|
(21), (22) Заявка: 2006139185/15, 08.11.2006
(24) Дата начала отсчета срока действия патента:
08.11.2006
(46) Опубликовано: 20.04.2008
(56) Список документов, цитированных в отчете о поиске:
ГАРКАВИ Л.Х. и др. Закономерности развития качественно отличающихся общих неспецифических адаптационных реакций организма. Открытия в СССР. – М., 1975, с.56-61. SU 1293657 А1, 28.02.1987. RU 2240031 C1, 20.11.2004. ГАРКАВИ Л.Х и др. Антистрессорные реакции и активационная терапия. – М.: Имедис, 1998. РОТОВ А.В. Оценка и прогнозирование
Адрес для переписки:
143411, Московская обл., Красногорский р-н, п. Путилково, 13, кв.41, А.А.Темнову
|
(72) Автор(ы):
Онищенко Нина Андреевна (RU), Темнов Андрей Александрович (RU)
(73) Патентообладатель(и):
Темнов Андрей Александрович (RU)
|
(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ ОРГАНИЗМА К СТРЕССОРНОМУ ВОЗДЕЙСТВИЮ
(57) Реферат:
Изобретение относится к медицине, а именно к способам прогнозирования устойчивости организма человека к стрессорному воздействию. Для осуществления способа проводят забор периферической крови человека. Из нее получают лейкоцитарную суспензию, которую инкубируют с ингибитором цАМФ-фосфодиэстеразы и без ингибитора, затем производят запись кривых люминолзависимой хемилюминесцентной реакции (ХЛ) и рассчитывают индекс стимуляции (ИС) по формуле ИС=Sингибитор/Sконтроль, где Sингибитор – интенсивность ХЛ клеток в пробе с ингибитором цАМФ-фосфодиэстеразы, Sконтроль – интенсивность ХЛ в контрольной пробе без ингибитора. При этом, если ИС 0,6, то организм устойчив к действию стрессорного фактора, если ИС<0,6, то организм не устойчив к действию стрессорного фактора. Использование изобретения позволяет прогнозировать устойчивость организма к стрессорному воздействию, в частности прогнозировать вероятность развития тяжелых осложнений в послеоперационном периоде. 2 з.п. ф-лы, 4 табл., 4 ил.
(56) (продолжение):
CLASS=”b560m”адаптационных характеристик организма человека. Автореф. дисс. Д.Б.Н. Томск, 1997. ПШЕННИКОВА М.Г. Стресс: регуляторные системы и устойчивость к стрессорным повреждениям. Дизрегуляционная патология. – М.: Медицина, 2002, с.307-328.
Изобретение относится к медицине и относится к прогнозированию устойчивости организма к стрессорному воздействию.
Стресс как биологическая категория представляет собой типовую адаптационную реакцию организма на изменение гомеостаза. Эта реакция возникает при воздействии различных возмущающих факторов (стрессоров) и развивается за счет активации комплекса регуляторных систем, объединяемых в понятия – стресс-реализующие и стресс-лимитирующие системы. Стрессовая реакция, как известно, имеет стадии развития, возникновение которых не зависит от природы стрессора, но зависит от суммарной дозы его биологической активности (т.е. интенсивности и длительности воздействия), а также от устойчивости организма к действию возмущающих факторов.
Развитие стресс-реакции начинается со стадии «срочной» (аварийной) адаптации, которая переходит в стадию устойчивой «долговременной адаптации», если суммарная доза биологической активности стрессора оказывается умеренной силы (Ф.З.Меерсон 1981; М.Г.Пшенникова 2002). При чрезмерно высокой дозе активности стрессора и низкой устойчивости, т.е. предрасположенности к нему организма – адаптация не развивается, а возникают характерные стрессорные повреждения в органах, которые приводят к развитию болезни (болезни адаптации) или гибели организма.
По современным представлениям предрасположенность и устойчивость к стрессорным повреждениям обусловлены как генетическими (врожденными), так и фенотипическими (приобретенными) особенностями функционирования стресс-лимитирующих систем. Установлено (М.Г.Пшенникова 2002), что более высокая устойчивость организма к стрессорным повреждениям наблюдается при исходно более высокой базальной активности стресс-лимитирующих систем, а более низкая устойчивость имеет место при исходно более низкой базальной активности этих систем.
При повторных или длительных воздействиях стрессоров исходно высокая активность стресс-лимитирующих систем истощается, вследствие чего создаются условия для реализации повреждающего эффекта стресса; в то же время исходно более низкая активность стресс-лимитирующих систем повышается в процессе адаптации и нивелирует негативные эффекты стресс реакции (Ф.З.Меерсон 1981, 1993; Ф.З.Меерсон, М.Г.Пшенникова 1988, М.Г.Пшенникова и др. 1999, Meezson 1991).
Вышеизложенные системные представления о механизмах развития стрессорного повреждения дают основания полагать, что у больных с длительными хроническими заболеваниями (хронический стресс), у которых компенсация клинического состояния достигается за счет высокой активности стресс-лимитирующих систем, радикальные методы лечения (хирургическая операция, радиационное облучение, химиотерапия и др.), будучи дополнительными стрессорными факторами, могут резко снизить резервы устойчивости организма и усугубить тяжесть клинического состояния больных. Именно среди таких больных в послеоперационном периоде высока смертность, а также достоверно более высокая частота развития таких тяжелых осложнений как полиорганная недостаточность, сепсис и др.
Из-за опасности усугубления клинического состояния больных при назначении радикальных методов лечения актуальной проблемой становится объективная оценка исходных адаптационных резервов организма больных и контролируемое повышение их во избежание развития осложнений.
Еще из работ Г.Селье известно, что стрессорное повреждение всегда сопровождается инволюцией лимфоидных органов, снижением количества и функции Т- и В-лимфоцитов, а также ингибированием активности фагоцитирующих клеток крови – гранулоцитов, моноцитов и тканевых макрофагов (Гаркави и др., 2001). В костном мозге как центральном органе иммуногенеза при стрессорном повреждении, наряду с активацией апоптоза, происходит ингибирование пролиферации стволовых и прогениторных клеток.
На основании вышеизложенного ближайшим аналогом предложенного способа мы считаем открытие Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Уколова М.А. “Закономерности развития качественно отличающихся общих неспецифических адаптационных реакций организма”. Диплом на открытие N 158 Комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий. Открытия в СССР, М., 1975, с.56-61, где на основе фазового характера изменений состава крови авторы открыли периодичную зависимость неспецифических реакций активации, тренировки, стресса и состояния ареактивности (“коэффициент реакции”), поддерживающих гомеостаз, от интенсивности (силы, дозы) действующего фактора. Для указанных реакций описаны изменения, происходящие в различных системах организма (“системный ответ”).
Однако дать количественную оценку прогноза устойчивости организма на действие повреждающего стрессорного фактора авторам открытия не удалось.
В то же время обзор литературы показывает, что иммунокомпетентные клетки крови и костного мозга, как и большинство других клеток организма, для поддержания своей жизнедеятельности активно потребляют кислород в процессе фагоцитоза, а также митохондриального и микросомального окисления. Именно поэтому при стрессе мононуклеарные клетки становятся активными участниками окислительного или метаболического взрыва, при котором наряду с интенсификацией окисления глюкозы в гексозомонофосфатном шунте происходит избыточное образование активных форм кислорода (АФК) (А.Н.Гребенюк и др., 1998), которые и запускают адаптационный процесс на клеточном уровне (В.Х.Хавинсон и др. 2003).
Таким образом, сведения о мононуклеарных клетках, изложенные выше, указывали, на пригодность использования их у людей для прогнозирования устойчивости их организма к стрессорному воздействию.
Пригодность мононуклеарных клеток крови в качестве тест-системы для контроля адаптационных резервов организма может обосновываться также тем фактом, что активация иммунокомпетентных клеток индуцирует сложный каскад ферментативных реакций, включающей активацию аденилатциклазы (Ю.А.Владимиров и др. 1992), с участием которой осуществляется синтез ц-АМФ, избыточное накопление которого ингибирует активность клеток: реакцию фагоцитоза в нейтрофилах и гуморальный ответы Т- и В-лимфоцитов на чужеродные антигены.
Эти наблюдения позволили нам предположить, что ц-АМФ, накапливающийся в мононуклеарных клетках пациентов с высоким резервом устойчивости к стрессорному повреждению, будет стимулировать развитие адаптивной реакции, сопровождающейся окислительным стрессом с избыточной продукцией АФК. Накопление ц-АМФ в мононуклеарных клетках больных с низким резервом устойчивости к стрессорному повреждению будет стимулировать стрессорное повреждение и ингибировать продукцию АФК.
Учитывая это, нами предложена простая и достаточно эффективная методика прогнозирования устойчивости организма на стрессорное воздействие путем определения продукции АФК иммунокомпетентными клетками при избыточном накоплении в них ц-АМФ за счет ингибирования фермента фосфодиэстеразы, осуществляющей гидролиз ц-АМФ, с помощью солей акридонуксусной кислоты: натриевая соль – препараты «НЕОВИР» и «КАМЕДОН», а также N-метилглюкаминовая соль – препарат «ЦИКЛОФЕРОН» (низкомолекулярный индуктор интерферона – N-метилглюкаминовая соль карбоксиметилакридона), ООО «НТФФ Полисан» (Санкт-Петербург).
Способ включает в себя следующие этапы.
1. Проводят забор периферической крови человека любым известным способом, после чего осуществляют получение лейкоцитарной суспензии. Для этого 2 мл гепаринизированной крови смешивали с 1 мл подогретого до 37°С 3% раствора желатина и инкубировали в термостате при 37°С в течение 30 мин. После оседания эритроцитов слой плазмы, обогащенный лейкоцитами, отбирали в пластиковые пробирки и отмывали 10-кратным объемом фосфатно-солевого буфера (рН 7,4). Затем лейкоциты центрифугированием в течение 10 мин при 1000 об/мин ресуспендировали в растворе Хенкса без Са2+ и Mg2+. После подсчета числа лейкоцитов концентрацию клеток доводили до 106 кл/мл.
2. Хемилюминесцентный анализ динамики накопления активных форм кислорода (АФК). Для определения индекса стимуляции в две кюветы – контрольную и опытную вносили по 40·103 клеток. В опытную кювету дополнительно вносили 5 мкл/мл ингибитора цАМФ-фосфодиэстеразы – соль акридонуксусной кислоты, например препарат «Циклоферон» (12,5% раствор), являющийся индуктором интерферона, содержащий ингибитор цАМФ-фосфодиэстеразы производную акридонуксусной кислоты (10-карбоксиметил-9-акриданон) и N-метилглюкамин. В контрольную кювету вносили 5 мкл раствора Хэнкса. Контрольную и опытную кюветы инкубировали в термостате в течение 60 мин при 37°С. После инкубации лейкоцитарной взвеси проводили запись кривых хемилюминесцентной реакции (ХЛР) в течение 15 минут с использованием хемилюминометра «Хелюм-2001 01/01» (Россия) в комплексе с компьютером IBM-PC при температуре счетной камеры 37°С. В качестве усилителя свечения использовали люминол (5-амино-2,3-дигидро-1,4-фталазиндион, «Sigma») в конечной концентрации 10-3М, а в качестве активатора образования активных форм кислорода (АФК) – РМА (форбол-12-миристат-13-ацетат, «Sigma») в концентрации 10-6М.
Суммарную продукцию активных форм кислорода (АФК) вычисляли как площадь под кривой ХЛ (фиг.1).
Рассчитывался индекс стимуляции (ИС), как отношение площади под кривой ХЛ с ингибитором цАМФ-фосфодиэстеразы, в качестве которого выступает соль акридонуксусной кислоты, (Sингибитор) к площади под кривой ХЛ клеток без добавления препарата (Sконтроль).
ИС=Sингибитор/Sконтроль,
где Sингибитор – интенсивность ХЛ клеток в пробе с ингибитором цАМФ-фосфодиэстеразы, Sконтроль – интенсивность ХЛ в контрольной пробе.
При этом, если ИС 0,6, то организм устойчив к действию стрессорного фактора, если ИС<0,6, то организм не устойчив к действию стрессорного фактора.
Примеры реализации заявленного изобретения
В работе было проанализирована функциональная активность клеток иммунной системы у 300 человек, находящихся на лечении в НИИТиИО с 2001 по 2006 гг. Также в исследование было включено 25 человек с хроническими рецидивирующими вирусными инфекциями ЛОР-органов, 10 человек с онкологическими процессами. В качестве контроля были проанализированы данные от 70 клинически здоровых человек, взятых в качестве доноров.
Статистическая обработка материала проводилась с помощью пакета прикладных программ обработки данных «Statistica 6.0.» (Statsoft, США, 2002). Достоверность различий между экспериментальными группами по изучаемым параметрам оценивалась с помощью t-критерия Стьюдента для нормально распределенных количественных признаков с равными выборочными дисперсиями. Критическим уровнем статистической значимости при проверке статистических гипотез считали p 0,05 [Реброва О.Ю, 2003].
Забор и исследования крови больных осуществляли при поступлении (перед хирургическим лечением), а также 1,5-2 месяца после проводимого лечения. У кардиохирургических больных, кроме того, исследования проводили на 1-7 сутки после операции; на 7-30 сутки после операционного периода выделяли также группу больных с инфекционными осложнениями и органными дисфункциями (n=14) и группу больных с развитием критического состояния, приведшего к летальному исходу (n=10).
Для подтверждения связи тяжести нарушения характеристик кривых ХЛР с уровнем адаптационных резервов организма нами проводилась количественная оценка иммунного статуса больных.
Состояние иммунной системы больных оценивали с использованием стандартных тестов, рекомендованных ВОЗ, в соответствии с разработанной схемой иммунологического обследования, адекватной для диагностики типа и степени вторичной иммунной недостаточности.
Клеточное звено иммунитета оценивали по количественному содержанию лейкоцитов, относительному (%) и абсолютному (в 1 мкл) содержанию лимфоцитов, Т-лимфоцитов (СD3+-клетки), их иммунорегуляторных субпопуляций Т-хелперов (CD4+-клетки) и цитотоксических Т-лимфоцитов (СD8+-клетки) и иммунорегуляторному индексу (ИРИ=CD4+/CD8+), а также относительному содержанию натуральных киллеров (СD16+/56+-клетки) с использованием комбинации моноклональных антител (МКАТ), меченных FITC и фикоэритрином (РЕ) (НПЦ «МедБиоСпектр» и «Сорбент»).
Функциональная активность клеточного звена иммунитета оценивалась по количеству Т-лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности рецептор к интерлейкину-2 (СD25+-клетки) и антигены II класса гистосовместимости HLA-DR (HLA-DR+-клетки), а также числу пролиферирующих клеток (CD71+-клетки). Иммунофенотипирование проводили на проточном цитофлюориметре FACScan фирмы Becton Dickinson (США) [Пинегин Б.В., Ярилин В.А., 2001].
Гуморальное звено иммунитета включало комплексную оценку относительного и абсолютного содержания В-лимфоцитов (CD20+-клетки) иммунофлюоресцентным методом, концентрации иммуноглобулинов классов G, А, М в сыворотке крови методом радиальной иммунодиффузии в геле [Manchini et al., 1965], а также определение уровня низкомолекулярных (осаждение 6% ПЭГ) циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) [Новиков Д.К., 1996].
Фагоцитарную активность нейтрофилов крови определяли стандартным методом с использованием убитой взвеси Staph. Aureus [Фрейдлин И.С., 1986], подсчитывая число фагоцитирующих клеток на 100 нейтрофилов (фагоцитарный индекс, %), количество микробных тел, поглощенных в среднем одним нейтрофилом (фагоцитарное число).
Проведенное исследование показало, что хемилюминесцентная реакция клеток крови на инкубацию с индуктором интерферона (ИИ) «Циклофероном», а также «Неовиром» и «Камедоном» у доноров и больных с тяжелыми хроническими заболеваниями сердца имеет диаметрально выраженные количественные и качественные различия
Добавление к клеткам ИИ у здоровых доноров повышало продукцию АФК (фиг.2), тогда как у больных с тяжелой хронической патологией наоборот снижало ее по сравнению с контролем (фиг.3, 4). Мы отметили также, что нарастание тяжести клинического состояния больных приводило к практически к полному ингибированию продукции АФК при добавлении ИИ (фиг.3).
Количественная оценка ИС и кинетические характеристики ХЛР у здоровых доноров и хронических кардиологических больных при поступлении и на различных этапах хирургического лечения представлены в табл.1.
Из таблицы видно, что у здоровых доноров значение ИС колеблются от 2,2 до 2,8 и в среднем составляет 2,5±0,31. У больных в предоперационном периоде ИС в среднем составлял 0,73. Сразу после операции (операционный стресс) эти показатели еще более резко отклонялись от значений нормы у здоровых доноров, однако в стадии реконвалесценции (через 1,5-2 месяца после операции) они вновь начинали восстанавливаться, свидетельствуя о повышении адаптационных резервов организма больных. Т.к. в стадии реконвалесценции нами наблюдалось не 250, а 226 больных: у 14 больных развились тяжелые иммунозависимые осложнения, а у 10 хирургическое лечение закончилось летальным исходом, то предстояло ответить на вопрос: возможно ли по показателям ХЛР в предоперационном периоде прогнозировать развитие опасных для жизни осложнений. Разбив всех оперированных больных по группам в зависимости от исходного значения ИС, мы отметили (табл.2), что при ИС 0,6 процесс выздоровления больных шел быстрее и опасность развития осложнений (инфекционно-септические, органные дисфункции) была достоверно ниже, чем у больных с исходным значением ИС<0,6.
У больных с летальным исходом цифровые значения ИС имели тенденцию к еще более резкому снижению (все меньше 0,6). На фиг.4 представлена связь ИС с частотой развития осложнений в п/о периоде. Для восстановления адаптационных резервов организма больных в п/о периоде и повышения эффективности лечения инфекционных осложнений, а также органических дисфункций нами дополнительно проводилась иммунокоррегирующая терапия. Эффективность терапии контролировали по динамике изменения показателей ХЛР, иммунограммы, а также клинического состояния больных.
Из табл.3 видно, что иммунокоррекция способствовала повышению адаптационных резервов организма и резервов его устойчивости к стрессорным повреждениям, т.к. наступала коррекция клеточного и гуморального звена иммунитета (количество и функции Т- и В-лимфоцитов, фагоцитарная активность нейтрофилов), а также нормализация показателей ХЛР, в том числе ИС.
Мы установили также, что между значениями ИС и количеством лимфоцитов, а также значениями ИС и фагоцитарным индексом существует прочная и прямая корреляционная связь (R=0,9), которая наряду с позитивной динамикой клинического состояния больных подтверждает тот факт, что значение ИС отражают адаптационные резервы организма и могут служить мерой его устойчивости к стрессу.
Таким образом, представленные результаты показывают следующее.
1. Значение ИС больных отражают адаптационные резервы организма и могут служить мерой его устойчивости к стрессу.
2. У больных с тяжелыми хроническими заболеваниями ИС имеет значение меньше 0,6. При значениях ИС меньше 0,6 и необходимости выполнения хирургической операции возникает опасность развития тяжелых осложнений в п/о периоде – в виде инфекционных-септических осложнений и органных дисфункций, вплоть до полиорганной недостаточности.
Таблица 1. |
Показатели хемилюминесцентной реакции лейкоцитарной суспензии у кардиохирургических больных в послеоперационном периоде. |
Показатель хемилюминесцентной реакции |
Здоровые доноры (n=70) |
Кардиохирургические больные |
Больные при поступлении в стадии реконвалесценции (n=250) |
Больные после операции (1-7 суток) (n=250) |
Больные с осложнениями (n=14) |
Больные с летальным исходом (n=10) |
Индекс стимуляции |
2,50±0,31 |
0,73±0,23* |
0,22±0,10* |
0,10±0,05* |
0,01±0,03* |
Интенсивность хемилюминесценции, S (103/у.e.) |
352,1±55,2 |
305,1±33,5 |
200,1±33,2 |
167,1±41,2* |
65,9±25,1* |
Скорость образования АФК, V (у.e.) |
3,73±0,08 |
3,24±0,08* |
2,85±0,03* |
1,42±0,03* |
1,11±0,01* |
Лаг-период, Т (с) |
12,5±1,8 |
14,2±1,7 |
15,2±3,0 |
25,2±4,2* |
38,5±3,6* |
* – достоверное различие по сравнению с группой здоровых доноров крови (p<0,05) |
Таблица 2. |
Показатели хемилюминесцентной реакции лейкоцитарной суспензии у кардиохирургических больных в послеоперационном периоде. |
Показатель хемилюминесцентной реакции |
Здоровые доноры (n=70) |
Кардиохирургические больные |
Больные при поступлении в стадии реконвалесценции (n=250) |
Больные с ИС 0.6 (n=70) |
Больные с ИС<0.6 (n=180) |
Индекс стимуляции после операции |
|
|
0,4±0,10* |
0,08±0,05* |
Интенсивность хемилюминесценции, S (103/у.е.) |
352,1±55,2 |
305,1±33,5 |
240,1±31,1 |
150,1±31,2* |
Скорость образования АФК, V (у.е.) |
3,73±0,08 |
3,24±0,08* |
3,00±0,02* |
1,22±0,03* |
Лаг-период, Т (с) |
12,5±1,8 |
14,2±1,7 |
14,2±2,0 |
28,2±°1,2* |
Инфекционные осложнения (%) |
|
|
2 |
13* |
ПОН (%) |
|
|
0 |
5 |
* – достоверное различие по сравнению с группой здоровых доноров крови (p<0,05) |
Таблица 3. Динамика показателей иммунограммы кардиохирургических больных с осложненным послеоперационным периодом при проведении иммунокоррекции. |
Показатель |
Здоровые доноры крови (n=25) |
Кардиохирургические больные |
До Иммунокоррекции (n=14) |
После иммунокоррекции (n=14) |
Интенсивность ХЛ, S, 103/у.е. |
352,1±55,2 |
167,1±41,2 |
308,8±22,2* |
Скорость реакции, V (у.е.) |
3,73±0,08 |
1,42±0,03 |
2,77±0,05* |
Лаг-период, Т (с) |
12,5±1,8 |
25,2±4,2 |
16,6±2,5* |
Индекс стимуляции |
2,50±0,31 |
0,10±0,05 |
0,5±0,04* |
Лимфоциты, % |
32,5±4,8 |
17,4±2,6 |
30,4±3,3* |
Т-лимфоциты (CD3+), % |
67,5±4,6 |
46,5±8,8 |
59,2±4,3* |
Т-хелперы (CD4+), % |
43,9±3,7 |
31,8±4,4 |
40,4±3,1* |
Т-цитотоксические (CD8+), % |
28,1±3,6 |
15,0±2,2 |
20,7±2,5* |
В-лимфоциты (CD20+), % |
10,1±1,5 |
5,2±2,0 |
6,9±1.9 |
NK-клетки (СD16+), % |
13,9±1,6 |
5,6±1,1 |
9,0±1,5* |
HLA-DR |
11,5±3,5 |
22,1±2,2 |
16,4±3,2* |
IL2-R+-кл. (CD25+) |
3,2±1,6 |
8,8±2,4 |
4,4±2,0* |
CD71+ |
3,0±0,5 |
17,2±3,1 |
14,4±2,2 |
IgG, г/л |
13,0±0,9 |
11,1±1,4 |
13,3±1,1 |
IgA, г/л |
2,5±0,4 |
1,3±0,2 |
1,9±0,2* |
IgM, г/л |
1,5±0,2 |
1,0±0,3 |
13±0,4 |
ЦИК, у.е. |
153,0±40,1 |
660,2±45,1 |
335,5±45,1* |
Фагоцитарный индекс, % |
75,5±3,5 |
40,5±5,5 |
55,4±4,4* |
Фагоцитарное число, у.е. |
5,5±1,7 |
2,4±0,6 |
4,1±1,1* |
* – достоверное различие по сравнению с исходным уровнем (p<0,05); |
Таблица 4. Динамика показателей фагоцитарной функции нейтрофилов у больных при проведении иммунокоррекции на основе индивидуального подбора иммуномодуляторов. |
Показатель |
Контрольная группа (n=25) |
До иммунокоррекции |
После иммунокоррекции |
Группа сравнения (n=23) |
Основная группа (n=23) |
Группа сравнения (n=23) |
Основная группа (n=23) |
Фагоцитарный индекс, % |
75,5±3,5 |
51,7±2,9x |
52,7±2,8x |
57,3±3,5 |
65,6±4,2 * |
Фагоцитарное число, у.е. |
5,5±1,7 |
3,5±0,3 |
3,1±0,2x |
4,0±0,1 * |
5,0±0,8 *+ |
x – достоверное различие с группой контроля (p<0,05); |
* – достоверное различие по сравнению с исходным уровнем (p<0,05) |
+ – достоверное различие с группой сравнения (p<0,05) |
, – повышение/снижение показателя по сравнению с исходным уровнем |
Список литературы
1. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. М.: Наука, 1981, с.278.
2. Пшенникова М.Г. Стресс: регуляторные системы и устойчивость к стрессорным повреждениям. В книге «Дизрегуляционная патология» под ред. Академика РАМН Г.Н.Крыжановского М.: Медицина, 2002, стр.307-328.
3. Меерсон Ф.З. Адаптационная медицина: механизмы и защитные эффекты адаптации. М. Hypoxia Medical LTD, 1993, с.331.
4. Меерсон Ф.З., Пшенникова М.Г. Адаптация к стрессорным ситуациям и физическим нагрузкам. М.: Медицина, 1988, с.256.
5. Пшенникова М.Г., Бондаренко Н.А., Шимкович М.В. и др. Экспер. Биологии и медицины, 1999, т.128, №12, с.638-641.
6. Хавинсон В.Х., Баринов В.А., Арутюнян А.В., Малинин В.В. Свободнорадикальное окисление и старение. Санкт-Петербург, Наука, 2003, с.325.
7. Meerson F.Z. Adaptive protection of the heart: protecting against stress and ischemic damage. Boca Raton CRC Press, 1991, p.340.
Формула изобретения
1. Способ прогнозирования устойчивости организма человека к стрессорному воздействию, включающий забор его периферической крови, отличающийся тем, что из периферической крови человека получают лейкоцитарную суспензию, суспензию клеток инкубируют с ингибитором цАМФ-фосфодиэстеразы и без ингибитора, затем производят запись кривых люминолзависимой хемилюминесцентной реакции (ХЛ) и рассчитывают индекс стимуляции (ИС) по формуле:
ИС=Sингибитор/Sконтроль,
где Sингибитор – интенсивность ХЛ клеток в пробе с ингибитором цАМФ-фосфодиэстеразы,
Sконтроль – интенсивность ХЛ в контрольной пробе без ингибитора, при этом, если ИС 0,6, то организм устойчив к действию стрессорного фактора, если ИС<0,6, то организм неустойчив к действию стрессорного фактора.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве ингибитора цАМФ-фосфодиэстеразы используют препараты, содержащие соль акридонуксусной кислоты.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что в качестве препарата, содержащего соль акридонуксусной кислоты используют «Циклоферон», и/или «Камедон», и/или «Неовир»
РИСУНКИ
|
|