Патент на изобретение №2338196

(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЧАСТОЙ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА С ПЕРИНАТАЛЬНЫМИ ПОРАЖЕНИЯМИ ЦНС

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может использоваться для прогнозирования частой заболеваемости ОРВИ у детей раннего возраста с перинатальными поражениями центральной нервной системы в анамнезе. Способ заключается в том, что после 1-го года у ребенка в периферической венозной крови определяют относительное содержание CD16+ лимфоцитов и при его значении, равном 10,1% или более, прогнозируют частую заболеваемость ОРВИ у детей до 3-х лет с точностью 80,0%. Способ позволит своевременно назначить необходимое наблюдение за детьми раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС, ввести профилактические и лечебные мероприятия, снизить заболеваемость и предотвратить развитие хронической патологии у детей 1-3 лет. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования частой заболеваемости ОРВИ у детей раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС.

Недостатки способа:

1. При выполнении методики розеткообразования используются нестандартизованные реактивы: эритроциты барана, антисыворотка кролика и эритроциты быка.

2. Известны возрастные изменения иммунного статуса детей, которые не позволяют использовать критерии, предложенные в данном способе, для прогнозирования частой заболеваемости у детей раннего возраста [8, 9].

3. Оценка результатов метода розеткообразования осуществляется визуально при световом микроскопировании, что не исключает субъективный компонент.

Недостатки способа:

1. Узкое применение способа только для детей с минимальной мозговой дисфункцией, не применяется у детей с другими последствиями перинатальных поражений ЦНС.

2. Не указаны чувствительность и специфичность способа.

3. Большие временные затраты (1 час 40 мин).

4. Забор большого объема крови – 1 мл.

Указанные недостатки предлагается устранить в заявляемом способе.

Техническим решением заявляемого способа является повышение точности прогнозирования частой заболеваемости ОРВИ у детей раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС в анамнезе путем определения в периферической венозной крови ребенка старше 1 года относительного содержания CD16+лимфоцитов, и при значении показателя, равном 10,1% или более, прогнозируют частую заболеваемость ОРВИ у детей до 3-х лет в 80,0 % случаев.

Новизна способа:

Впервые предлагается прогнозировать частую заболеваемость ОРВИ у детей раннего возраста (от 1 до 3 лет) с перинатальными поражениями ЦНС в анамнезе по определению относительного содержания CD16+ лимфоцитов в периферической венозной крови детей старше 1 года.

Ранее было выявлено повышение содержания CD16+ лимфоцитов в периферической крови женщин с бесплодием и эндометриозом [10], привычным невынашиванием беременности [11]. Увеличение лимфоцитов с маркерами CD16+ отмечалось у новорожденных с локальными нетяжелыми формами инфекционно-воспалительной патологии, с внутриутробной пневмонией [12], от матерей с эндемическим зобом [13] и угрозой прерывания беременности [14].

Стабильно повышенный уровень CD16+ лимфоцитов при отсутствии инфекционно-воспалительной патологии, возможно, приводит к истощению их функциональной активности, ведущей к затруднению реакций цитотоксичности и, следовательно, к более частой заболеваемости детей.

Отличительные признаки способа:

Установлен прогностический параметр относительного содержания CD16+ лимфоцитов в периферической венозной крови детей, и при значении этого параметра, равного 10,1% или более, прогнозируют частую заболеваемость.

Способ осуществляется следующим образом:

1. У детей старше 1 года с перинатальными поражениями ЦНС в анамнезе производят забор 0,5 мл периферической венозной крови.

2. Выделение лимфоцитов из периферической венозной крови осуществляется стандартным методом – центрифугированием в градиенте плотности фиколл-верографин при 1500 об/мин в течение 30 минут [15].

3. В пробирку, содержащую 100 мкл лимфоцитов в концентрации 1×10⁶ кл/мл, добавляют 20 мкл моноклональных анти-СВ16+ антител, меченных FITC или РЕ. Клетки инкубируют с моноклональными антителами в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте, после чего отмывают 1 раз 1 мл физиологического раствора центрифугированием при 1500 об/мин в течение 2 минут. Клетки в пробирках ресуспендируют в 500 мкл физиологического раствора [16].

4. Учет реакции проводят на проточном цитометре, определяя в лимфоцитарном гейте процентное (относительное) содержание CD16+ клеток.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.

Пример 1.

Ребенок А. 1 года 2 месяцев родился от второй беременности, вторых своевременных родов в срок 39 недель. Беременность у матери протекала на фоне анемии, ожирения, хронического пиелонефрита. Вес при рождении – 3350 г, рост – 50 см, оценка по шкале Апгар 8-9 баллов. Диагноз при рождении: Гипоксически-ишемическое поражение ЦНС, гипертензивный синдром, синдром гипервозбудимости. На первом году жизни перенес ОРВИ 1 раз. В 1 год поставлен диагноз: Последствия перинатального поражения ЦНС, гипертензивный синдром, фаза компенсации, задержка речевого развития. Забор крови производился в 1 год 2 мес. при отсутствии признаков инфекционно-воспалительной патологии и не менее чем через 1 мес. после вакцинации. При иммунологическом обследовании в анализе крови содержание CD 16+ лимфоцитов составило 10,1%. Прогнозировалась частая заболеваемость. При последующем наблюдении на втором году жизни перенес ОРВИ 7 раз, в том числе ОРВИ, осложненную острым простым бронхитом, и ОРВИ, осложненную острым средним двухсторонним катаральным отитом. На третьем году жизни переболел ОРВИ 6 раз, в том числе, осложненную острым обструктивным бронхитом, и ОРВИ, осложненную острым левосторонним катаральным средним отитом, перенес ветряную оспу. Таким образом, прогноз частой заболеваемости у детей раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС по предлагаемому способу подтвердился.

Пример 2.

Ребенок Б. 1 года 5 месяцев родился от первой беременности, первых своевременных родов в 40 недель. Беременность протекала на фоне угрозы прерывания в первом триместре, водянки беременных. Течение родов осложнилось преждевременным излитием околоплодных вод. Вес при рождении – 3500 г, рост – 51 см, оценка по шкале Апгар 7-8 баллов. Диагноз при рождении: Перинатальное гипоксически-ишемическое поражение ЦНС, синдром гипервозбудимости, синдром двигательных нарушений. На первом году жизни перенес 2 эпизода ОРВИ. В 1 год поставлен диагноз: Последствия перинатального поражения ЦНС, синдром внутричерепной гипертензии, фаза компенсации. Забор крови производился 1 год 3 мес. при отсутствии признаков инфекционно-воспалительной патологии, не менее чем через 1 мес. после вакцинации. При иммунологическом исследовании в анализе крови содержание CD16+ лимфоцитов составило 8,2%. Частая заболеваемость не прогнозировалась. На втором году жизни перенес ОРВИ 2 раза и ОРВИ, осложненную простым острым бронхитом. На третьем году жизни переболел ОРВИ 3 раза.

Таким образом, прогноз по предлагаемому способу подтвердился.

Пример 3.

Ребенок В. 1 года 11 месяцев от 3 беременности, первых своевременных родов. Беременность протекала на фоне отягощенного акушерско-генекологического анамнеза (2 медицинских аборта), анемии в первой половине беременности, нефропатии. Роды осложнились первичной слабостью родовой деятельности, проводилась медикаментозная стимуляция родов. Диагноз при рождении: Гипоксически-ишемическое поражение ЦНС, гипертензивно-гидроцефальный синдром, синдром повышенной нервно-рефлекторной возбудимости. На первом году жизни перенес однократно ОРВИ, осложненную острым левосторонним катаральным отитом. В 1 год поставлен диагноз: Последствия перинатального поражения ЦНС, гипертензивный синдром, фаза компенсации, задержка нервно-психического развития. Забор крови производился в 1 год 2 нед. при отсутствии признаков инфекционно-воспалительной патологии, не менее чем через 1 мес. после вакцинации. При иммунологическом исследовании в крови обнаружено содержание CD16+ лимфоцитов, равное 13%. Прогнозировалась частая заболеваемость. На втором году перенес ОРВИ 7 раз, в том числе 2 раза ОРВИ, осложненные острым бронхитом, и ОРВИ, осложненную стенозирующим ларинготрахеитом. На третьем году переболел ОРВИ 7 раз, в том числе 2 раза ОРВИ, осложненные острым обструктивным бронхитом.

Таким образом, прогноз частой заболеваемости по предлагаемому способу подтвердился.

Преимущества способа:

1. Заявляемый способ не требует больших временных затрат и осуществляется за 1 час 10 мин.

2. Предлагаемый способ имеет высокую точность – 80,0%.

3. Исследуется малый объем крови (0,5 мл).

4. Позволяет своевременно назначить необходимое наблюдение за детьми раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС в анамнезе, ввести профилактические и лечебные мероприятия, снизить заболеваемость и предотвратить развитие хронической патологии у детей 1-3 лет.

Указанным способом обследовано 60 детей раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС.

Результаты исследования представлены в таблице 1.

Литература

8. Лебедев К.А., Понякина И.Д. Иммунограмма в клинической практике. – М., 1990. – 223 с.

14. Левкова Е.А. Антенатальные аспекты формирования иммуно-дефицитных болезней у детей: Автореферат дис. … д.м.н. – Хабаровск, 2006. – 49 с.

Формула изобретения

Способ прогнозирования частой заболеваемости ОРВИ у детей раннего возраста с перинатальными поражениями центральной нервной системы в анамнезе, включающий иммунологическое исследование периферической венозной крови ребенка старше 1 года, отличающийся тем, что в крови определяют относительное содержание CD16+ лимфоцитов и при его значении, равном или более 10,1%, прогнозируют частую заболеваемость до 3-х лет.