Патент на изобретение №2321594
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) ВЫДЕЛЕННЫЙ ПОЛИПЕПТИД, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ (ВАРИАНТЫ), КОДИРУЮЩИЙ ЕГО ПОЛИНУКЛЕОТИД (ВАРИАНТЫ), ЭКСПРЕССИРУЮЩИЙ ВЕКТОР, РЕКОМБИНАНТНАЯ КЛЕТКА-ХОЗЯИН, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИПЕПТИДА, АНТИТЕЛО, СПЕЦИФИЧНОЕ К ПОЛИПЕПТИДУ, И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ПОЛИПЕПТИД
(57) Реферат:
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению цитокинов класса II, и может быть использовано в медицине. Полученные белки zcyto20, zcyto21, zcyto22, zcyto24 и zcyto25 являются наиболее близкородственными с интерфероном-
Текст описания приведен в факсимильном виде.
Формула изобретения
1. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, который имеет по меньшей мере 80% идентичность относительно полипептида, выбранного из группы, состоящей из a) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:2 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205; b) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:7 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205; c) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:9 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202; и d) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:11 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202, причем каждый из четырех указанных полипептидов связывается с рецептором цитокинов класса II, zcytor 19, и кодируется полинуклеотидом, который остается гибридизованным после строгих условий промывки с полинуклеотидом, состоящим из нуклеотидной последовательности нуклеотидов 64-618 SEQ ID NO:1 для полипептида по п.а) или SEQ ID NO:6 для полипептида по п.b), или комплементом нуклеотидной последовательности указанных нуклеотидов. 2. Выделенный полипептид по п.1, где указанный полипептид специфически связывает рецептор, показанный в SEQ ID NO:24, 27 или 29 в виде мономерного или гомодимерного рецептора. 3. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, который имеет по меньшей мере 95% идентичность относительно полипептида, выбранного из группы, состоящей из a) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:2 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205; b) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:7 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205; c) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:9 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202; и d) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:11 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202, причем каждый из четырех указанных полипептидов связывается с рецептором цитокинов класса II, zcytor 19. 4. Выделенный полипептид по п.3, где указанный полипептид специфически связывает рецептор, показанный в SEQ ID NO:24, 27 или 29 в виде мономерного или гомодимерного рецептора. 5. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, имеющий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:2 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205. 6. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, имеющий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:7 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка. 205. 7. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, имеющий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:9 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202. 8. Выделенный полипептид, обладающий антивирусной активностью, имеющий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 11 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202. 9. Фармацевтическая композиция, обладающая антивирусной активностью, которая содержит эффективное количество полипептида с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO:2 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205, в фармацевтически приемлемом носителе. 10. Фармацевтическая композиция, обладающая антивирусной активностью, которая содержит эффективное количество полипептида с аминокислотной последовательностью, показанной в SEQ ID NO:7 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205, в фармацевтически приемлемом носителе. 11. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, обладающий антивирусной активностью, где эта молекула нуклеиновой кислоты выбрана из группы, состоящей из a) полинуклеотида, имеющего нуклеотидную последовательность SEQ ID NO:3, b) полинуклеотида, который остается гибридизованным после строгих условий промывки с полинуклеотидом, состоящим из нуклеотидной последовательности нуклеотидов 64-618 SEQ ID NO:1, или комплементом нуклеотидной последовательности нуклеотидов 64-618 SEQ ID NO:1. 12. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по п.6, обладающий антивирусной активностью, представляющий собой полинуклеотид, который остается гибридизованным после строгих условий промывки с полинуклеотидом, состоящим из нуклеотидной последовательности нуклеотидов 64-618 SEQ ID NO:6, или комплементом нуклеотидной последовательности нуклеотидов 64-618 SEQ ID NO:6. 13. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, обладающий антивирусной активностью, характеризующийся нуклеотидной последовательностью, соответствующей аминокислотной последовательности полипептида, выбранного из группы, состоящей из a) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:2 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205; b) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:7 от аминокислотного остатка 22 до аминокислотного остатка 205; c) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:9 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202; и d) полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO:11 от аминокислотного остатка 29 до аминокислотного остатка 202. 14. Выделенный полинуклеотид по п.13, где любое различие между аминокислотной последовательностью, кодируемой этой молекулой нуклеиновой кислоты, и соответствующей аминокислотной последовательностью обусловлено консервативной заменой аминокислоты. 15. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по п.5, обладающий антивирусной активностью, имеющий нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO:1 от нуклеотида 64 до нуклеотида 618. 16. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по п.6, обладающий антивирусной активностью, имеющий нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO:6 от нуклеотида 64 до нуклеотида 618. 17. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по п.7, обладающий антивирусной активностью, имеющий нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO:8 от нуклеотида 67 до нуклеотида 606. 18. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид по п.8, обладающий антивирусной активностью, имеющий нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO:10 от нуклеотида 67 до нуклеотида 606. 19. Экспрессирующий вектор, имеющий выделенную молекулу нуклеиновой кислоты по п.15, или 16, или 17, или 18, промотор транскрипции и терминатор транскрипции, где промотор функционально связан с этой молекулой нуклеиновой кислоты и где эта молекула нуклеиновой кислоты функционально связана с терминатором транскрипции. 20. Рекомбинантная клетка-хозяин для экспрессии полипептида по пп.5-7 или 8, обладающего антивирусной активностью, содержащая экспрессирующий вектор по п.19, где эта клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из бактерии, клетки дрожжей, клетки гриба, клетки насекомого, клетки млекопитающего и клетки растения. 21. Способ получения полипептида с антивирусной активностью по пп.5-7 или 8, предусматривающий стадию культивирования рекомбинантных клеток-хозяев, содержащих экспрессирующий вектор по п.19 и продуцирующих этот полипептид, и выделения этого полипептида из культивируемых клеток-хозяев. 22. Антитело, которое специфически связывается с полипептидом с антивирусной активностью, полученное с помощью полипептида по п.1, или его F(ab)2, Fab или его одноцепочечный фрагмент, сохраняющий специфическую функцию антитела. 23. Антитело по п.22, в котором антитело выбирается из группы поликлонального антитела, моноклонального антитела, сходного с антителом человека, антитела, полученного из моноклонального антитела мыши, нейтрализующего антитела, и моноклонального антитела человека. 24. Фрагмент антитела по п.22, в котором фрагмент антитела выбирается из группы F(ab)2, Fab и антитела с одной цепью. Приоритет по пунктам и признакам: 20.04.2001 по пп.1, 3, 5, 9, 11, 13-15, 19-24 (в части SEQ ID NO:1 и 2). 25.04.2001 по пп.1, 3, 6, 10, 12-14, 16, 19-24 (в части SEQ ID NO:7 и 6). 22.10.2001 по пп.1, 3, 7, 8, 13, 14, 17-24 (в части SEQ ID NO:8, 9, 10 и 11). 19.04.2002 по пп.2 и 4.
|
||||||||||||||||||||||||||
на уровне аминокислотной последовательности. Рецептор для этого семейства белков служит рецептор цитокинов класса II. Белки могут быть получены рекомбинантным путем с использованием клетки-хозяина, трансформированной экспрессирующим вектором, который содержит соответствующие белкам нуклеиновые кислоты. На основе белков zcyto20, zcyto21, zcyto22, zcyto24 и zcyto25 получают антивирусную фармацевтическую композицию и специфические антитела. Изобретение позволяет получить новый цитокин, который стимулирует клетки гемопоэтической линии дифференцировки и обладает выраженной антивирусной активностью. 19 н. и 5 з.п. ф-лы, 21 табл.
