Патент на изобретение №2334510
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРВЕДИЛОЛА МЕТОДОМ ИНВЕРСИОННОЙ ВОЛЬТАМПЕРОМЕТРИИ
(57) Реферат:
Изобретение относится к области аналитической химии, в частности к инверсионному вольтамперометрическому способу определения лекарственного вещества карведилола ([({±})-1-(9Н-карбазол-4-илокси)-3-[[2-(2-метоксифенокси)этил]амино]пропан-2-ол]), и может быть использовано в медицине для определения концентрации в крови карведилола, являющегося гипотензивным препаратом группы
(56) (продолжение): Изобретение относится к области аналитической химии, в частности к инверсионному вольтамперометрическому способу определения лекарственного вещества карведилола ([({±})-1-(9Н-карбазол-4-илокси)-3-[[2-(2-метоксифенокси)этил]амино]пропан-2-ол]), и может быть использовано в медицине для определения концентрации в крови карведилола, являющегося Данный лекарственный препарат оказывает антиангинальное, гипотензивное, антиоксидантное, сосудорасширяющее, антипролиферативное действие. Блокирует Количественное определение карведилола является актуальным в оценке эффективности лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы. Сведения по количественному определению микроколичеств карведилола методом инверсионной вольтамперометрии отсутствуют. Известен способ определения карведилола с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии, основанный на определении площади пика вещества исследуемого и стандартного образцов. При этом используют жидкостный хроматограф с автоинжектором типа SJL-10AD (Shimadzu), дозирующим устройством 10 мкл, детектором переменного ультрафиолета типа SPD-10AV, систему обработки данных типа SCL-100, насос типа LC-10AD; колонка: Supelcosil LC-18DB, 5 мкм, нержавеющая сталь, 250×4,6 мм, предколонка: Supelcosil LC-18DB, 5 мкм, нержавеющая сталь, 4,6×4,6 мм. В качестве подвижной фазы выступает смесь растворителей, состоящая из ацетонитрила и 0,1 М раствора однозамещенного фосфата натрия в соотношении (48:52) по объему, значение рН которой доведено до значения 3,7 с помощью 85% раствора фосфорной кислоты. Скорость прохождения раствора через сорбент составляет 0,8 мл/мин, объем вводимой пробы – 20 мкл, время регистрации пиков – 40 мин [2]. Недостатками данного способа являются длительность и трудоемкость анализа, подразумевающая использование большого количества реактивов, которые могут загрязнять пробу при проведении исследования. Наиболее близким способом является инверсионно-вольтамперометрическое определение лекарственного препарата дигоксина, взятое за прототип. Определение дигоксина заключается в электрохимическом концентрировании вещества на поверхности ртутно-пленочного электрода в течение 180 с при потенциале электролиза (-1,80)-(-1,75) В на фоне 0,2 н. лития хлорида с последующей регистрацией вольтамперных кривых при скорости развертки потенциала 20 мВ/с, а концентрацию дигоксина определяют по высоте пика в диапазоне потенциалов (-1,10)-(-1,00) В относительно хлор-серебряного электрода [1]. Использование условий, приведенных в способе-прототипе, не обеспечивает чувствительности и экспрессности определения карведилола в модельных смесях и биологических жидкостях. Целью изобретения является увеличение чувствительности и экспрессности способа определения карведилола методом инверсионной вольтамперометрии. Поставленная цель достигается техническим решением, представляющим собой определение карведилола методом инверсионной вольтамперометрии, путем регистрации поляризационных кривых с предварительным электрохимическим концентрированием вещества на поверхности электрода. Для этого через раствор пропускают азот с содержанием кислорода менее 0,001%, и, не прекращая перемешивания, проводят электролиз раствора при потенциале -0,4 В в течение 210 с. В качестве рабочего используют графитовый электрод с золотым напылением. Затем регистрацию поляризационных кривых проводят при постоянно-токовой форме развертки потенциала со скоростью 150 мВ/с. Концентрацию карведилола определяют по высоте пика в интервале потенциалов от 0,2 до 0,9 В относительно хлор-серебряного электрода. Определение проводят на фоне 0,01 моль/л раствора калия хлорида при нейтральной рН среды. Новым в способе является то, что проводят предварительное электрохимическое накопление карведилола при потенциале электролиза, равном (-0,4) В в течение 210 с. В качестве рабочего электрода используют графитовый электрод с золотым напылением. Регистрацию поляризационных кривых проводят при постоянно-токовой форме развертки потенциала со скоростью 150 мВ/с, а концентрацию карведилола определяют по высоте пика в интервале потенциалов от 0,2 до 0,9 В относительно хлор-серебряного электрода на фоне 0,01 моль/л раствора калия хлорида при нейтральной рН среды. Отличительные признаки, характеризующие изобретение, проявили в заявляемой совокупности новые свойства (увеличение чувствительности 10-3-10-1 мг/л и экспрессности анализа), явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и не являющиеся очевидными для специалиста. Идентичной совокупности признаков не обнаружено при изучении патентной и научно-медицинской литературы. Данное изобретение может быть использовано в практическом здравоохранении. Исходя из вышеизложенного следует считать предлагаемое изобретение соответствующим условиям патентоспособности «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость». Все условия определения карведилола подобраны экспериментально. Приготовление фоновых и стандартных растворов органического вещества в воде являются общепринятыми. В процессе поиска оптимальных условий инверсионного вольтамперометрического определения карведилола изучено влияние ряда факторов (индикаторный электрод; фоновый электролит; его концентрация и рН; время и потенциал электролиза; скорость развертки потенциала) на высоту аналитического сигнала (табл.1-3). В качестве фоновых электролитов были исследованы растворы аммония фосфорнокислого двузамещенного, аммония нитрата, натрия фосфорнокислого одно- и двузамещенного, калия хлорида, лития хлорида, кальция хлорида с добавлением разведенной серной, хлороводородной, винной кислот; натрия гидрокарбоната, натрия и калия гидроксидов. Исходя из полученных результатов в качестве фонового электролита был выбран раствор калия хлорида, так как на нем наблюдали четкую волну окисления карведилола, кроме того, данный раствор обеспечивал хорошую электропроводность, широкую рабочую область и необходимую площадь для обработки сигнала, был прост в приготовлении, к преимуществам также можно отнести продолжительный срок годности. Оптимальная концентрация раствора калия хлорида составила 0,01 моль/л. В более концентрированных растворах мы не наблюдали прироста от добавки при наличии большого остаточного тока, тогда как более разбавленный раствор был неустойчив во времени. рН фонового раствора должна соответствовать нейтральной (6-7), так как в кислой среде (рН до 6) сигнал карведилола искажается путем раздвоения пика, тогда как в щелочной среде (рН свыше 7) полностью исчезает. В предлагаемом способе в качестве индикаторного электрода использовали графитовый с золотым напылением. Преимуществом такого электрода является возможность получения более узких и высоких пиков, служащих аналитической характеристикой определяемого вещества, что повышает разрешающую способность метода. Карведилол легко адсорбируется на графитовой с золотым напылением рабочей поверхности, это позволяет концентрировать его на электроактивном электроде. Оптимальное время накопления составило 210 с, при этом достигалось максимальное значение величины тока растворения накопленных осадков с поверхности графитового электрода с золотым напылением и хорошая воспроизводимость для количественного определения исследуемого вещества. При времени электролиза более 210 с происходило насыщение осадка на электроде, аналитический сигнал карведилола искажался и затруднялась обработка полярограмм. При времени электролиза менее 210 с величина тока растворения не достигала максимального значения, что снижало чувствительность определения вещества (табл.1). Другим отличительным признаком являются установленные условия электрохимического накопления. Оптимальный потенциал электролиза составил -0,4 В. В прототипе диапазон потенциалов электролиза соответствует (-1,80)-(-1,75) В, который не позволяет максимально полно накапливать карведилол на индикаторном электроде. При значениях потенциала электролиза более -0,4 В величина регистрируемого анодного тока значительно уменьшается, что снижает чувствительность определения, а при значениях потенциала электролиза менее -0,4 В происходит частичное накопление осадка (табл.2). Важным для определения карведилола инверсионным вольтамперометрическим методом является выбор скорости развертки потенциала. Оптимально экспериментально установленной является 150 мВ/с. Изменение скорости развертки потенциала в сторону увеличения или уменьшения заметно понижало высоту аналитического сигнала, при этом уменьшалась и разрешающая способность метода, что затрудняло обработку полярограмм, увеличивало время анализа и не позволяло определять очень низкие концентрации карведилола (табл.3). Пример 1. Определение карведилола методом инверсионной вольтамперометрии в растворе. В кварцевый стаканчик емкостью 20 мл помещают 10 мл 0,01 моль/л раствора калия хлорида при нейтральной рН среды. При потенциале -0,4 В раствор деаэрируют азотом с содержанием кислорода менее 0,001% в течение 30 с и, не прекращая перемешивания, проводят электролиз при потенциале -0,4 В в течение 210 с. Отключают газ и фиксируют вольтамперограмму при постоянно-токовой форме развертки потенциала со скоростью 150 мВ/с. Отсутствие пиков свидетельствует о чистоте фона. Затем добавляют N капель объемом 0,01 мл стандартного раствора карведилола 0,1 мг/л, перемешивают раствор и проводят электрохимическое концентрирование вещества при потенциале -0,4 В в течение 210 с. Отключают газ и фиксируют вольтамперограмму при постоянно-токовой форме развертки потенциала со скоростью 150 мВ/с. Аналитический сигнал для указанной концентрации карведилола регистрируют в диапазоне потенциалов от 0,2 до 0,9 В. Время единичного анализа не превышает 10 мин. Установленные условия впервые позволили количественно определить карведилол путем регистрации вольтамперных кривых при потенциале -0,4 В на фоне 0,01 моль/л раствора калия хлорида. Нижняя граница определяемых концентраций карведилола составляет 10-1 мг/л. Относительная погрешность отдельной варианты ( Экспериментально установленные условия определения карведилола методом инверсионной вольтамперометрии позволяют с высокой чувствительностью и экспрессностью определить указанное соединение в водной среде, а также позволяют разработать методику определения содержания микроколичеств карведилола в плазме и сыворотке крови.
Источники информации 2. НД 42-11503-01. Карведилол. Формула изобретения
Способ определения карведилола ([({±})-1-(9Н-карбазол-4-илокси)-3-[[2-(2-метоксифенокси)этил]амино]пропан-2-ол]) методом инверсионной вольтамперометрии, заключающийся в электрохимическом концентрировании вещества на поверхности электрода с последующей регистрацией вольтамперных кривых, отличающийся тем, что концентрирование проводят на графитовом электроде с золотым напылением в течение 210 с при потенциале электролиза (- 0,4) В на фоне 0,01 моль/л раствора калия хлорида при нейтральной рН среды, с последующей регистрацией вольтамперных кривых при постоянно-токовой форме развертки потенциала со скоростью 150 мВ/с, а концентрацию карведилола определяют по высоте пика в диапазоне потенциалов 0,2-0,9 В относительно хлорсеребряного электрода.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
-адреноблокаторов. Через исследуемый раствор пропускают азот с содержанием кислорода менее 0,001% и, не прекращая перемешивания, проводят электролиз раствора при потенциале -0,4 В в течение 210 с. В качестве рабочего используют графитовый электрод с золотым напылением. Регистрацию поляризационных кривых проводят при постоянно-токовой форме развертки потенциала со скоростью 150 мВ/с, а концентрацию карведилола определяют по высоте пика в интервале потенциалов от 0,2 до 0,9 В относительно хлорсеребряного электрода на фоне 0,01 моль/л раствора калия хлорида при нейтральной рН среды. Технический результат заключается в увеличении чувствительности и экспрессности способа. 4 табл.
1-адренорецепторы. Оказывает выраженный сосудорасширяющий эффект. Вследствие артериолярной вазодилатации снижает постнагрузку на сердце и тормозит нейрогуморальную вазоконстрикторную активацию сосудов и сердца. Активность ренина плазмы снижается. Тормозит пролиферацию и миграцию гладкомышечных клеток, действуя на специфические митогенные рецепторы. Не оказывает выраженного влияния на липидный обмен и содержание ионов калия, натрия, магния в плазме. Побочных эффектов, требующих отмены карведилола, не наблюдается. Он проявляет выраженное улучшение класса хронической сердечной недостаточности, ослабление клинической симптоматики заболевания, снижение частоты желудочковых аритмий [3; 4; 5].
) для диапазона концентраций 995-0,00995 мг/л не превышает 1% (табл.4).
Х
, %