Патент на изобретение №2338192

Published by on




РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ



ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
(19) RU (11) 2338192 (13) C1
(51) МПК

G01N33/49 (2006.01)

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

Статус: по данным на 08.10.2010 – прекратил действие, но может быть восстановлен

(21), (22) Заявка: 2007106158/15, 19.02.2007

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:

19.02.2007

(46) Опубликовано: 10.11.2008

(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске:
ПЕТРИЩЕВ Н.Н. и др. Диагностическая ценность определения десквамированных эндотелиальных клеток в крови. Клин. лаб. диагност., 2001, №1, с.50-58. RU 2091795 С1, 27.09.1997. RU 2234094 С2, 10.08.2004. RU 2287818 C1, 20.11.2006. US 7108982 A, 19.09.2006. MIASOEDOVA E.E. Use of alpha-tocopherol in correction of red blood (erythron) system disorders in

Адрес для переписки:

153012, г.Иваново, пр. Ф. Энгельса, 8, ГОУВПО “Ивановская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию”

(72) Автор(ы):

Мясоедова Елена Евгеньевна (RU)

(73) Патентообладатель(и):

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования “Ивановская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию” (RU)

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ДЕСКВАМИРОВАННЫХ ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК В ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике в ревматологии. Получают по стандартной методике значение концентрации десквамированных эндотелиальных клеток (ДЭК) в 1 л плазмы крови. Затем пересчитывают концентрацию ДЭК в 1 л цельной крови с учетом уровня гематокрита по следующей формуле: ДЭК=(0,56·N·(100-Ht)/100)·105. Возможны сопоставления результатов подсчета концентрации ДЭК у больных и здоровых лиц при различном уровне гематокрита. Изобретение позволяет определить концентрацию ДЭК в цельной крови, что делает результат более универсальным и сопоставимым с концентрацией других клеточных элементов в крови, а также повышает точность диагностики эндотелиальной дисфункции. 1 табл.

(56) (продолжение):

CLASS=”b560m”rats with acute nitrite intoxication. Eksp Klin Farmacol. 2003. Sep-Oct; 66(5):35-9. PubMed: 14650213 реферат найдено [он дайн] 17.04.2008 в PubMed.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике в ревматологии.

Технический результат предлагаемого способа заключается в повышении точности определения концентрации ДЭК в цельной крови за счет введения дополнительного индекса, учитывающего уровень гематокрита и соответственно разведение полученного по стандартной методике содержания ДЭК.

Предлагается способ определения концентрации ДЭК в цельной крови, качественно дополняющий имеющуюся методику определения концентрации ДЭК в плазме.

1. Стандартным образом, согласно методике Hladovec J., 1978, готовят препараты ДЭК и определяют концентрацию ДЭК в 1 л плазмы по формуле ДЭК=0,56·N·105, где N – число ДЭК в двух сетках камеры Горяева, 0,56 – коэффициент, учитывающий объем камеры и изменения объема исследуемого материала в процессе приготовления препаратов ДЭК.

2. Определяют показатель гематокрита (Ht) и долю плазмы

(P)=100%-Ht.

3. Высчитывают коэффициент индексации для перевода концентрации ДЭК в 1 л плазмы на содержание ДЭК в 1 л цельной крови (К)=Р/100%, где 100% – объем цельной крови.

4. Полученное по стандартной методике число ДЭК в 1 л плазмы умножают на коэффициент К для получения показателя концентрации ДЭК в 1 л цельной крови.

Итоговая формула: ДЭК=(0,56·N·(100-Ht)/100)·105,

где ДЭК – концентрация десквамированных эндотелиальных клеток в цельной крови;

105 – степень, учитывающая концентрацию ДЭК;

N – количество ДЭК, полученное при их подсчете в двух сетках камеры Горяева;

Ht – уровень гематокрита;

0,56; 100 – коэффициенты, учитывающие изменения объема исследуемого материала в процессе приготовления препаратов ДЭК и перевод значений концентрации ДЭК в 1 л плазмы на концентрацию ДЭК в 1 л крови.

Пример осуществления изобретения

Для успешного достижения конечной цели – подсчета концентрации ДЭК в 1 л цельной крови необходимо поэтапно выполнить все вышеуказанные операции, в ходе которых производится пересчет содержания ДЭК в 1 л плазмы крови на концентрацию ДЭК в 1 л цельной крови с учетом показателя гематокрита по следующей формуле:

ДЭК=(0,56·N·(100-Ht)/100)·105

Клинический пример

1. Больная К., 35 лет с диагнозом “Ревматоидный артрит. Серопозитивный. Полиартрит. Активность 2. Рентгенологическая стадия 2. Функциональный класс 2. Хроническая железодефицитная анемия средней степени тяжести”.

Число ДЭК в 1 л плазмы = 3,89·105 клеток

Гематокрит = 31%, доля плазмы = 100-31=69%

Коэффициент индексации = 69/100=0,69

Число ДЭК в 1 л цельной крови = (3,89·0,69) клеток·105 = 2,7·105 клеток или ДЭК = (N·0,56·(100-Ht)/100)·105=(7·0,56·(100-31)/100·105=2,7·105 клеток,

где 7 – число ДЭК в 2 ячейках камеры Горяева.

2. Обследуемая Н. из контрольной группы (практически здоровая женщина), 33 лет.

Число ДЭК в 1 л плазмы = 3,89·105 клеток

Гематокрит = 41%, доля плазмы = 100-41=59%

Коэффициент индексации = 59/100=0,59

Число ДЭК в 1 л цельной крови = (3,89·0,59) клеток·105=2,2·105

клеток или ДЭК = (N·0,56·(100-Ht)/100)·105=(7·0,56(100-41)/100·105=2,2·105 клеток,

где 7 – число ДЭК в 2 ячейках камеры Горяева.

Таким образом, при равных концентрациях ДЭК в плазме крови их содержание в цельной крови различается и позволяет иначе трактовать результаты исследования. Так, у больной с анемией число ДЭК в цельной крови выше, чем у женщины из контрольной группы, что свидетельствует о вовлечении эндотелия в патологический процесс и требует наблюдения в динамике заболевания.

Разница достаточно заметна уже при единичном исследовании и может существенно изменить средний показатель по выборке в целом.

Так, нами обследован 31 пациент с ревматоидным артритом (РА) и сопутствующей анемией и 15 практически здоровых лиц (табл.1).

У пациентов с РА содержание ДЭК в 1 л плазме составило (4,92±0,37)·105 клеток и достоверно не отличалось от контрольной группы, где аналогичный показатель был равен (3,72±0,43)·105 клеток (р=0,07). Однако уровень гематокрита у здоровых был достоверно выше, чем при РА с сопутствующей анемией (41,7±0,84% против 35,59±0,87% соответственно) (р=0,00000005). Это обусловило достоверную разницу показателей ДЭК в цельной крови: у пациентов с РА и анемией концентрация ДЭК в цельной крови составила (3,17±0,24)·105 клеток и была достоверно выше, чем у здоровых (2,18±0,27)·105 клеток (р=0,01).

Таким образом, предлагаемый способ позволяет определять содержание ДЭК в цельной крови, что делает результат подсчета более универсальным и сопоставимым с концентрацией других клеточных элементов в крови, а также повышает точность диагностики эндотелиальной дисфункции у лиц с различным уровнем гематокрита (в том числе при анемических состояниях) у ревматологических больных, делая возможным сопоставление результатов подсчета концентрации ДЭК у больных и здоровых лиц при различном уровне гематокрита.

Таблица 1
Концентрация десквамированных эндотелиоцитов в плазме и цельной крови и уровень гематокрита у больных ревматоидным артритом с сопутствующей анемией и практически здоровых лиц
Пациенты с РА и анемией Здоровые лица
ДЭК пл.·105, кл/л ДЭК ЦК·105, кл/л Ht,% ДЭК пл.·105, кл/л ДЭК ЦК·105, кл/л Ht,%
1 5,28 3,56 32,6 5 2,99 40,2
2 3,61 2,43 32,8 5,56 3,39 39,1
3 5,56 3,51 36,9 4,72 2,87 39,1
4 8,06 4,9 39,2 1,67 0,98 41,3
5 3,89 2,51 35,4 2,78 1,58 43
6 3,06 1,95 36,3 4,72 2,8 40,7
7 2,5 1,6 35,9 3,89 2,39 38,5
8 10 6,42 35,8 1,94 1,2 38,3
9 4,17 2,61 37,3 2,78 1,67 40
10 2,22 1,39 37,5 3,61 2,06 42,9
11 2,5 1,56 37,7 7,5 4,64 38,1
12 5,56 3,53 36,5 3,06 1,68 45,2
13 3,33 2,13 36,13 1,67 0,89 46,6
14 4,72 3,02 36 5 2,56 48,9
15 3,06 1,89 38,2 1,94 1,09 43,8
16 4,44 2,75 38,1
17 8,89 5,57 37,3
18 4,17 2,58 38,2
19 8,89 4,69 47,2
20 3,61 2,27 37
21 4,44 2,95 33,5
22 4,17 2,69 35,6
23 2,78 1,85 33,3
24 7,78 6,19 20,4
25 5,83 3,75 35,6
26 5,28 3,32 37,1
27 2,22 1,35 39,3
28 3,89 2,71 30,4
29 6,39 5,05 20,97
30 5,28 3,32 37,1
31 6,94 4,3 38,1
Среднее ± ошибка среднего 4,92±0,37 3,17±0,24 41,7±0,84 3,72±0,43 2,18±0,27 35,59±0,87
Медиана 4,92 3,17 35,59 3,61 2,06 40,7
Интерквартильный размах от 3,33
до 5,83
от 2,13
до 3,75
от 35,4
до 37,7
от 1,94
до 5
от 1,2
до 2,87
от 39,1
до 43,8
Тест Манна-Уитни Р=0,066 Р=0,018 Р<0,001
Примечание:
PA – ревматоидный артрит;
ДЭК пл.·105, кл/л – концентрация десквамированных эндотелиальных клеток в 1 л плазмы · 105;
ДЭК ЦК·105, кл/л – концентрация десквамированных эндотелиальных клеток в 1 л цельной крови · 105;
Ht,% – уровень гематокрита, %;
Тест Манна-Уитни проводился между двумя сравниваемыми группами (пациенты с РА и анемией и здоровые лица) по соответствующим показателям (ДЭК пл.·105, кл/л;
ДЭК ЦК·105, кл/л Ht, %)

Формула изобретения

Способ определения концентрации десквамированных эндотелиальных клеток (ДЭК) в цельной крови путем исследования плазмы крови, отличающийся тем, что дополнительно производится пересчет содержания ДЭК в 1 л плазмы крови на их концентрацию в 1 л цельной крови с учетом уровня гематокрита по следующей формуле: ДЭК=(0,56·N·(100-Ht)/100)·105,

где ДЭК – концентрация десквамированных эндотелиальных клеток в цельной крови;

105 – степень, учитывающая концентрацию ДЭК;

N – количество ДЭК, полученное при их подсчете в двух сетках камеры Горяева;

Ht – уровень гематокрита;

0,56; 100 – коэффициенты, учитывающие изменения объема исследуемого материала в процессе приготовления препаратов ДЭК и перевод значений концентрации ДЭК в 1 л плазмы на концентрацию ДЭК в 1 л крови.


MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 20.02.2009

Извещение опубликовано: 20.02.2010 БИ: 05/2010


Categories: BD_2338000-2338999