Патент на изобретение №2338191
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ У НОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ С ГИПЕРБИЛИРУБИНЭМИЕЙ
(57) Реферат:
Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии и инфекционным болезням, и может быть использовано для определения степени тяжести эндогенной интоксикации у новорожденных детей с гипербилирубинэмией. Сущность способа: осуществляют забор 0,02 мл капиллярной крови, в которой определяют проницаемость эритроцитарных мембран по осмотической резистентности эритроцитов. При значении проницаемости эритроцитарных мембран 12,05±0,06% диагностируют легкую степень эндогенной интоксикации, при значении 29,8±0,015% – среднетяжелую степень эндогенной интоксикации, а при значении 58,23±0,24% – тяжелую степень эндогенной интоксикации. Использование способа позволяет повысить точность определения степени тяжести эндогенной интоксикации при гипербилирубинэмии у новорожденных детей. 2 табл.
(56) (продолжение): Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии и инфекционным болезням, и может быть использовано для оценки степени тяжести эндогенной интоксикации при гипербилирубинэмии у детей. Эндогенная интоксикация (ЭИ) является неспецифическим синдромом, характерным для многих заболеваний. Прогноз течения заболеваний, выбор способа дезинтоксикационной терапии невозможно осуществить без объективной оценки степени эндогенной интоксикации. К настоящему времени разработано множество способов диагностики ЭИ. Наиболее объективными из них считаются: определение гуморального агента, ответственного за развитие ЭИ – определение, так называемого, маркера интоксикации. Но можно выделить слишком большую группу токсичных веществ эндогенного происхождения (билирубин, желчные кислоты, фракции остаточного азота, циркулирующие иммунные комплексы и др. так называемые средние молекулы или молекулы средней массы (МСМ) и еще большую группу экзогенных токсичных факторов). Определение МСМ достаточно дорогостоящий способ и требует определенного оборудования. Способы диагностики ЭИ путем тестирования крови больного на биологических агентах требуют определенных условий работы и значительных затрат времени. Таким образом, проблема маркера интоксикации еще далека от окончательного решения. В большинстве случаев факта обнаружения того или иного токсического агента недостаточно для того, чтобы адекватно объяснить клинические данные. Дезинтоксикационные механизмы в каждом организме имеют индивидуальный функциональный порог. В практической же деятельности врачу необходимо в считанные минуты определиться в степени интоксикации и своевременно начать реанимационные мероприятия, от своевременности начала которых зачастую зависит исход лечения. В последние годы возрос интерес к изучению механизмов вовлечения системы крови в реакцию организма на стресс и экстремальные воздействия. Эритроциты первыми вступают в контакт с токсическими агентами, прежде всего вследствие их многочисленности и способности изменять свою форму и образовывать агрегаты. Контакт с токсическими агентами приводит к повреждению эритроцитарных мембран. Таким образом, повреждение эритроцитарных мембран можно рассматривать как интегральный показатель токсичности экзо и эндотоксинов. В качестве прототипа авторы предлагают «Способ диагностики синдрома эндогенной интоксикации» Лазорева В.М., патент N RU 2234095 от 10.08.2004 г, включающий оценку проницаемости мембран эритроцитов в присутствии водного раствора NaCl в разведениях, количество эритроцитов определяют в камере Горяева и при количестве негемолизированных эритроцитов, в 10 раз превышающем контрольное, диагностируют синдром эндогенной интоксикации. Наряду с несомненными достоинствами, метод имеет некоторые недостатки: 1) для данного метода используется венозная кровь в количестве 4 мл – 5 мл, что для педиатрической практики (особенно в неонатологии) не допустимо; 2) метод констатирует сам факт наличия или отсутствия эндогенной интоксикации у больных, не характеризуя отдельные степени ЭИ при гипербилирубинэмии, в частности; 3) возраст обследуемых от 17 до 76 лет – это значительный разброс, что может отразиться на результатах определения ПЭМ; 4) больные, взятые для обследования, с полиорганной патологией, что также может отразиться на результатах определения ПЭМ; 5) кровь детей не исследовалась, а у детей многие биохимические процессы протекают отлично от взрослых в силу того, что у детей происходит развитие и формирование систем адаптации (нервной, иммунной и эндокринной). Техническим результатом заявленного авторами изобретения является повышение скорости и точности определения степени тяжести эндогенной интоксикации при гипербилирубинэмии у новорожденных детей. Предлагается: 1) микрометод (достаточно 0,02 мл крови); 2) метод количественный (более точный и быстрый: степень гемолиза определяли не в камере Горяева, что субъективно, а на ФЭКе, по концентрации свободного гемоглобина). Эритроциты разводят физиологическим раствором в соотношение 1:2 (к 0,02 мл капиллярной крови добавляют 0,04 физиологического раствора) и по 0,01 мл взвеси помещают в 5 центрифужных пробирок, в каждую центрифужную пробирку добавляют по 2,5 мл рабочего раствора с возрастающей концентрацией мочевины. Схема приготовления рабочих растворов для определения ПЭМ приведена в таблице 1.
Гемолиз в смесях изотонических растворов мочевины и хлористого натрия обусловлен способностью мочевины быстро диффундировать через клеточную мембрану и, создавая гиперосмолярную концентрацию внутри эритроцита, вызывать его набухание с последующим гемолизом. Степень гемолиза выражают в единицах оптической плотности. ПЭМ определяют как отношение оптической плотности пробы к оптической плотности пробы с 100% гемолизом (6-я пробирка), умноженное на 100%. Степень гемолиза пропорциональна проницаемости данной популяции эритроцитов. Опытным путем было установлено, что наиболее информативными для определения ПЭМ были показатели оптической плотности гемолиза с рабочим раствором 60:40 (4-я пробирка). Материалом для исследования явилась капиллярная кровь 96 новорожденных детей от 0 до 8 мес., находившихся в реанимационном отделении детской больницы №1 г.Твери, забираемая планово для контроля за их состоянием. Было установлено, что в норме (клинически здоровые новорожденные) проницаемость эритроцитарных мембран (ПЭМ) составляет 5,04±0,2%. Показатели ПЭМ у новорожденных с гипербилирубинэмией имели большой разброс. При легкой степени гипербилирубинэмии показатели ПЭМ составили 12,05±0,06%, при среднетяжелой – 29,8±0,015%, при тяжелой форме – 58,23±0,24%. Результаты исследования приведены в таблице 2.
Клинические испытания «способа определения степени тяжести эндогенной интоксикации при гипербилирубинэмии у новорожденных» показали, что способ позволяет прогнозировать степень эндотоксикоза с точностью прогноза 85%. Диагностически значимым для перехода в новое состояние (здоровые, то есть нет интоксикации – легкая – среднетяжелая – тяжелая степень тяжести интоксикации) является увеличение ПЭМ приблизительно в два раза (5,04±0,2-12,05±0,06-29,8±0,015-58,23±0,24). Происходит своего рода качественный скачок. Клинический пример №1 Клинический пример №2 Клинический пример №3 Была диагностирована среднетяжелая степень тяжести интоксикации. После проведенных дезинтоксикационных мероприятий ребенок через сутки был переведен в инфекционное отделение. Окончательный диагноз: гепатит А, гипербилирубинэмия 2 стадии, средне-тяжелая степень тяжести. Прогноз полностью подтвердился.
Формула изобретения
Способ определения степени тяжести эндогенной интоксикации у новорожденных детей с гипербилирубинэмией, включающий исследование крови, отличающийся тем, что осуществляют забор 0,02 мл капиллярной крови, определяют проницаемость эритроцитарных мембран по осмотической резистентности эритроцитов, и при значении проницаемости эритроцитарных мембран 12,05±0,06% диагностируют легкую степень эндогенной интоксикации, при значении 29,8±0,015% – диагностируют среднетяжелую степень эндогенной интоксикации, а при значении 58,23±0,24% – тяжелую степень эндогенной интоксикации.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
