Патент на изобретение №2342667

(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РЕСПИРАТОРНОГО ДИСТРЕСС-СИНДРОМА У НОВОРОЖДЕННЫХ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области медицины, а именно к перинатологии и неонатологии, и касается способа диагностики респираторного дистресс-синдрома у новорожденных. Способ заключается в изучении показателей среднемолекулярных пептидов в надосадочной жидкости носоглоточного аспирата ребенка, концентрация которых 0,386-0,574 единиц оптической плотности (ОЕ) соответствует ранней стадии развития респираторного дистресс-синдрома неинфекционной этиологии, значения 0,575-0,725 ОЕ наблюдаются при ранней стадии респираторного дистресс-синдрома при внутриутробном инфицировании гриппом A(H3N2), значения 0,726-0,854 ОЕ наблюдаются при ранней стадии развития респираторного дистресс-синдрома при внутриутробном инфицировании гриппом A(H3N2) ассоциированным со Staphylococcus aureus. Использование способа позволяет выявить респираторный дистресс-синдром различной этиологии на ранней стадии развития заболевания. 1 табл.

(56) (продолжение):

CLASS=”b560m”перинатальной медицины (РАСПМ). Журн.Интенс. терапия, 2007, №2. MEBERG A. et al., Pulmonary air-leakage in newborn infants, Tidsskr. Nor. Laegeforen, 2007, Sep. 20; 127(18):2371-2373.

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и неонатологии.

Установлено, что в развитии симптомов респираторного дистресс-синдрома у новорожденных в раннем неонатальном возрасте кардинальную роль играют заболевания матери, общая незрелость, незрелость легких [1,2] и внутриутробное инфицирование плода [3, 4]. Известен способ дифференциальной диагностики респираторного дистресс-синдрома у новорожденных, в основе которого лежит исследование взаимодействия альвеолярных макрофагов бронхиального аспирата, получаемого у детей во время бронхоскопии, с условнопатогенными микроорганизмами и определение индекса завершенности фагоцитоза [5].

Недостатками вышеуказанного способа диагностики являются:

1. Проведение у новорожденных с респираторным дистресс-синдромом интубации для выполнения бронхоскопии и получения бронхиального аспирата, которая может осложняться травматическим повреждением слизистой оболочки голосовых связок [6], трахеобронхиального дерева, бронхоспазмом и другими осложнениями [7].

2. Не позволяет осуществлять раннюю этиологическую диагностику ожидаемого респираторного дистресс-синдрома у новорожденных.

Задачей предлагаемого способа является обеспечение диагностики на ранней стадии респираторного дистресс-синдрома неинфекционной, вирусной или вирусно-бактериальной природы у новорожденных с помощью определения уровня среднемолекулярных пептидов в надосадочной жидкости носоглоточного аспирата и исключение риска травматизации дыхательных путей у детей при получении аспирата.

Среднемолекулярные пептиды относятся к полипептидам с молекулярной массой от 300 до 5000 дальтон. Повышение концентрации среднемолекулярных пептидов в крови матерей с гриппом A(H3N2) [8] и с поздним гестозом [9] сопровождается их ростом в крови плода и в околоплодных водах [10]. При проникновении среднемолекулярных пептидов [10] и недоокисленных продуктов обмена, мекония в амниотическую жидкость возрастают ее токсические свойства и изменяются биохимические параметры носоглоточного аспирата у внутриутробного плода [11, 12]. Это может повышать риск развития бронхолегочной патологии, в том числе респираторного дистресс-синдрома у новорожденных.

Сущность способа диагностики респираторного дистресс-синдрома у новорожденных заключается в следующем:

1. К стерильному шприцу присоединяют мягкий зонд, выполненный, например, из полихлорвинила.

2. Зонд осторожно вводят в полость носа новорожденному сразу после рождения.

3. Шприцем медленно насасывают 2,5-3 мл биологической жидкости, содержащейся в носовых ходах и носоглотке у новорожденных.

4. Полученные 2,5-3 мл биологической жидкости носоглоточного аспирата центрифугируют на центрифуге при 1500 об/мин в течение 10 минут для получения ее надосадочной части.

5. Для определения среднемолекулярных пептидов экспресс-методом в центрифужную пробирку наливают 1,0 мл надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата, добавляют 0,5 мл 10% трихлоруксусной кислоты. Эту смесь встряхивают и центрифугируют в течение 30 минут при 3000 об/мин. Детекцию надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата, освобожденной от грубодисперсных белков, осуществляют после предварительного разведения, при котором к 0,5 мл надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата добавляют 4,5 мл дистиллированной воды. Измерения осуществляют на спектрофотометре, например СФ-16 или ШТАСШ -557 (Япония), при длине волны 280 нм(Е₂₈₀) [13].

6. Измеряют концентрацию среднемолекулярных пептидов в надосадочной части носоглоточного аспирата.

7. Проводят диагностику возможного дистресс-синдрома по этиологическому признаку: при концентрации среднемолекулярных пептидов 0,386-0,574 единиц оптической плотности диагностируют раннюю стадию развития дистресс-синдрома неинфекционного генеза, при уровне среднемолекулярных пептидов 0,575-0,725 единиц оптической плотности диагностируют раннюю стадию развития дистресс-синдрома вирусного генеза, а при уровне среднемолекулярных пептидов 0,726-0,854 единиц оптической плотности диагностируют раннюю стадию развития дистресс-синдрома вирусно-бактериального генеза.

Для установления зависимости между этиологией респираторного дистресс-синдрома у новорожденных и выраженностью эндотоксикоза исследовалась концентрация среднемолекулярных пептидов в носоглоточном аспирате у 20 новорожденных от матерей с поздним гестозом (нефропатия 1 степени). У новорожденных этой группы при исследовании парных сывороток крови из вены у матерей в родах и крови из вены пуповины у новорожденных с помощью реакции торможения гемагглютинации и реакции связывания комплемента [14] отсутствовал 4-х кратный рост титров антител к вирусам респираторной группы (к гриппу А, В, парагриппу, PC- и аденовирусу), а также не выделялась из полости носа бактериальная кокковая микрофлора. Ее выявление проводилось посредством забора материала ватным наконечником стерильной металлической палочки, заключенной в стерильную пробирку с физраствором, с последующим посевом на питательные среды [15,16] (первая опытная группа). Вторую опытную группу составили 21 новорожденный с внутриутробным гриппом A(H3N2) (выявлен 4-х кратный рост титров антител к вирусу гриппа A(H3N2) [14], в третью опытную группу включены 22 новорожденных с внутриутробным гриппом A(H3N2), ассоциированным со Staphylococcus aureus (3,5*10²-7,5*10² КОЕ/мл). У новорожденных всех опытных групп через 3-4 часа после рождения развился респираторный дистресс-синдром.

Контролем являлась группа из 32 новорожденных с нормальным течением раннего неонатального периода от матерей с физиологически протекающей беременностью.

Показатели концентрации среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата у здоровых новорожденных (контрольная группа), у новорожденных от женщин с поздним гестозом (первая опытная группа), у новорожденных с внутриутробным инфицированием вирусом гриппа A(H3N2) (вторая опытная группа) и у новорожденных с внутриутробным гриппом A(H3N2), ассоциированным с Staphylococcus aureus (третья опытная группа), представлены в таблице.

Сравнительная характеристика концентрации среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата (в единицах оптической плотности) у новорожденных в различных группах
Статистические показатели	Контрация среднемолекулярных пептидов
	Контрольная группа (n=32)	Первая опытная группа (n=20)	Вторая опытная группа (n=21)	Третья опытная группа (n=22)
М	0,330	0,480	0,650	0,790
m	0,01	0,01	0,01	0,01
	0,037	0,062	0,050	0,042
М±1,5	0,275-0,385	0,386-0,574	0,575-0,725	0,726-0,854
р	–	<0,001	<0,001	<0,001
Примечание: р – уровень значимости различий с показателями в контрольной группе; n = количество случаев.

Как видно из таблицы, за 3-4 часа до развития основных клинических признаков респираторного дистресс-синдрома (акроцианоза, раздувания крыльев носа, втяжения межреберий) у новорожденных первой опытной группы отмечалось повышение концентрации среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата до 0,386-0,574 единиц оптической плотности. При внутриутробном гриппе A(H3N2) у новорожденных второй опытной группы отмечался рост содержания среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата до 0,575-0,725 единиц оптической плотности. При внутриутробном гриппе A(H3N2), ассоциированном со Staphylococcus aureus, у новорожденных третьей опытной группы наблюдалось увеличение концентрации среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата до 0,726-0,854 единиц оптической плотности.

Учитывая статистически достоверные различия концентрации среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата у новорожденных на ранней стадии развития респираторного дистресс-синдрома, мы предлагаем использовать показатели концентрации среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата как критерии ранней диагностики респираторного дистресс-синдрома неинфекционной, вирусной или вирусно-бактериальной этиологии. При концентрации среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата новорожденных 0,386-0,574 единиц оптической плотности диагностируют раннюю стадию развития дистресс-синдрома неинфекционного генеза, при уровне среднемолекулярных пептидов 0,575-0,725 единиц оптической плотности диагностируют раннюю стадию развития дистресс-синдрома вирусного генеза, а при уровне среднемолекулярных пептидов 0,726-0,854 единиц оптической плотности диагностируют раннюю стадию развития дистресс-синдрома вирусно-бактериального генеза.

Для иллюстрации эффективности предлагаемого способа диагностики респираторного дистресс-синдрома приводим клинические примеры.

Пример 1

Новорожденный Ф. Родился от первой беременности. В течение первого триместра до 9 недель отмечались признаки раннего гестоза легкой степени. С 32 недель регистрировались симптомы позднего гестоза (нефропатия 1 степени) с повышением артериального давления до 140 и 90 мм рт.ст. (D=S), отеками на нижних конечностях, по поводу которого получала стационарное лечение. Группа крови А(II), резус – положительный. В женской консультации наблюдалась регулярно с 7 недель гестации. Роды первые, в срок, через естественные родовые пути. Околоплодные воды незначительно окрашены меконием.

Клинический диагноз матери: Роды первые в срок. Крупный плод. Хроническая внутриутробная гипоксия плода. Нефропатия 1 степени. Эпизиотомия. Эпизиорафия.

Родилась девочка массой 4150, длиной – 54 см, окружностью головы – 36 см и груди 35 см. В родильном зале оценка по Апгар 5/7 баллов. Группа крови А(II), резус – положительный. Серологический анализ крови с помощью реакции торможения гемагглютинации не показал роста титров антител к вирусам респираторной группы у ребенка по сравнению с таковым у матери. При бактериологическом исследовании слизистой носа микрофлора не выявлялась. При рождении у ребенка количество лейкоцитов составляло: 9*10⁹/л, с/я – 65%, п/я – 2%, лимф. – 22%, мон. – 3%. Концентрация среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости назофарингеального аспирата составляла 0,470 единиц оптической плотности.

Состояние новорожденного средней степени тяжести. Наблюдался цианоз носогубного треугольника. Активность и мышечный тонус снижены. Сухожильные рефлексы у ребенка ослаблены. Физиологические рефлексы неотчетливые. Тоны сердца приглушены, ритмичные до 135 ударов в 1 минуту. Частота дыхания 45 в 1 минуту. В легких выявлялись ограниченные участки ослабленного дыхания. Через 3,5 часа у ребенка появился акроцианоз. Тоны сердца приглушенные до 152 в 1 минуту. Отмечалось затруднение дыхания через нос и напряжение крыльев носа. Регистрировалось втяжение межреберий на вдохе. Увеличивалась частота дыхания до 62 в 1 минуту. Аускультативно дыхание в легких с жестким оттенком.

Диагноз новорожденного: Асфиксия средней степени тяжести. Церебральная ишемия 1-2 степени гипоксического генеза. Гипертензионный синдром. Респираторный дистресс-синдром 2 степени.

Пример 2

Новорожденная Г. Родилась от первой беременности, протекавшей до 8 недель на фоне раннего гестоза с клиническими симптомами тошноты и однократной рвоты. В 30 недель больная перенесла грипп А(Н3N2) (титры противовирусных антител 1:4-1:16) с повышением температуры до 37,8°, которая регистрировалась в течение 3 суток. Длительность симптомов интоксикации составляла 7 суток. Отмечались катаральные явления: серозные выделения на 2-3 сутки, слизисто-гнойные выделения из носа на 4-5 сутки, першение в горле и кашель с незначительным количеством мокроты в течение 8 суток. Возраст матери – 24 года, служащая. В детстве до 7 лет страдала тонзиллитом с обострениями до 2 раз в год. Группа крови 0(1), резус – положительный. В женской консультации наблюдалась регулярно с 5 недель беременности. Роды первые, в срок, через естественные родовые пути. Околоплодные воды зеленые. В родах у матери отмечалось дородовое отхождение околоплодных вод.

Клинический диагноз матери: Роды первые, в срок. Дородовое отхождение околоплодных вод. Хроническая внутриутробная гипоксия. Эпизиотомия. Эпизиорафия.

Родился мальчик массой 3680 г, длиной – 53 см, окружностью головы – 37 см и груди – 34 см. Оценка состояния здоровья ребенка по Апгар в родильном зале составляла 5/7 баллов. Группа крови 0(I), резус – положительный. Серологический анализ крови с помощью реакции торможения гемагглютинации показал рост титра антител к вирусу гриппа A(H3N2) 1:16-1:64 у ребенка по сравнению с таковым у матери. Бактериологическое исследование слизистой носа – отрицательный результат. В крови у ребенка при рождении количество лейкоцитов равнялось 8,2*10⁹/л, э – 4%, п/я – 4%, с/я – 56%, лимф. – 36%. Концентрация среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости назофарингеального аспирата составляла 0,620 единиц оптической плотности.

Состояние новорожденного средней степени тяжести. Стонет. Поза “лягушки”. Цианоз носогубного треугольника. Крик слабый. Активность снижена. Мышечный тонус снижен, а сухожильные рефлексы нечеткие. Физиологические рефлексы ослаблены. Тоны сердца приглушенные, ритмичные до 134 ударов в 1 минуту. Частота дыхания 44 в 1 минуту. Дыхание через нос не затруднено. Через 4 часа наблюдался акроцианоз, учащение сердцебиений до 150 в 1 минуту и частоты дыхания до 63 в 1 минуту. При аускультации отмечалась тенденция к ослаблению дыхания. Диагностировалось напряжение крыльев носа. Втяжение межреберий на вдохе. В легких отмечалось дыхание с жестким оттенком.

Диагноз новорожденного: Внутриутробное инфицирование (вирус гриппа A(H3N2 1:16-1:64). Асфиксия средней степени тяжести. Церебральная ишемия 1 степени. Синдром мышечной дистонии. Натальное поражение спинного мозга на шейном уровне. Конъюгационная желтуха. Респираторный дистресс-синдром 2 степени.

Пример 3

Новорожденный К. Родился от первой беременности, которая протекала с симптомами легкого гестоза (тошнота, рвота до 1 раза в сутки). В 10 недель перенесла грипп A(H3N2), который сопровождался повышением температуры до 38,3°. Подъем температуры наблюдался в течение 3 суток. Длительность симптомов интоксикации составляла 8 суток. Отмечались признаки острого ринофарингита: серозные выделения на 2-3 сутки, слизисто-гнойные выделения из носа на 4-6 сутки, выраженное першение в горле и кашель с незначительным количеством слизисто-гнойной мокроты в течение 8 суток.

Бактериологическое исследование мазков из полости носа у беременной – Staphylococcus aureus 7,5*10³ КОЕ/мл. Возраст матери – 30 лет, служащая. В детстве были острые респираторные инфекции до 3 раз в год. Наследственность не отягощена. В женской консультации наблюдалась регулярно с 9 недель. Группа крови 0(I), резус – положительный. Роды первые в срок, через естественные родовые пути. Околоплодные воды зеленые.

Клинический диагноз матери: Роды I в срок. Хроническая внутриутробная гипоксия плода. Эпизиотомия. Эпизиорафия.

Родился мальчик массой 3500 г, длиной – 54 см, окружность головы – 35 см и груди 34 см. В родильном зале оценка по Апгар 4/7 баллов. Группа крови 0(I), резус – положительный. При серологическом исследовании с помощью реакции торможения гемагглютинации отмечался рост титра антител к вирусу гриппа A(H3N2) 1:64-1:256 у ребенка по сравнению с таковым у матери. При бактериологическом исследовании выявлялся Staphylococcus aureus 3,5*10² КОЕ/ мл в полости носа. При рождении у ребенка количество лейкоцитов составляло 10,0*10⁹/л, п/я – 4%, с/я – 22%, лимф. – 56%, мон. – 6%. Концентрация среднемолекулярных пептидов в надосадочной жидкости носоглоточного аспирата составляла 0,740 единиц оптической плотности.

Состояние новорожденного средней степени тяжести. Кожа носогубного треугольника с цианотическим оттенком. Отмечалось снижение активности, мышечного тонуса и сухожильных рефлексов. Физиологические рефлексы неотчетливые. Тоны сердца приглушенные, ритмичные до 132 ударов в 1 минуту. Частота дыхательных движений 43 в 1 минуту. При аскультации дыхание проводилось над большей поверхностью легких. Через 3 часа отмечался акроцианоз, учащение сердцебиений до 156 в 1 минуту частоты дыхания до 64 в 1 минуту. Регистрировалось значительное ослабление дыхания. Отмечалось затруднение дыхания через нос и напряжение крыльев носа. Наблюдалось втяжение межреберий на вдохе. Прослушивалось дыхание с жестким оттенком.

Диагноз новорожденного: Внутриутробное инфицирование, везикулез (вирус гриппа A(H3N2 (1:64-1:256) и Staphylococcus aureus). Асфиксия средней степени тяжести. Церебральная ишемия 1-2 степени. Гипертензионный синдром. Нарушение кровообращения на уровне шейного отдела спинного мозга. Респираторный дистресс-синдром 2 степени.

Используемые информационные источники

1. Гипоксия плода и новорожденного /Под ред. М.Я.Студеникина (СССР), Н.Халлмана (Финляндия). Совместное издание СССР-Финляндия. – М.: Медицина, 1984. – С.136-141.

2. Буракова В.Б. Клиническая характеристика ателектаза легких у недоношенных новорожденных детей с синдромом дыхательных расстройств: Автореф. дис. канд мед. наук. – Москва, 1970. – 19 с.

5. Эстерин В.В., Ефанова Е.А., Бичуль O.K. Способ дифференциальной диагностики респираторного дистресс-синдрома новорожденного. RU (11) 2089901 (13) С1/(51) 6 G01N 33/48.

6. Михельсон В.А., Костин Э.Д., Цыпин Л.Е. Анестезия и реанимация новорожденных. – Л.: Медицина, 1980. – 312 с.

7. Бараш П.Д. Клиническая анестезиология. /П.Д.Бараш, Б.Ф.Куллен, Р.К.Стэлтинг. – М.: Мед. лит., 2004. – 592 с.

11. Гориков И.Н. Строение слизистой оболочки трахеи плодов человека при позднем токсикозе беременных: Автореф. дис…. канд. мед. наук. – Новосибирск, 1986. – 19 с.

13. Луценко М.Т., Самонов В.П., Новик Е.В. Диагностика различных степеней эндотоксикоза при абсцессах легких: методические рекомендации МЗ РСФСР. Институт физиологии и патологии дыхания СО АМН СССР. – Благовещенск, 1988. – 10 с.

14. А.с. 1516980 СССР, МКИ³ A1, G01N 33/53. Способ диагностики внутриутробной инфекции. / О.А.Аксенов, З.А.Осипова, Г.П.Курбатова, В.Ф.Мельникова (СССР). – №4249708 / 28-14; Заявлено 25.05.87. Опубл. 23.10.89, Бюл.№39. – 2 с.

15. Тец В.В. Справочник по клинической микробиологии: СПб.: Стройлеспечать, 1994. – 224 с.

16. Инструкция по бактериологическому контролю качества проведения противоэпидемических мероприятий в акушерских стационарах. Приложение №3 к приказу МЗ СССР от 28.12.1989 г. №691. Москва. – С.40.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики респираторного дистресс-синдрома новорожденных, отличающийся тем, что в надосадочной жидкости носоглоточного аспирата ребенка исследуют среднемолекулярные пептиды, концентрация которых 0,386-0,574 единиц оптической плотности (ОЕ) соответствуют ранней стадии развития респираторного дистресс-синдрома неинфекционной этиологии, значения 0,575-0,725 ОЕ наблюдаются при ранней стадии при внутриутробном инфицировании гриппом A(H3N2), значения 0,726-0,854 ОЕ наблюдаются при ранней стадии развития респираторного дистресс-синдрома при внутриутробном инфицировании гриппом A(H3N2), ассоциированным со Staphylococcus aureus.