Патент на изобретение №2161966

(54) АНТИМИКРОБНОЕ СРЕДСТВО

(57) Реферат:

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к лекарственному средству, которое может применяться для профилактики и лечения инфекционных болезней животных и птиц. В состав предлагаемого лекарственного средства входят смесь калиевой и натриевой соли производного фторхинолона, при массовом соотношении 9:1-7:1 10 мас.%, бензиловый спирт 1-3 мас.%, вода до 100 мас. %. Изобретение позволяет создать эффективное антимикробное средство в жидкой форме применения, повысить растворимость активного вещества, добиться стабильности препарата при хранении. 8 табл.

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к лекарственному препарату на основе производного фторхинолона, которое может быть использовано для лечения и профилактики инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных и птиц.

Производные фторхинолонов, обладая высоким биологическим действием, представляют значительный интерес с точки зрения поиска и создания новых лекарственных препаратов, т.к. активные соединения этого ряда веществ не имеют перекрестной устойчивости с антибиотиками различных химических групп и синтетическими лекарственными препаратами из других классов химических веществ (М.Д. Машковский, “Лекарственные средства”, М., 1985, ч.2, С.321).

В последнее время в медицинской и ветеринарной практике широко применяют различные активные соединения из ряда производных фторхинолонов, в том числе: ципрофлоксацин, пефлоксацин, офлоксацин, норфлоксацин и другие. Соединения эффективны при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, инфекционных заболеваниях дыхательных путей, мочеполовой системы, бактериальных заболеваний кожи (М. Д. Машковский, “Лекарственные средства”, Харьков, “Торсинг”, 1997 г., ч.2, стр. 317). Для профилактического применения и лечения заболеваний животных и особенно сельскохозяйственных птиц удобнее использовать жидкую форму лекарственного препарата, который при групповом применении добавляют в питьевую воду.

В патентной заявке ФРГ N 3713672 (A 61 K 31/47, 1988 г) предложены жидкие формы парентерально применяемых хинолонкарбоновых кислот общей формулы

где R – метил, этил, пропил, циклопропил, винил, 2 – гидроксиэтил, 2 – фторэтил, фенил, 4-фторфенил и др;
R₁ – водород, С₁-С₄-алкил, 5-метил-2-оксо-1,3-диоксолил-4-метил;
R₂ – фтор, хлор, нитрогруппа;
R₃ – метил или циклическая аминогруппа (пиперидин, 4- оксопиперидин, замещенный пирролидинил, замещенный пиперазинил, морфолино, тиоморфолино и др.)
A-азот или CR₉ (CR₉-водород, галоид, метил, нитрогруппа), содержащие 1-10 мас.%, лучше 1-5% активной добавки.

Однако соединения указанной формулы являются малорастворимыми в воде и химически неустойчивыми; при хранении выпадают в осадок, концентрация активного вещества уменьшается, что сказывается на эффективности средства.

Целью изобретения является повышение стабильности жидкой формы антимикробного средства на основе производного фторхинолона.

Увеличение стабильности водного раствора средства достигается благодаря определенному соотношению калиевой и натриевой солей фторхинолонов формулы

где X – калий, натрий в присутствии бензилового спирта в количестве 1-3 мас. %. Введение дополнительного бензилового спирта в таком количестве еще больше увеличивает стабильность и антисептический эффект.

Если сами фторхинолоны чрезвычайно мало растворимы в воде, то растворимость их солей увеличивается и содержание активного вещества в препарате возможно повысить до 10 мас.%. Использовать меньшую концентрацию экономически нецелесообразно при данной форме применения. Но поскольку соединения обладают высокой биологической активностью, то указанная концентрация активного вещества вполне достаточна для обеспечения широкого спектра действия в профилактике и лечении животных. В ходе экспериментов было установлено, что водные растворы натриевой или калиевой солей фторхинолонов, взятые индивидуально, не обладают достаточно высокой стабильностью даже в присутствии бензилового спирта. При хранении препарата активное вещество выпадает в осадок. И только одновременное присутствие калиевой и натриевой солей в соотношении 9:1-7:1 мас.% приводит к желаемой физической и химической стабильности препарата.

Таким образом, отличительными признаками предлагаемого средства являются определенные соотношения калиевой и натриевой солей, а именно 9:1-7:1 мас.%, и наличие бензилового спирта в количестве 1-3 мас.%. Увеличение количества бензилового спирта не сказывается на стабильности препарата.

Средство готовится обычным образом, для чего фторхинолонкарбоновую кислоту добавляют в воду, сюда же добавляют расчетное количество натриевой и калиевой щелочи. После растворения продукта приливают необходимое количество бензилового спирта, раствор фильтруют и расфасовывают.

Следующие примеры иллюстрируют изобретение.

Примеры на стабильность
Для определения физической стабильности были проведены опыты с образцами в условиях, максимально приближенных к реальным.

Для опыта на ускоренном физическом старении температура использовалась как внешний параметр. Во время опыта 10 образцов испытывали в коротких циклах колебания температуры: 40^oC – температура окружающей среды + 3^oC температура окружающей среды + 40^oC. При каждой температуре образцы выдерживали 24 часа в течение месяца. В качестве образцов использовали водные растворы калиевой соли, натриевой соли, смесь калиевой и натриевой солей в различных массовых соотношениях. При определении физической стабильности раствора анализировались такие параметры, как pH раствора, степень прозрачности, окраска. Эти параметры должны практически не изменяться. Результаты анализов фиксировали каждые 3 дня при трех различных значениях температуры.

Результаты оказались следующими: pH растворов образцов находилась в неизменных пределах, окраска растворов практически осталась без изменения.

Степень прозрачности – в образцах на смесь калиевой и натриевой солей при массовом соотношении 9:1-7:1 кристаллизации не наблюдалось, в остальных образцах в большей или меньшей степени присутствовал осадок. Результаты представлены в табл. N 1.

Химическая стабильность.

Определяется изменением содержания активного вещества в течение времени.

В целях определения химической стабильности препарата был поставлен эксперимент, в котором каждые 6 месяцев в течение трех лет оценивали концентрацию активного вещества.

В качестве эталона сравнения использовали норфлоксацин в идентичных условиях, исходная концентрация препаратов была 10 мас.%. Результаты приведены в табл. N 2.

Таким образом, скорость распада действующего вещества заявленного средства значительно ниже, чем у эталона сравнения.

На Краснодарской научно-исследовательской ветеринарной станции был проведен научный скрининг двух химических соединений на наличие у них антибактериальной активности. В исследованиях использовались музейные штаммы золотистого стафилококка N 2093 и кишечной палочки N 1749, а также полевые штаммы следующих бактерий: S.aureus 509, E.coli 510, S.dublin 504, P.aeruginosa 167. Антибактериальную активность соединений устанавливали методом серийных разведений в жидкой питательной среде по показателю минимальной подавляющей концентрации (МПК) для тест-бактерий. Кроме того, соединение N2 тестировалось на наличие у него химиотерапевтического действия при эшерихиозной септицемии. Для чего заражали белых мышей путем введения в брюшную полость агарового смывасуточной культуры E.coli 510 в дозе 2 LD₅₀ (500 млн. м. т.). Сразу после заражения животным через зонд задавали препарат в дозе 5 мг/гол, контрольным мышам вводили воду.

Для сравнительной оценки активности соединений определили активность известных лекарственных препаратов: фуразолидона, нитроксалина, левомицетина, бензилпенициллина, тетрациклина. Результаты опыта отражены в табл. N 3.

По результатам опытов, отраженных в табл. N 3 и N 4, составлена табл. N 5, в которой приведены значения минимальных концентраций препаратов для музейных штаммов бактерий.

Как видно из табл. N 5, тестируемые соединения обладают выраженной антибактериальной активностью как в отношении грамотрицательного, так и в отношении грамположительного микроорганизма. Наиболее низкое значение МПК зарегистрировано для соединения N 2 (заявляемое соединение), которое в одинаковой степени действует на стафилококк и кишечную палочку. Изучаемые соединения конкурируют с известными в клинической практике антибактериальными препаратами.

Наиболее активными из тестируемых соединений было вещество N 2, МПК которого для музейных штаммов составила 0,09 мкг/мл. Поэтому данное соединение проверили на полевых штаммах бактерий, изолированных от больных животных. Результаты опыта представлены в табл. N 6.

Как видно из представленных таблиц, соединение N 2 обладает значительной активностью по отношению к различным видам бактерий, в т.ч. к синегнойной палочке. Наиболее чувствительным микроогранизмом к тестируемому веществу оказался стафилококк, рост которого ингибировался при концентрации 0,19 мкг/мл.

Соединение N 2 было проверено на наличие у него химиотерапевтического действия на модели экспериментальной эшерихиозной септицемии. Результаты опыта отражены в табл. N 8.

Таким образом, заявляемое средство обладает повышенной химической и физической стабильностью, а также высокой антимикробной активностью.

Формула изобретения

Антимикробное средство на основе производного фторхинолона, отличающееся тем, что в качестве производного фторхинолона, оно содержит смесь калиевой и натриевой соли соединения формулы I

где Х – калий, натрий, при массовом соотношении 9 : 1 – 7 : 1 и дополнительно бензиловый спирт и воду при следующем соотношении компонентов: смесь калиевой и натриевой соли соединения формулы I при массовом соотношении 9 : 1 – 7 : 1 10 мас.%, бензиловый спирт 1 – 3 мас.%, вода до 100 мас.%.

РИСУНКИ

PC4A – Регистрация договора об уступке патента Российской Федерации на изобретение

Прежний патентообладатель:

Общество с ограниченной ответственностью “Поливит”

(73) Патентообладатель:

Общество с ограниченной ответственностью “ПОЛИТРИЛ-ИНВЕСТ”

Дата и номер государственной регистрации перехода исключительного права: 15.12.2006 № РД0015541

Извещение опубликовано: 27.01.2007 БИ: 03/2007

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 15.02.2007

Извещение опубликовано: 20.01.2008 БИ: 02/2008