Патент на изобретение №2341280

(54) СПОСОБ УЛУЧШЕНИЯ КРОВООБРАЩЕНИЯ

(57) Реферат:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству для предупреждения или задержки перехода от клинически незначимых ранних стадий хронической венозной недостаточности (ХВН) к I, II или III стадии ХВН. Применение водного экстракта листьев красного винограда для приготовления фармацевтической или диетической композиции для предупреждения или задержки перехода от клинически незначимых ранних стадий хронической венозной недостаточности (ХВН) к I, II или III стадии ХВН, которое предусматривает введение эффективного количества этой фармацевтической или пищевой композиции нуждающемуся в этом человеку. Вышеописанный водный экстракт листьев красного винограда успешно применяется для приготовления фармацевтической или диетической композиции для эффективного предупреждения или задержки перехода от клинически незначимых ранних стадий хронической венозной недостаточности (ХВН) к I, II или III стадии ХВН. 14 з.п. ф-лы, 3 ил., 4 табл.

Область техники

Изобретение относится к способу улучшения кровообращения и/или снабжения кислородом нижних конечностей.

Уровень техники

Хроническая венозная недостаточность (ХВН) является прогредиентным заболеванием и у многих пациентов приводит, особенно при отсутствии лечения, к отекам, венечной флебэктазии (стадия I no Widmer), гиперпигментации, индурации, липодерматосклерозу, белой атрофии кожи (стадия II по Widmer) или варикозным язвам ног (стадия III no Widmer). Хронически нарушаемая гемодинамика глубоких и поверхностных вен из-за обструкции венозных сегментов или недостаточности клапанов обычно приводит к кожным заболеваниям на внутренней стороне щиколоток. Расстройство микроциркуляции в коже, как предполагается, является основной причиной изменений в коже, связанных с хронической венозной гиперволемией и повышенным венозным кровяным давлением (Int Angiol 14, 1995, сс.18-22.; Int J Microcirc 16, 1996, сс.259-265).

Очевидно, что кожная микроангиопатия клинической значимости, например, расширенные, извилистые капилляры, окруженные микроотеками, способствует поражениям кожи в нижних конечностях и определяет курс ХВН (Int Angiol 14, 1995, сс.18-22.; Int J Microcirc 16, 1996, сс.259-265).

Применение лазерного доплеровского метода при венозных расстройствах хорошо проиллюстрировано (Microvasc Res 58, 1999, сс.83-88; World J Surg 12, 1988, сс.724-731).

Были разработаны разные способы исследования микроциркуляции в двух функционально различных слоях кожи: более глубоком, преимущественно терморегулирующем слое, и поверхностном питающем слое. Нарушения микроциркуляции в поверхностном питающем слое крайне важны для трофических изменений в коже (World J Surg 12, 1988, сс.724-731; Eur J Clin Invest 29, 1999, сс.708-716).

В патенте GB 934554 описано, что капиллярная резистентность у морских свинок, испытывающих нехватку витаминов, может быть повышена путем внутрибрюшинного введения спиртового экстракта виноградных листьев.

В заявке на патент WO 01/28363 описан способ предупреждения или смягчения дискомфорта, связанного со слабой или средней хронической венозной недостаточностью нижних конечностей, с помощью водных экстрактов листьев красного винограда.

Краткое описание изобретения

В ходе клинических исследований неожиданно было обнаружено, что микроциркуляция и снабжение кислородом преимущественно нарушаются в области щиколоток у пациентов с ХВН и могут существенно улучшиться в результате перорального введения водных экстрактов листьев красного винограда.

В связи с этим настоящее изобретение относится к способу усиления кровообращения и/или доставки кислорода к нижним конечностям, в котором предусмотрено введение эффективного количества фармацевтической или диетической композиции, содержащей водный экстракт листьев красного винограда, субъекту, нуждающемуся в этом.

Другим объектом настоящего изобретения является способ предупреждения изменений в коже, включая предупреждение появления кровяных сгустков в венах или воспалительных реакций в малых сосудах, ассоциированных с хронической венозной недостаточностью, хронической венозной гиперволемии и/или повышенного венозного кровяного давления в нижних конечностях; способ включает введение эффективного количества фармацевтической или диетической композиции, содержащей водный экстракт листьев красного винограда, субъекту, нуждающемуся в этом.

Настоящее изобретение также относится к способу предупреждения или задержки перехода от клинически несущественных ранних стадий хронической венозной недостаточности (ХВН) к стадиям ХВН I, II или III; способ включает введение эффективного количества фармацевтической или диетической композиции, содержащей водный экстракт листьев красного винограда субъекту, нуждающемуся в этом.

Краткое описание чертежей

Фиг.1 показывает схему проведенного клинического исследования.

Фиг.2 показывает влияние экстракта листьев винограда на микроциркуляцию, измеряемую лазерной доплеровской флоуметрией (ЛДФ 10-37 кГц).

–– 360 мг AS 195

-О- плацебо.

Фиг.3 показывает влияние экстракта листьев винограда на чрескожное парциальное давление кислорода (пдО₂).

–– 360 мг AS 195

-О- плацебо.

Подробное описание изобретения

Композиция согласно настоящему изобретению предпочтительно содержит растительные ингредиенты, полученные путем водной экстракции листьев красного винограда (folia vitis viniferae; Extractum Vitis viniferae e folium spissum et siccum) и подходящий носитель. Такой экстракт содержит флавон(ол)-гликозиды, -глюкурониды и флавоноиды, среди которых основными активными ингредиентами являются кверцетин-3-О--D-глюкуронид и изокверцитрин (кверцетин-3-О--глюкозид). Диапазон их фармакологической активности еще полностью не выяснен, но в исследованиях in vitro установлено, что они обладают антиоксидантными и противовоспалительными свойствами и ингибируют агрегацию тромбоцитов и гиалуронидазу, а также уменьшают отечность, возможно за счет снижения проницаемости капилляров. Предклинические эксперименты in vivo выявили противовоспалительное действие и действие, направленное на утолщение стенок капилляров.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения композиция представлена в форме, пригодной для перорального введения, в частности в твердой дозовой форме, например, в форме капсулы или таблетки, и содержит от 20 до 60% водного экстракта листьев красного винограда с высоким содержанием флавоноидов – 2-15%. Другой предпочтительной дозовой формой являются капли, содержащие от 3 до 90% экстракта. Также приемлемыми формами для введения могут быть таблетки с покрытием, сиропы и т.п. Наиболее предпочтительными являются капсулы и таблетки с пленочным покрытием (филм-таблетки).

Учитывая вышесказанное, основным объектом настоящего изобретения является композиция для предупреждения хронической венозной недостаточности нижних конечностей в слабой или умеренной форме, а также для снижения связанного с ней дискомфорта.

Также объектом настоящего изобретения является композиция для предупреждения слабой или умеренной формы хронической венозной недостаточности нижних конечностей и/или снижения связанного с ней дискомфорта, включающая растительные ингредиенты; композицию получают в соответствии с контролируемым процессом, позволяющим сохранить целебные свойства растительных ингредиентов.

Еще одним объектом настоящего изобретения является композиция, предупреждающая и/или смягчающая дискомфорт, связанный с хронической венозной недостаточностью нижних конечностей в слабой или умеренной форме.

Кроме того, объектом настоящего изобретения является композиция, предупреждающая и/или смягчающая дискомфорт, связанный с хронической венозной недостаточностью нижних конечностей в слабой или умеренной форме, включающая растительные ингредиенты и имеющая минимальные побочные эффекты или не имеющая их и поэтому безопасная для приема внутрь.

Основная задача настоящего изобретения заключается в приготовлении композиции для перорального введения, содержащей водный экстракт, приготовленный из сухих листьев красного винограда. Сухие листья винограда содержат большое количество биологически активных флавоноидов – от 2 до 20%, предпочтительно от 2 до 10%.

В контексте настоящего изобретения понятие «субъект, нуждающийся в этом» означает субъекта, у которого присутствует хроническая венозная недостаточность (ХВН) на ранней, клинически не оцениваемой как значимая, стадии – I или II по Widmer. Как правило, такие пациенты являются взрослыми людьми в возрасте от 30 до 80 лет, преимущественно от 32 до 76 лет, средний возраст составляет (± среднеквадратичное отклонение) 55,2±7,7 лет.

Для более полного разъяснения настоящего изобретения ниже приводятся примеры. Эти примеры приводятся только в качестве иллюстраций вариантов осуществления настоящего изобретения и не предназначены для какого-либо ограничения его рамок.

Приводимые далее примеры являются иллюстративными и, по решению специалиста в данной области, конкретные условия могут быть модифицированы, если, применительно к отдельным композициям, в этом есть потребность. Материалы, используемые в приводимых ниже тестах, либо коммерчески доступны, либо могут быть легко приготовлены специалистом в данной области из коммерчески доступных материалов.

Основу композиции составляет водный экстракт листьев красного винограда (foliae Vitis viniferae L.). Листья красного винограда, являющиеся исходным материалом для приготовления экстракта, собирают во время оптимального содержания флавоноидов. Обычно это время совпадает со сбором винограда. Листья тщательно высушивают и измельчают. Для экстракции листья режут на кусочки, размер которых предпочтительно составляет от 5 до 10 мм. Для достижения высокого содержания флавоноидов экстракцию проводят при повышенной температуре, предпочтительно при температуре от 60° до 80°, в течение, по меньшей мере, от 6 до 10 ч. Предпочтительным является способ, позволяющий производить полное извлечение.

Получаемый в ходе экстракции так называемый жидкий экстракт можно непосредственно использовать для приготовления жидких дозовых форм. Для того чтобы получить более концентрированный экстракт, предпочтительно удалять часть растворителя путем использования приемлемого испарителя. Густой экстракт, получаемый на этой стадии, также можно непосредственно использовать для приготовления жидких дозовых форм.

Для приготовления твердых дозовых форм густой экстракт высушивают, например, с помощью камерной вакуумной сушки или вакуумного высушивающего конвейера. Носители или эксципиенты могут добавляться в ходе сушки для облегчения дальнейшей переработки экстракта. Такими носителями или эксципиентами могут быть диоксид кремния, мальтдекстрин, глюкозный сироп, целлюлоза и др.

Композицию для перорального введения получают с помощью обычных технологий, применяемых в пищевой и фармацевтической промышленности. Предпочтительными формами для введения являются таблетки, включая таблетки с покрытием, или капсулы. Однако также могут применяться жидкие препараты, предпочтительно капли.

Наиболее предпочтительными являются филм-таблетки, содержащие от 300 до 500 мг, предпочтительно от 320 до 400 мг, наиболее предпочтительно примерно 360 мг высушенного водного экстракта листьев красного винограда (4-6:1). (extractum vitis viniferae foliae aquosum siccum) и следующие эксципиенты: гипромеллоза, тристеарат глицерина, диоксид титана (Е 171), тальк, красный оксид железа (Е 172), микрокристаллическая целлюлоза, кроскармеллоза натрия, кальций фосфорнокислый двузамещенный (безводный), коллоидный кремний (безводный), стеарат магния.

В тексте настоящего изобретения ниже филм-таблетки называются «AS 195».

Для усиления кровообращения и/или доставки кислорода к нижним конечностям композицию следует применять в дозах, содержащих от 80 до 1000 мг экстракта, предпочтительно 300-800 мг, наиболее предпочтительно 350-750 мг в сутки. Общее суточное количество экстракта может быть представлено в составе от 1 до 3 капсул или таблеток (или в виде эквивалентной дозы в жидкой форме). Суточную дозу следует применять однократно, предпочтительно утром.

Выраженное улучшение симптомов можно ожидать не позднее чем через 6 недель постоянного применения. Оптимальный результат достигается или усиливается при более длительном применении.

Методы

Пациенты

Привлекались мужчины и женщины в возрасте 18 лет и старше с установленным диагнозом ХВН или ХВН I no Widmer, подтвержденным не менее года назад. Сопутствующих существенных заболеваний не было. Не привлекались пациенты, применяющие лекарственные средства для облегчения симптомов ХВН в течение 4 недель или лечившиеся теофиллином, диуретиками, сердечными гликозидами, ингибиторами ангиотензинконвертирующего фермента (АКФ) или антагонистами кальция в течение 8 суток до первого исследования. Компрессионный бандаж или сопутствующая терапия при болезнях вен были запрещены во время участия в исследовании.

Схема и методы

Было проведено двойным слепым методом рандомизированное с плацебо-контролем перекрестное исследование на основе принципов Хельсинской декларации и Международной конференции по гармонизации добросовестной клинической практики.

Каждый пациент участвует в исследовании в течение 17 недель: одну неделю лекарственные средства не принимают (принимают плацебо), затем 6 недель занимает период лечения (в 1 группе начинают принимать AS 195, во 2 группе начинают принимать плацебо), в течение следующих 4 недель лекарственные средства не принимают (принимают плацебо) и затем в течение 6-недель продолжается второй период лечения (в 1 группе продолжают принимать плацебо, во 2 группе AS 195).

AS 195 (филм-таблетки, содержащие по 360 мг сухого экстракта листьев красного винограда) или таблетки плацебо берут по рандомизированной схеме в виде однократной дозы, принимаемой утром. Таблетки обоих типов идентичны по размеру, форме, весу, виду внутреннего содержимого и вкусу.

Для лазерной доплеровской флоуметрии оборудование было поставлено фирмой LMTB, Берлин, Германия (Lasermedizin 12, 1996, сс.163-171). Оборудование представляет собой оснащенный компьютером мобильный блок с частотой генерации лазера 785 нм. Лазерный зонд фиксируют на внутренней поверхности щиколотки наиболее пораженной ноги на расстоянии 3,5 см. Для адаптации к комнатной температуре пациенты сидят в течение 30 мин, затем стоят в течение 10 мин, после чего начинают проводить замеры (256 точек измерений, длительность измерения: примерно 0,4 сек). Отраженный свет поглощается двумя диодами в диапазоне частот между 0,2 и 37,2 кГц. Данные обрабатываются с помощью быстрого преобразования Фурье. В итоге обеспечивается пропускная способность частот в диапазоне от 0,2 до 10,0 кГц для сосудов ретикулярного венозного сплетения (более крупные, преимущественно терморегулирующие, сосуды с диаметром более 30 мкм) и в диапазоне частот от 10,1 до 37,2 кГц для капилляров в подсосочковом венозном сплетении (поверхностные малые питающие сосуды диаметром от 6 до 30 мкм).

Чрескожное давление кислорода (пдО₂) измеряют, используя модифицированные полярографические электроды Кларка, содержащие катоды из благородного металла и аноды из серебра/хлорида серебра (ТСМ 3, фирма Radiometer Copenhagen, Brønshøj, Дания). Нагревательный элемент, соседствующий с анодом, поддерживает температуру тела 43°С. При этой температуре артериоллы максимально расширены, пдО₂ приближается к пдО₂ артериальной крови (World J Surg 12, 1988, сс.724-731).

Электрод присоединяют к поверхности кожи с помощью связующего кольцевого устройства, заполненного физиологическим раствором, на расстоянии 3,5 см от лазерного доплеровского зонда. Для адаптации к комнатной температуре пациенты сидят в течение 30 мин, затем стоят в течение 10 мин, после чего начинают проводить измерения. Измерения занимают примерно 15 мин. Значения пдО₂ выражают в мм ртутного столба (мм рт.ст.). Нормальные значения для верхней поверхности стоп пациентов, не имеющих ХВН, варьируют в диапазоне от 40 до 80 мм рт.ст.

Локальная температура тела измеряется с помощью терморезистора, закрепляемого рядом с электродом кислорода в области щиколотки. Для минимизации эффектов кожной перфузии измерения лазерной доплеровской флоуметрии (ЛДФ) и пдО₂ проводят при локальной температуре кожи в диапазоне от 28 до 32°С.

Окружности икр и щиколоток измеряли с помощью сантиметра. Замеры щиколотки проводят в латеральном и медиальном направлениях, икру замеряют посередине.

Субъективные симптомы ХВН (уставшие тяжелые ноги, чувство напряженности, чувство покалывания и боль) измеряют, используя условную шкалу в 10 см, по которой 0 см обозначает «совсем нет», а 10 см обозначают «очень сильно».

В целом эффективность лечения оценивается пациентами и исследователями по 4-балльной условной шкале (хорошая, удовлетворительная, неудовлетворительная и плохая) в конце каждого периода лечения.

Общая переносимость оценивается пациентами и исследователями по 4-балльной условной шкале (хорошая, удовлетворительная, неудовлетворительная и плохая). При каждом визите пациентов опрашивают о самочувствии в общих терминах.

Лабораторные защитные обследования (гематологические, клинической биохимии и анализ мочи) и общее физическое состояние определяют за время исследования дважды. Кровяное давление и пульс при сидячем положении пациента определяют при каждом визите.

Результаты

Семьдесят один пациент, женщины и мужчины в возрасте от 32 до 76 лет, у которых была выявлена ХВН I и II стадии по Widmer, включены в исследование. Средний возраст (± среднеквадратичное отклонение) составляет 55,2±7,7 лет; 55 женщин и 16 мужчин. Флебологический статус показывает умеренный или тяжелый варикоз у 47 (67,1%), пигментацию у 27 (38,6%), отек щиколоток у 26 (37,1%) и отек ног у 25 (35,7%) пациентов. Слабые признаки атрофии наблюдаются у 13 пациентов (18,6%), случаев экземы не было (Табл.1).

Один 76-летний мужчина умер от сердечного приступа во время игры в теннис (получал плацебо). Этот пациент был исключен из исследования. У оставшихся пациентов не было зафиксировано нарушений протокола. Таким образом, все оставшиеся 70 пациентов продолжили исследование (фиг.1). Исходя из характеристик пациентов, они были равномерно распределены на две группы (1 группа и 2 группа), за исключением полового признака (12 мужчин в группе 1, 4 мужчин в группе 2) (табл.1). Исходные показатели для лазерных доплеровских параметров, чрескожной оксиметрии и субъективные симптомы сопоставляют для группы 1 и группы 2 (табл.2). Соответствие составляло примерно 100% в обеих сериях лечения.

Результаты измерений методом лазерной доплеровской флоуметрии при частоте 10-37 кГц были выбраны в качестве основной конечной точки. Эти частоты рассматривают как определяющиеся числом эритроцитов и их движением (скоростью потока) в капиллярах верхнего слоя кожи ног. Через 6 недель лазерные доплеровские частоты (10-37 кГц) возросли в группе, в которой принимали AS 195 (плюс 241,8±18,7 AU), но снизились в группе, в которой принимали плацебо (минус 41,0±18,7 AU, р<0,0001) (табл.4). Этот эффект наблюдают через три недели после начала лечения (р<0,0001) (табл.3, фиг.2).

Измерения лазерного доплеровского потока в диапазоне частот ниже 10 кГц проводят для определения числа эритроцитов и их передвижения (скорость течения) в капиллярах в более глубоком, преимущественно терморегулирующем слое кожи ног. Через 6 недель лазерные доплеровские частоты, лежащие ниже 10 кГц, возрастают в группе, в которой принимают AS 195 (плюс 57,0±12,4 AU), и снижаются в группе, в которой принимают плацебо (минус 107,7±12,4 AU, р<0,0001) (табл.4). Вероятно, этот эффект зависит от климатических условий во время периода лечения. При умеренной температуре во время исследования (апрель/май) лазерные доплеровские измерения (<10 кГц) остаются неизменными в группе, в которой принимают AS 195, после падения напряжения при включении до номинального рабочего напряжения, в то время как измерения в группе, в которой принимают плацебо, становятся ниже (р<0,0001). При повышенной температуре (июль/август) лазерные доплеровские измерения (<10 кГц) возрастают в группе, в которой принимают AS 195, и остаются постоянными в группе, в которой принимают плацебо (р<0,0001).

Чрескожное давление кислорода возрастает в группе AS 195 (плюс 1,35±0,97 мм рт.ст.), но снижается в группе плацебо (минус 7,27±0,97 мм рт.ст., р<0,0001). Это наблюдение подтверждалось в оба периода лечения и, следовательно, могло точно следовать лазерному доплеровскому потоку в питающем поверхностном слое кожи (т.е. 10-37 кГц) (табл.3, 4, фиг.3).

Статистически достоверное и клинически значимое снижение окружности щиколотки (через 3 недели: AS 195 минус 0,19±0,09 см, плацебо плюс 0,21±0,09 см, р=0,0025) и окружности икры (через 3 недели: AS 195 минус 0,24±0,04 см, плацебо плюс 0,04±0,04 см, р=0,0001) показывают начало действия начиная с 3 недель после начала лечения (табл.3). Этот эффект становится более выраженным по прошествии 6 недель (AS 195, щиколотка: минус 0,39±0,09 см, икра: минус 0,54±0,05; плацебо, щиколотка: плюс 0,29±0,09 см, икра: плюя 0,14±0,05 см, р<0.0001) (табл.4).

Не было достоверных изменений проявления субъективных симптомов, касающихся ХВН, через 6 недель лечения. Этот результат согласуется с результатом предыдущего исследования, в котором субъективные симптомы, измерявшиеся по субъективной шкале, понизились только после более длительного лечения (12 недель).

Побочные эффекты в данном исследовании наблюдают редко. Тринадцать из 71 пациента испытывали побочные эффекты, по меньшей мере, один раз; из них 12 пациентов отмечали начало проявления побочных эффектов, хотя их лечили плацебо, и один на фоне лечения AS 195 (умеренного проявления бронхит, по оценке экспериментатора, не связан с лекарственным средством). Пациента, умершего от сердечного приступа, лечили плацебо (в этом исследовании он никогда не получал AS 195). По оценке всех пациентов общая переносимость была хорошей или удовлетворительной. Лабораторные параметры в ходе исследования не изменялись.

Обсуждение

В предшествующем исследовании было показано (WO 01/28363), что экстракт AS 195, полученный из листьев красного винограда, снижает отечность ног, уменьшает окружность икр, а также улучшает субъективные симптомы, связанные с хронической венозной недостаточностью, у пациентов, принимавших этот экстракт раз в сутки на протяжении 12 недель. Настоящее исследование было предпринято для получения дополнительной информации о механизме, лежащем в основе действия, в связи с чем была исследована микроциркуляция, являющаяся клинически значимым суррогатным параметром, связанным с проблемами ХВН ног. Настоящее исследование является первым, выполненным на пациентах с ХВН и нацеленным на изучение помимо снижения отечности ног также на клинически значимые проявления, связанные с лечением экстрактом листьев красного винограда. Пониженный венозный дренаж возникает в результате ослабленной кожной микроциркуляции с трофическими поражениями кожи. Если не лечить ХВН, такое состояние может даже привести к венозным язвам ног. Лазерная доплеровская флоуметрия, использовавшаяся в настоящем изобретении, является информативным и чувствительным методом для точного определения результатов лечения, которые могут быть связаны с субъективно оцениваемым снижением симптомов заболевания через три месяца лечения.

Полученные результаты соответствуют известным клиническим свойствам AS 195 и привносят новые данные, касающиеся начала действия. Объем ноги, являющийся объективным параметром, снижается, что клинически значимо и статистически достоверно после 6 недель лечения. Такой же результат был опубликован ранее при использовании экстракта семян конского каштана (Lancet 347, 1996, сс.292-294.) и ракитника (Ruscus aculeatus L.) (Drug Res 52, 2002, сс.243-250.).

В настоящем исследовании было показано, что параметры лазерной доплеровской флоуметрии, окружности щиколотки и икры, а также чрескожное давление кислорода изменялись после 3 недель лечения. И, напротив, субъективные симптомы ХВН, оцениваемые визуально, существенно не отличались от плацебо после 6 недель лечения в отличие от предыдущего исследования. Требуется продолжительность лечения в 12 недель для ощутимого снижения проявления субъективных симптомов ХВН.

Представленные результаты свидетельствуют о большой роли экстракта листьев красного винограда в предупреждении прогрессирования ХВН и появления трофических кожных поражений, а также его способности даже предупреждать или приостанавливать переход от клинически незначимых ранних стадий ХВН к стадии I ХВН.

Формула изобретения

1. Применение водного экстракта листьев красного винограда для приготовления фармацевтической или диетической композиции для предупреждения или задержки перехода от клинически незначимых ранних стадий хронической венозной недостаточности (ХВН) к I, II или III стадии ХВН, которое предусматривает введение эффективного количества этой фармацевтической или пищевой композиции нуждающемуся в этом человеку.

2. Применение по п.1, в котором композиция является формой, пригодной для перорального введения.

3. Применение по любому из п.1 или 2, в котором указанный экстракт листьев красного винограда содержит не менее 2 и до 20% флавоноидов.

4. Применение по п.3, в котором указанный экстракт листьев красного винограда содержит не менее 2 и до 10% флавоноидов.

5. Применение по любому из предыдущих пунктов, в котором флавоноиды содержатся в диапазоне от 0,1 до 15% от общей массы композиции.

6. Применение по п.5, в котором флавоноиды содержатся в диапазоне от 1 до 10% от общей массы композиции.

7. Применение по любому из предыдущих пунктов, в котором указанный экстракт листьев красного винограда содержится в диапазоне от 1 до 90% от общей массы композиции.

8. Применение по п.7, в котором указанный экстракт листьев красного винограда содержится в диапазоне от 1 до 70% от общей массы композиции.

9. Применение по п.7, в котором указанный экстракт листьев красного винограда содержится в диапазоне от 1 до 50% от общей массы композиции.

10. Применение по любому из предыдущих пунктов, в котором композиция находится в форме, пригодной для филм-таблеток или капсул.

11. Применение по любому из предыдущих пунктов, в котором композиция вводится в дозах, соответствующих от 80 до 1000 мг суточного экстракта.

12. Применение по п.11, в котором композиция вводится в дозах, соответствующих 300-800 мг суточного экстракта.

13. Применение по любому из предыдущих пунктов, в котором общее количество экстракта разделено на от 1 до 3 филм-таблеток в сутки.

14. Применение по любому из предыдущих пунктов, в котором водный экстракт листьев красного винограда получают способом, включающим стадии:

(а) сбора листьев красного винограда во время оптимально высокого содержания флавоноидов;

(б) высушивания и измельчения листьев;

(в) разрезания листьев на кусочки;

(г) экстрагирования листьев водой при повышенной температуре в течение 6-10 ч;

(д) необязательное концентрированно полученного экстракта.

15. Применение по п.14, в котором листья на стадии (г) экстрагируются водой при температуре от 60 до 80°С.

РИСУНКИ