭТ представляет собой также и количественный способ визуализации, дающий возможность измерять местные концентрации молекул с радиоактивной меткой.

В качестве меток для ПЭТ обычно используют ¹¹С, ¹⁸F, ¹⁵О, ¹³N или ⁷⁶Br. Недавно были получены новые метки для ПЭТ на основе меченых радиоактивным изотопом комплексов металлов, включающих бифункциональный хелатобразующий агент и радиоактивный металл. Бифункциональные хелатобразующие агенты – это хелатобразующие агенты, которые координируются с ионом металла и связаны с адресным переносчиком (targeting vector), который будет связываться с заданным местом в организме пациента. Такой адресный переносчик может представлять собой пептид, который связывается с определенным рецептором, возможно связанным с определенным участком в организме или с определенным заболеванием. Адресный переносчик может представлять собой также олигонуклеотид, специфичный, например, для активированного онкогена, и следовательно, нацеленный на место локализации опухоли. Преимущество таких комплексов состоит в том, что бифункциональные хелатобразующие агенты можно метить различными радиоактивными металлами, например, ⁶⁸Ga, ²¹³Bi или ⁸⁶Y. Таким образом, меченые радиоактивным изотопом комплексы с особыми свойствами могут быть “скроены” для конкретных приложений.

⁶⁸Ga представляет особый интерес для получения меченых радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga металлических комплексов, используемых в качестве молекул-меток для получения изображений ПЭТ. ⁶⁸Ga получают при помощи генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga, а это означает, что циклотрон не нужен. ⁶⁸Ga на 89% распадается с испусканием позитрона (2,92 МэВ), и его период полураспада (68 мин) достаточен для участия во многих биохимических процессах in vivo без нежелательного облучения. При степени окисления +III ⁶⁸Ga образует стабильные комплексы с различными типами хелатобразующих агентов, и метки на основе ⁶⁸Ga уже используют для визуализации мозга, почек, костей, кровеносной системы, легких и опухолей.

Однако использование ⁶⁸Ga, полученного из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga, для получения меченых изотопом ⁶⁸Ga металлических комплексов, используемых в качестве молекул-меток для ПЭТ, может вызвать ряд проблем. Элюат ⁶⁸Ga из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga часто содержит ⁶⁸Ge, наличие которого приводит к низкой радионуклидной чистоте меченых изотопом ⁶⁸Ga металлических комплексов, получаемых из элюата ⁶⁸Ga. Более того, элюат содержит также так называемые псевдоносители, т.е. катионы других металлов, например Fe³⁺, Al³⁺, Cu²⁺, Zn²⁺ и In³⁺, которые конкурируют с Ga³⁺ в последующей реакции образования комплекса, что в итоге уменьшает удельную активность. Следующим недостатком является то, что концентрация ⁶⁸Ga в элюате из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga низка, т.е. находится в интервале от пикомолярной до наномолярной. Вследствие этого количество хелатобразующего агента в последующей реакции внесения радиоактивной метки изотопом ⁶⁸Ga должно быть высоким для того, чтобы реакция произошла, а это, в свою очередь, приводит к низкой удельной активности. Большое количество хелатобразующего агента создает особенные проблемы тогда, когда для ПЭТ получают меченые изотопом ⁶⁸Ga метки, которые включают бифункциональные хелатобразующие агенты, т.е. хелатобразующие агенты, связанные с адресным переносчиком, так как в организм пациента получит неоправданно высокие количества этих меток.

Шумахер с соавторами [J.Schuhmacher et al., Int. J. appl. Radiat. lsotopes 32, 1981, 31-36] описывает использование анионита Bio-Rad AG 1×8 для обработки 4,5 Н HCl элюата ⁶⁸Ga, полученного из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga, с целью уменьшения количества присутствующего в элюате ⁶⁸Ge. Для элюирования анионита использовали 4 мл воды. Недостатком этого способа является большой объем воды, необходимый для элюирования ⁶⁸Ga из анионита. Если необходимо использовать этот элюат для получения меченых изотопом ⁶⁸Ga меток для ПЭТ, которые включают бифункциональные хелатобразующие агенты, то необходимо далее концентрировать элюат, например, путем выпаривания, что в свою очередь ведет к уменьшению активности ⁶⁸Ga из-за короткого периода полураспада этого радионуклида.

Существует необходимость в получении ⁶⁸Ga из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga таким образом, чтобы ⁶⁸Ga можно было использовать для получения меченых радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga комплексов металлов, в особенности для получения меченых изотопом ⁶⁸Ga меток для ПЭТ, которые включают бифункциональные хелатобразующие агенты с высокой удельной радиоактивностью.

Было обнаружено, что использование анионитов, включающих НСО₃ ^– в качестве противоионов, особенно подходит для очистки и концентрации ⁶⁸Ga из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga. Можно уменьшить не только количество присутствующего в элюате ⁶⁸Ge, но и количество псевдоносителей. Более того, концентрацию ⁶⁸Ga³⁺ можно повысить до наномолярного-микромолярного уровня. Следовательно, можно уменьшить количество хелатобразующего агента в последующей реакции образования комплекса, что существенно повышает удельную радиоактивность. Этот результат важен для получения меченых радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga меток для ПЭТ, которые включают бифункциональный хелатобразующий агент; т.е. агент, связанный с адресным переносчиком, так как повышение удельной радиоактивности дает возможность уменьшить количество таких меток, вводимых в организм пациента.

Таким образом, изобретение предлагает способ получения ⁶⁸Ga путем приведения в контакт элюата из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga с анионитом, включающим НСО₃ ^– в качестве противоионов, и элюирования ⁶⁸Ga из указанного анионита.

Генераторы ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga известны в данной области техники (см. например [C.Loc’h et al., J. Nucl. Med.21, 1980, 171-173] или [J.Schuhmacher et al., Int. J. appl. Radiat. Isotopes 32, 1981, 31-36]). ⁶⁸Ge можно получить в циклотроне при облучении, например, Са₂(SO₄)₃ протонами с энергией 20 МэВ. Он также имеется в продаже, например, в виде ⁶⁸Ge в 0,5 М HCl. В общем случае ⁶⁸Ge помещают в колонку, состоящую из органической смолы или неорганического оксида металла, такого как диоксид олова, оксид алюминия или диоксид титана. ⁶⁸Ga элюируют из колонки водным раствором HCl, при этом получают ⁶⁸GaCl₃. Таким образом, ⁶⁸Ga находится в форме ⁶⁸Ga³⁺, который можно использовать для синтеза меченых радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga комплексов, например, для получения меченых радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga меток для ПЭТ.

Подходящие для роли генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga колонки состоят из неорганических оксидов, таких как оксид алюминия, диоксид титана или диоксид олова, или из органических смол, таких как смолы, включающие фенольные гидроксильные группы (US-A-4264468) или пирогаллол [J.Schuhmacher et al., Int. J. appl. Radiat. Isotopes 32, 1981, 31-36]. В предпочтительном воплощении предлагаемого способа используют генератор ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga, включающий колонку, включающую диоксид титана.

Концентрация водного раствора HCl, используемого для элюирования ⁶⁸Ga из колонки-генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga, зависит от материала колонки. Удобно использовать для элюирования ⁶⁸Ga 0,05-5 М HCl. В предпочтительном воплощении изобретения элюат получают из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga, включающего колонку, включающую диоксид титана, и элюируют ⁶⁸Ga при помощи 0,05-0,1 М HCl, предпочтительно приблизительно 0,1 М HCl.

В предпочтительном воплощении предлагаемого способа используют сильный анионит, включающий НСО₃ ^– в качестве противоионов, предпочтительно сильный анионит, включающий НСО₃ ^– в качестве противоионов. В дополнительном предпочтительном воплощении изобретения этот анионит включает функциональные группы четвертичного амина. В другом дополнительном предпочтительном воплощении изобретения этот анионит представляет собой сильную анионообменную смолу на основе полистирола-дивинилбензола. В особенно предпочтительном воплощении изобретения используемый в предлагаемом способе анионит представляет собой сильную анионообменную смолу, включающую НСО₃ ^– в качестве противоионов, функциональные группы четвертичного амина и смолу на основе полистирола-дивинилбензола.

В предлагаемом способе для элиюрования ⁶⁸Ga из анионита можно использовать воду.

Предпочтительно использовать полученный в соответствии с предлагаемым способом ⁶⁸Ga для получения меченых радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga комплексов, предпочтительно для получения меченых радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga меток для ПЭТ, которые включают бифункциональный хелатобразующий агент; т.е. агент, связанный с адресным переносчиком.

Таким образом, другим аспектом данного изобретения является способ получения меченого радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga комплекса посредством:

а) получения ⁶⁸Ga путем приведения в контакт элюата из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga с анионитом, включающим НСО₃ ^– в качестве противоионов, и элюирования ⁶⁸Ga³⁺ из указанного анионита; и

б) взаимодействия радиоизотопа ⁶⁸Ga с хелатобразующим агентом.

Предпочтительные хелатобразующие агенты для использования в предлагаемом способе – это такие агенты, которые содержат радиоактивные изотопы ⁶⁸Ga³⁺ в физиологически приемлемой форме. Кроме того, предпочтительны также хелатобразующие агенты, которые образуют комплексы с радиоизотопами ⁶⁸Ga, стабильные в течение времени, необходимого для диагностических исследований с использованием меченых комплексов.

Подходящие хелатобразующие агенты – это, например, полиаминополикислотные хелатобразующие агенты, такие как DTPA, EDTA, DTPA-BMA, DOA-3, DOTA, HP-DOA3, ТМТ или DPDP. Эти хелатобразующие агенты хорошо известны в качестве радиофармацевтических и радиодиагностических препаратов. Их использование и синтез описаны, например, в US-A-4647447, US-A-5362475, US-A-5534241, US-A-5358704, US-A-5198208, US-A-4963344, ЕР-А-230893, ЕР-А-130934, ЕР-А-606683, ЕР-А-438206, ЕР-А-434345, WO-A-97/00087, WO-A-96/40274, WO-A-96/30377, WO-A-96/28420, WO-A-96/16678, WO-A-96/11023, WO-A-95/32741, WO-A-95/27705, WO-A-95/26754, WO-A-95/28967, WO-A-95/28392, WO-A-95/24225, WO-A-95/17920, WO-A-95/15319, WO-A-95/09848, WO-A-94/27644, WO-A-94/22368, WO-A-94/08624, WO-A-93/16375, WO-A-93/06868, WO-A-92/11232, WO-A-92/09884, WO-A-92/08707, WO-A-91/15467, WO-A-91/10669, WO-A-91/10645, WO-A-91/07191, WO-A-91/05762, WO-A-90/12050, WO-A-90/03804, WO-A-89/00052, WO-A-89/00557, WO-A-88/01178, WO-A-86/02841 и WO-A-86/02005.

Подходящие хелатобразующие агенты включают макроциклические хелатобразующие агенты, например порфириноподобные молекулы и пентааза-макроциклы, как описано в [Zhang et al., Inorg. Chem. 37(5), 1998, 956-963], фталоцианины, краун-эфиры, например краун-эфиры с азотом, такие как сепульхраты (sepulchrates), криптаты и т.д., гемин (протопорфирин IX хлорид), гем и хелатобразующие агенты, имеющие квадратно-планарную симметрию.

В предлагаемом способе предпочтительно использовать макроциклические хелатобразующие агенты. В предпочтительном воплощении изобретения эти макроциклические хелатобразующие агенты включают по меньшей мере один атом сильного донора – такого как кислород и/или азот, как в полиаза- и полиоксомакроциклах. Предпочтительные примеры полиазамакроциклического хелатобразующего агента включают DOTA, TRITA, ТЕТА и НЕТА, причем DOTA особенно предпочтителен.

Особенно предпочтительные макроциклические хелатобразующие агенты включают функциональные группы, такие как карбоксигруппы или аминогруппы, которые не играют важной роли в координации Са³⁺, а значит, их можно использовать для образования связей между хелатобразующими агентами и другими молекулами, например с адресными переносчиками. Примерами таких макроциклических хелатобразующих агентов, включающих функциональные группы, являются DOTA, TRITA или НЕТА.

В следующем предпочтительном воплощении изобретения в предлагаемом способе используют бифункциональные хелатобразующие агенты. В контексте данного изобретения “бифункциональный хелатобразующий агент” означает агент, образующий связь с адресным переносчиком. Подходящие для используемых в предлагаемом способе бифункциональных хелатобразующих агентов адресные переносчики – это химические или биологические фрагменты, которые связываются с заданными местами в организме пациента, когда в организм вводят меченые радиоактивным изотопом галлия комплексы, включающие указанные адресные переносчики. Подходящие для используемых в предлагаемом способе бифункциональных хелатобразующих агентов адресные переносчики представляют собой протеины, гликопротеины, липопротеины, полипептиды, такие как антитела или фрагменты антител, гликополипептиды, липополипептиды, пептиды, такие как связывающие RGD пептиды, гликопептиды, липопептиды, углеводы, нуклеиновые кислоты, например ДНК и РНК, олигонуклеотиды, такие как антисмысловые олигонуклеотиды, или часть, фрагмент, производное или комплекс вышеперечисленных соединений или любых других подходящих химических соединений, таких как относительно маленькие органические молекулы, а особенно маленькие органические молекулы массой менее 2000 дальтон.

В особенно предпочтительном воплощении изобретения в предлагаемом способе используют макроциклические бифункциональные хелатобразующие агенты. Предпочтительные макроциклические бифункциональные хелатобразующие агенты включают DOTA, TRITA или НЕТА, связанные с адресным переносчиком, предпочтительно с адресным переносчиком, выбранным из группы, состоящей из протеинов, гликопротеинов, липопротеинов, полипептидов, гликополипептидов, липополипептидов, пептидов, гликопептидов, липопептидов, углеводов, нуклеиновых кислот, олигонуклеотидов, или части, фрагмента, производного или комплекса вышеперечисленных соединений и малых органических молекул; особенно предпочтительно с адресным переносчиком, выбранным из группы, состоящей из пептидов и олигонуклеотидов.

Адресный переносчик может быть связан с хелатобразующим агентом посредством связующей группы или посредством молекулы-спейсера (spacer molecule). Примерами связующих групп являются дисульфиды, сложные эфиры или амиды; примерами молекул-спейсеров являются цепочкообразные молекулы, например лизин или гексиламин, или короткие спейсеры на основе пептидов. В предпочтительном воплощении изобретения связь между адресным переносчиком и хелатобразующей частью меченого радиоактивным изотопом галлия комплекса такова, что адресный переносчик может взаимодействовать с мишенью в организме, и при этом присутствие меченого изотопом галлия комплекса не блокирует его и не создает пространственных помех.

Предпочтительным аспектом данного изобретения является способ получения меченого радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga комплекса путем:

а) получения ⁶⁸Ga путем приведения в контакт элюата из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga с анионитом, включающим НСО₃ ^– в качестве противоионов, и элюирования ⁶⁸Ga³⁺ из указанного анионита; и

б) взаимодействия радиоизотопа ⁶⁸Ga с хелатобразующим агентом, причем реакцию проводят с использованием микроволновой активации.

Было обнаружено, что использование микроволновой активации существенно повышает эффективность и воспроизводимость образования комплекса ⁶⁸Ga-хелатобразующий агент. Благодаря микроволновой активации время протекания химических реакций можно существенно сократить; т.е. реакция завершается в течение 2 и менее минут. Это является очевидным достижением, так как 10-минутное сокращение времени реакции сохраняет около 10% активности ⁶⁸Ga. Более того, микроволновая активация также сокращает число побочных реакций и увеличивает радиохимический выход, что происходит вследствие повышенной селективности.

Для активации микроволнами можно использовать микроволновую печь, предпочтительно мономодальную микроволновую печь. Можно проводить микроволновую активацию при 80-120 Вт, предпочтительно при 90-110 Вт, а особенно предпочтительно приблизительно при 100 Вт. Соответствующий интервал времени активации микроволнами составляет от 20 с до 2 мин, предпочтительно от 30 с до 90 с, а особенно предпочтительно от 45 с до 60 с.

Контролировать температуру реакции целесообразно тогда, когда в предлагаемом способе используют чувствительные к температуре хелатобразующие агенты, например бифункциональные хелатобразующие агенты, включающие пептиды или протеины в качестве адресных переносчиков. Продолжительность микроволновой активации следует регулировать таким образом, чтобы температура реакционной смеси не достигала значений, при которых разлагаются хелатобразующий агент и/или адресный переносчик. Если используемые в предлагаемом способе хелатобразующие агенты включают пептиды или протеины, то, как правило, больше подходят более высокие температуры в течение более короткого времени, чем более низкие температуры в течение более длительного периода времени.

Микроволновую активацию можно проводить непрерывно или путем нескольких циклов во время протекания реакции.

Другим аспектом данного изобретения является устройство для получения ⁶⁸Ga из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga, которое включает колонку генератора и вторую колонку, которая включает анионит, включающий НСО₃ ^– в качестве противоионов.

В предпочтительном воплощении изобретения устройство дополнительно включает средства последовательного соединения колонок и/или водный раствор HCl для элюирования ⁶⁸Ga из колонки генератора и/или воду для элюирования ⁶⁸Ga из анионообменной колонки. Предпочтительно HCl и вода асептически упакованы в герметичный контейнер.

В другом предпочтительном воплощении изобретения предлагаемое устройство дополнительно включает хелатобразующий агент, предпочтительно бифункциональный хелатобразующий агент, т.е. хелатобразующий агент, связанный с адресным переносчиком.

Примеры

Пример 1.

Для элюирования ⁶⁸Ga из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga (с колонкой с диоксидом титана) использовали 0,1 М HCl (5-6 мл). Элюат подкисляли при помощи HCl и подавали на кассету, содержащую сильную основную анионообменную смолу на основе полистирола-дивинилбензола, включающую НСО₃ ^– в качестве противоионов, а также функциональные группы четвертичного амина (кассета с твердым полимерным электролитом (SPE cartridge) Chromafix 30-PS-НСО₃ ^–, Macharey-Nagel, Германия). Более чем 99% активного ⁶⁸Ga задерживалось на смоле, затем его элюировали при помощи 200 мл Н₂О.

Сравнительный пример 1а.

Полученный в соответствии с примером 1 элюат подавали на кассеты, содержащие сильную основную анионообменную смолу, включающую Cl^– в качестве противоионов, а также функциональные группы четвертичного амина (SAX SPEC, 50 мг, 1 мл, Isolute, Великобритания и SAX SPEC, 15 мг, 3 мл, NTK kemi, США). Оба анионита не проявили способности к удержанию активного ⁶⁸Ga.

Сравнительный пример 1б.

Cl^–-противоионы в использованных в сравнительном примере 1а кассетах были заменены на OH^–-противоионы. Были выполнены те же процедуры, что описаны в примере 1а. Удержание активного ⁶⁸Ga составило 10-20%.

Пример 2.

Сравнительное изучение внесения радиоактивной метки изотопом ⁶⁸Ga в DOTA-D-Phe¹-Tyr³-октреотид (DOTA-TOC).

⁶⁸Ga, полученный в соответствии с предлагаемым способом, и ⁶⁸Ga, полученный из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga без последующей обработки анионитом, были использованы для внесения радиоактивной метки изотопом ⁶⁸Ga в DOTA-D-Phe¹-Tyr³-октреотид (DOTA-TOC).

2а) внесение радиоактивной метки изотопом ⁶⁸Ga в DOTA-TOC

К элюату из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga добавляли ацетат натрия (36 мг на 1 мл), чтобы откорректировать рН элюата приблизительно до 5,5; смесь хорошо перемешивали. К реакционной смеси добавляли DOTA-TOC (20 нмоль) и нагревали ее при 96°С в течение 25 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и подавали в колонку из твердого полимерного электролита С-18 (HyperSEP S C18), которую затем промывали 2 мл Н₂O, и элюировали продукт смесью этанол-вода 50:50 (1 мл).

Реакционную смесь и продукт анализировали при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии, используя гелевые фильтрационные колонки Vydac RP и Fast Desalting HR 10/10 FPLC. Удельная радиоактивность (количество радиоактивности на единицу массы пептида) составила 1,5 МБк/нмоль. Масс-спектрометрия с ионизацией электрораспылением (МС-ИЭР) была выполнена на платформе Fisons (Micromass, Manchester, Великобритания) с использованием позитивного режима получения данных и регистрации [М+2Н]²⁺. DOTATOC регистрировали при m/z=711,26, а аутентичный Ga-DOTATOC регистрировали при m/z=746,0 (по расчетам m/z=746,5).

2б) внесение радиоактивной метки изотопом ⁶⁸Ga в DOTA-TOC при использовании полученного в соответствии с примером 1 ⁶⁸Ga

К 200 мкл полученного в соответствии с примером 1 ⁶⁸Ga добавляли ацетат натрия, чтобы откорректировать рН приблизительно до 5,5. Реакция образования комплекса была проведена в соответствии с тем, как описано в примере 2а), при этом использовали 10 нмоль DOTATOC.

Реакционную смесь и продукт анализировали при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии, используя гелевые фильтрационные колонки Vydac RP и Fast Desalting HR 10/10 FPLC. Удельная радиоактивность составила 5 МБк/нмоль. Масс-спектрометрия с ионизацией электрораспылением (МС-ИЭР) была выполнена на платформе Fisons (Micromass, Manchester, Великобритания) с использованием позитивного режима получения данных и регистрации [М+2Н]²⁺. DOTATOC регистирировали при m/z=711,26, а аутентичный 68Ga-DOTATOC регистрировали при m/z=746,0 (по расчетам m/z=746,5).

2с) результаты

При использовании полученного в соответствии с предлагаемым способом ⁶⁸Ga было можно уменьшить количество DOTATOC, необходимого для синтеза меченого радиоактивным изотопом комплекса, и таким образом увеличить удельную радиоактивность более чем в 3 раза.

Формула изобретения

1. Способ получения ⁶⁸Ga путем приведения в контакт элюата из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga с анионообменной смолой на основе полистироладивинилбензола, включающей НСО₃ ^– в качестве противоионов и функциональные группы четвертичного амина, и элюирования ⁶⁸Ga из указанного анионита.

2. Способ по п.1, где генератор ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga включает колонку, включающую диоксид титана.

3. Способ по п.1, где для элюирования ⁶⁸Ga из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga используют 0,05-5 М HCl.

4. Способ по п.2, где для элюирования ⁶⁸Ga из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga используют 0,05-0,1 М HCl.

5. Способ по п.1, где для элюирования ⁶⁸Ga из анионита используют воду.

6. Способ получения комплекса, меченого радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga, путем взаимодействия полученного в соответствии с пп.1-5 ⁶⁸Ga с хелатобразующим агентом.

7. Способ по п.6, где хелатобразующий агент представляет собой макроциклический хелатобразующий агент.

8. Способ по п.6, где хелатобразующий агент включает атомы сильных доноров, предпочтительно атомы О и N.

9. Способ по п.6, где хелатобразующий агент представляет собой бифункциональный хелатобразующий агент.

10. Способ по п.9, где хелатобразующий агент представляет собой бифункциональный хелатобразующий агент, включающий адресный переносчик, выбранный из группы, состоящей из протеинов, гликопротеинов, липопротеинов, полипептидов, гликополипептидов, липополипептидов, пептидов, гликопептидов, липопептидов, углеводов, нуклеиновых кислот, олигонуклеотидов или части, фрагмента, производного или комплекса вышеперечисленных соединений и малых органических молекул.

11. Способ по п.6, где реакцию проводят с использованием микроволновой активации.

12. Способ по пп.6-11 для получения меток ПЭТ, меченых радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga.

13. Устройство для получения ⁶⁸Ga из генератора ⁶⁸Ge/⁶⁸Ga, которое включает колонку генератора и вторую колонку, которая включает анионообменную смолу на основе полистирола-дивинилбензола, включающую НСО₃ ^– в качестве противоионов и функциональные группы четвертичного амина.

14. Устройство по п.13, дополнительно включающее средства последовательного соединения колонок.

15. Устройство по п.13, дополнительно включающее водный раствор HCl для элюирования ⁶⁸Ga из колонки генератора и/или воду для элюирования ⁶⁸Ga из анионообменной колонки, причем HCl и вода предпочтительно асептически упакованы в герметичный контейнер.

16. Устройство по пп.13-15, дополнительно включающее хелатобразующий агент, предпочтительно бифункциональный хелатобразующий агент.

17. Применение устройства по п.16 для получения меток ПЭТ, меченых радиоактивным изотопом ⁶⁸Ga.