Патент на изобретение №2160260
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) ПРОИЗВОДНОЕ 4-ОКСО-1,4-ДИГИДРОПИРИМИДИНА, ОБЛАДАЮЩЕЕ ИММУНОДЕПРЕССИВНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
(57) Реферат: Изобретение относится к новому производному 4-оксо-1,4-дигидропиримидина, а конкретно: 2,6-диэтил-5-фенил-1(5,6-диметилбензилимидазолил-1)-4-оксо-1,4-дигидропиримидину (I), обладающему иммунодепрессивной активностью, который может найти применение в медицине. Данное производное получают конденсацией соответствующего производного 2-фенилацетпропионамида с аминопроизводным бензимидазола в среде ледяной уксусной кислоты в присутствии ДМФА. Соединение (I) оказывает иммунодепрессивное действие на организм животных, угнетая как клеточную, так и гуморальную форму первичного ответа. 2 табл. 
Наиболее близким по структуре к заявляемому соединению являются: 2,6-диметил-5-фенил-1-(5,6-диметилбензимидазолил-1-)-4-оксо-1,4- дигидропиримидин и 2,6-диэтил-5-фенил-1-(2-метилбензимидазолил-1)- 4-оксо-1,4-дигидропиримидин, обладающее иммуностимулирующей активностью [Патент N2037491.]. Целью данного изобретения является получение нового производного 4-оксо-1,4-дигидропиримидина, обладающего более выраженной иммунодепрессивной активностью по сравнению с известными веществами. Заявляемый объект – производное пиримидина 4-оксо-1,4-дигидропиримидина – и его биологические свойства в доступной нам литературе не описаны. Это новое вещество относится к производным пиримидина, содержащим гетероциклический заместитель и обладающим иммунотропным действием. Поставленная цель достигается в результате синтеза соединения следующей структуры:  обладающий иммунодепрессивной активностью Описанное соединение получается кипячением N-пропионил-2- фенилацетопропионамида с 1-амино-5,6-диметилбензимидазолом в ледяной уксусной кислоте по схеме:   Пример. Получение 2,6-диэтил-5-фенил-1 -(5,6- диметилбензимидазолил-1)-оксо-1,4-дигидропиримидина. В смеси из 2 мл ледяной уксусной кислоты и 2 мл ДМФА растворяют 2,47 г (0,01 моль) N-пропионил-2-фенилацетопропионамид и 1,61 г (0,01 моль) 1- амино-5,6-диметилбензимидазола. Реакционную смесь кипят 1 час, затем охлаждают и выливают в 100 мл эфира. Выделившийся осадок отфильтровывают и промывают бензолом. Выход 49% (1,99г). Тпл =149-150oC (из этанола). Найдено,%: C 74,23; H 6,61; N 15,56; О 3,60. Вычислено %: С 74,21; H 6,53; N 15,64; О 3,62. ИК-спектр, см-1: 1705, 1653, 1570, 1535 (вазелиновое масло). Уф-спектр  max : 207 нм; 252 им; 278 нм (С 1 105 моль/л в этаноле).
Исследование иммунотропного действия производного 4-оксо-1,4- дигидропиримидина проводили на модели реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), которая является одним из наиболее часто применяемых методов для оценки клеточного иммунитета [Иммунологические методы /Под ред. Фримеля Г.М. , Медицина, 1987, с. 346 и с. 64.]. 45 мышам обоего пола линии СВА весом 18-20 г иммунизировали внутрибрюшинно эритроцитами барана (ЭБ) в количестве 2109 кл/мл. Все животные были разделены на 3 группы по 25 мышей: 1 гр. – контроль; 2 гр – препарат сравнения – метилурацил; 3 гр. – опыт, т.е. исследуемое новое вещество (I). В каждой группе было проведено 5 серий исследований, в которых использовалось по 5 мышей на серию. Для определения реакции ГЗТ через 4 дня вводили разрешающую дозу суспензии ЭБ в количестве 0,01 мл подкожно в правую заднюю лапку, а в другую – контрольную – такое же количество стерильного физиологического раствора. Выраженность реакции ГЗТ к ЭБ оценивали по степени отека опытной лапки по сравнению с контрольной путем измерения массы лап и высчитывали индекс реакции (ИР) в процентах где – Pо – масса опытной лапки; Pк – масса контрольной лапки, Введение исследуемого вещества вызывает сдвиг индекса. Исследуемые вещества вводили однократно в дозе 25 мг/кг массы мышей в 1% крахмальной взвеси в желудок с помощью специального зонда за 2 суток до антигенной нагрузки. В качестве объекта сравнения использовали официнальный препарат метилурацил, обладающий иммунотропной активностью. Метилурацил вводили в той же дозе и по той же схеме, что и исследуемое вещество. Контрольные животные получали 1% крахмальную взвесь в соответствующем количестве и иммунизировались по той же схеме, что и опытные животные. Результаты опытов статистически обработаны и представлены в таблице 1. Влияние вещества (I) на гуморальный иммунный ответ оценивали по количеству антителообразующих клеток (АОК) в селезенке мышей методом безагарового локального гемолиза в монослое эритроцитов [М.Д. Машковский. Лекарственные средства. – М.: Медицина, 1971, стр. 157.] Эксперименты проведены на 75 мышах линии СВА обоего пола массой 20-22 г. Все животные были разделены на 3 группы по 25 мышей: 1 гр. – контроль; 2 гр – препарат сравнения – метилурацил; 3 гр. – опыт, т.е. исследуемое новое вещество (I). В каждой группе было проведено 5 серий исследований, в которых использовалось по 5 мышей на серию. Животных иммунизировали ЭБ внутрибрюшинно (2 109 кл/мл). Число АОК в селезенке мышей определяли на пятые сутки после иммунизации и пересчитывали на 106 спленоцитов. За 2 суток до иммунизации мышам в желудок с помощью зонда вводили исследуемое вещество (I) (3-я группа) и метилурацил (2-я группа) в дозах 25 мг/кг массы в 1% крахмальной взвеси. Контрольных животных (1-я группа) иммунизировали по той же схеме, что и опытных животных, вводили им 1% крахмальную взвесь в соответствующем количестве. Результаты эксперимента обработаны статистически и приведены в таблице 2.
Определение острой токсичности и расчет LD50 осуществляли по методу Кербера и установили, что для соединения (I) LD50 составляет 1500 мг/кг массы тела животных. Таким образом, исследуемое соединение (I) обладает малой токсичностью.
Результаты проведенных исследований показывают, что изучаемое соединение оказывает влияние как на клеточный, так и на гуморальный иммунитет.
Таким образом, соединение (I) угнетает клеточный иммунитет, тестируемый в реакции ГЗТ к эритроцитам барана, на 24,6% по сравнению с контролем.
Значительное угнетение гуморального иммунитета проявлялось в уменьшении количества АОК в селезенке мышей. Соединение (I) по своей активности угнетало антителогенез на 30,9% по сравнению с контролем.
Список литературы
4. Прогноз биологической активности и синтез новых N- гетерилпроизводных 4-оксо-1,4-дигидропириидина. Пятигорск. – 1995. – С. 22. – Деп. в ВИНИТИ N 2796 – В-9523.10.95.
5. Патент N 2037491.
6. Иммунологические методы /Под ред. Фримеля Г.М., Медицина, 1987, с. 346 и с. 64.
7. М. Д. Машковский. Лекарственные средства. -М.: Медицина, 1971, стр. 157.
Формула изобретения
 проявляющее иммунодепрессивную активность. РИСУНКИ
MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 02.07.2001
Номер и год публикации бюллетеня: 35-2002
Извещение опубликовано: 20.12.2002
|
||||||||||||||||||||||||||
