Патент на изобретение №2320661
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) 1,4,5,6-ТЕТРАГИДРО-6-ОКСО-5-(2-ПИПЕРАЗИНОЭТИЛ)-4-ФЕНИЛ-3-(4-ХЛОРФЕНИЛ)ПИРРОЛО[3, 4-С]ПИРАЗОЛА ДИГИДРОХЛОРИД, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ГИПОТЕНЗИВНУЮ И АНТИКОАГУЛЯНТНУЮ АКТИВНОСТИ
(57) Реферат:
Изобретение относится к 1,4,5,6-тетрагидро-6-оксо-5-(2-пиперазиноэтил)-4-фенил-3-(4-хлорфенил)пирроло[3,4-с]пиразола дигидрохлориду, который может быть использован в медицине в качестве средства, снижающего артериальное давление и свертываемость крови. Его получают взаимодействием 1-(2-пиперазиноэтил)-5-фенил-4-(4-хлорбензоил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-она дигидрохлорида с гидразин гидратом. Технический результат – получение не описанного ранее соединения, обладающего одновременно гипотензивным и антикоагулянтным действием. 3 табл.
(56) (продолжение): CLASS=”b560m”синтезе гетероциклов. Саратовский государственный университет. – Саратов, 1996, с.13. Skof Marko et all, «Stereoselective 1,3-dipolar cycloadditions to (S)-1-benzoyl-3-(cyanomethylidene)-5-(methoxycarbonyl)pyrrolidine-2-one», Helv. Chim. Acta., 1998, 81, №12, 2332-2340. Gelin S. et all, «Synthesis of 4-oxo-1,4-dihydro-6H-furo[3,4-c]pyrazole and 4-oxo-1,4,5,6-tetrahydropyrrolo[3,4-c]pyrazole systems from acyl tetronic and tetramic acids», Synth. Commun. 1982, 12, №6, 431-437.
Изобретение относится к новому биологически активному веществу ряда пирроло[3,4-с]пиразола, а именно к 1,4,5,6-тетрагидро-6-оксо-5-(2-гиперазиноэтил)-4-фенил-3-(4-хлорфенил)пирроло[3,4-с]пиразола дигидрохлориду формулы:
обладающему гипотензивной и антикоагулянтной активностью, что позволяет предполагать возможность использования его в медицине в качестве препарата, эффективно снижающего артериальное давление и свертываемость крови и тем самым оказывающего лечебное действие и предотвращающего развитие различных осложнений при гипертонической болезни. Ближайшим структурным аналогом заявляемого соединения является 5-(2-аминоэтил)-1,4,5,6-тетрагидро-3-метил-6-оксо-4-фенилпирроло[3,4-с]пиразола гидрохлорид (Касимова Н.Н. Синтез, свойства и биологическая активность 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов: Дисс. … канд. фармацевт. наук / Перм. гос. фармацевт. акад. – Пермь, 2002. – с.119) формулы:
который взят за прототип и не обладает гипотензивным и антикоагулянтным действием. Эталонами сравнения являются гепарин (Машковский М.Д. Лекарственные средства: Практ. пособие. – 15 изд. – М.: «Новая волна», 2005. – с.475), который применяется в медицинской практике и является аналогом по антикоагулянтному действию, и папаверин (там же, с.412) формулы:
который применяется в медицинской практике и является аналогом по гипотензивному действию. Сущность изобретения – поиск в ряду пирроло[3,4-с]пиразолов соединения с выраженной гипотензивной и антикоагулянтной активностью, снижающего артериальное давление и свертываемость крови. Это достигается синтезом 1,4,5,6-тетрагидро-6-оксо-5-(2-пиперазиноэтил)-4-фенил-3-(4-хлорфенил)пирроло[3,4-с]пиразола дигидрохлорида, обладающего гипотензивным и антикоагулянтным действием. Заявляемое соединение получают взаимодействием 1-(2-пиперазиноэтил)-5-фенил-4-(4-хлорбензоил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-она дигидрохлорида с гидразин гидратом по схеме:
Пример получения заявляемого соединения. Пример 1,4,5,6-Тетрагидро-6-оксо-5-(2-пиперазиноэтил)-4-фенил-3-(4-хлорфенил)пирроло[3,4-с]пиразола дигидрохдорид. К раствору 4.99 г (0.01 М) 1-(2-пиперазиноэтил)-5-фенил-4-(4-хлорбензоил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-она дигидрохлорида в 5 мл ледяной уксусной кислоты добавляют 0.54 мл (0.011 М) 98%-го гидразин гидрата и кипятят в течение 1.5 ч. После охлаждения реакционную смесь выпаривают, остаток перекристаллизовывают из этанола. Выход 1.63 г (33%). Т.пл.: >310°С. Найдено, %: С 55.79; Н 5.25; N 14.11. С23Н26Cl3N5O. Вычислено, %: С 55.82; Н 5.30; N 14.15. Заявляемое соединение представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в воде, этаноле, диметилформамиде, диметилсульфоксиде. ИК спектр (SPECORD, вазелиновое масло, ПМР спектр (MERCURY 300, 300.055 МГц, DMSO-D6, GMDS, Заявляемое соединение и аналог по структуре испытывали на гипотензивную активность. Эксперименты проведены на наркотизированных мединалом (400 мг/кг, внутрибрюшинно) кошках. Вещества испытывали в одинаковой дозе 5 мг/кг, вводили растворенными в 3 мл изотонического раствора хлорида натрия в бедренную вену в течение 2 мин. Артериальное давление измеряли в сонной артерии прямым способом с помощью ртутного манометра, фиксируя уровень давления на ленте кимографа через определенные промежутки времени. В качестве эталона сравнения использовали известное гипотензивное лекарственное средство папаверина гидрохлорид, который испытывали в дозе 3 мг/кг (1/10 ЛД50). Результаты обрабатывали с использованием коэффициента Стъюдента (Сернов Л.Н., Гацура В.В. Элементы экспериментальной фармакологии, М., 2000, с.312-313).
Как видно из табл.1, заявляемое соединение оказывает выраженное гипотензивное действие, снижая артериальное давление с 5 мин после введения (р<0.01), при этом гипотензивный эффект сохраняется на протяжении всего времени наблюдения (более 6 часов). Максимальное снижение давления наблюдается через 5-15 мин после введения и составляет 41.5-38.8%. Аналог по структуре активности не проявил. Результаты испытания эталона сравнения приведены в табл.2, из которой видно, что под влиянием папаверина гидрохлорида артериальное давление снижается максимально на 34.4% и сохраняется на протяжении только 2 мин.
Заявляемое соединение и аналог по структуре исследовали на наличие антикоагулянтной активности. Опыты проведены с помощью коагулометра «Минилаб 701». Для исследования использовали цитратную (3.8%) кровь (9:1) собаки. Влияние соединений на свертываемость крови испытывали в концентрации 1 мг/мл крови. В качестве эталона антикоагулянтной активности использовали раствор гепарина, который испытывали в концентрации 1 ЕД/мл крови. В каждой серии опытов было использовано восемь животных. Степень антикоагулянтной активности соединений определяли по изменению времени свертывания цитратной крови в сравнении с контролем и эталоном. Результаты обрабатывали с использованием коэффициента Стъюдента. (Сернов Л.Н., Гацура В.В. Элементы экспериментальной фармакологии, М., 2000, с.312-313). Результаты испытаний представлены в таблице 3.
Как видно из табл.3, заявляемое соединение проявляет прямое антикоагулянтное действие, так как достоверно увеличивает время свертывания цитратной крови на 30.4%. Его структурный аналог достоверным антикоагулянтным эффектом не обладает. Эталон сравнения гепарин замедляет свертывание на 22.4%. Таким образом, заявляемое соединение проявляет 2 вида активности – гипотензивную и прямую антикоагулянтную. Такое сочетание активностей имеет большое практическое значение, т.к. при гипертонической болезни помимо повышения артериального давления обычно наблюдается повышение свертывающей активности крови, что приводит к различным тромбоэмболических осложнениям (инфаркт миокарда, ишемический инсульт). Острую токсичность заявляемого соединения определяли на беспородных белых мышах обоего пола массой 16-18 г. Соединение вводили внутрибрюшинно и внутривенно в виде водного раствора из расчета 0.1 мл на 10 г массы животного в возрастающих дозах. Результаты обрабатывали по Прозоровскому с вычислением средней смертельной дозы ЛД50 Установлено, что острая токсичность (ЛД50) заявляемого соединения при внутрибрюшинном введении составляет 1460.0 (610.4-2734.4) мг/кг, а при внутривенном – 467.2 (195.3-875.0) мг/кг. Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (проект №04-03-96042). Источники информации 1. Касимова Н.Н. Синтез, свойства и биологическая активность 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов: Дисс. … канд. фармацевт. наук / Перм. гос. фармацевт. акад. – Пермь, 2002. – с.119. 2. Машковский М.Д. Лекарственные средства: Практ. пособие. – 15 изд. – М.: Новая волна, 2005. – с.475. 3. Там же, с.412. 4. Сернов Л.Н., Гацура В.В. Элементы экспериментальной фармакологии, М., 2000, с.312-313. Формула изобретения
1,4,5,6-Тетрагидро-6-оксо-5-(2-пиперазиноэтил)-4-фенил-3-(4-хлорфенил)пирроло[3,4-с]пиразола дигидрохлорид формулы
обладающий гипотензивной и антикоагулянтной активностями.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
, см-1): 1703 (CON), 3100 (NH), 3400 (N+H, N+H2).
, м.д.): 2.75 (1Н, m, C(1)HAHB), 3.32 (10H, m, N(CH2)5), 3.95 (1H, m, C(1)HAHB), 6.07 (1H, s, С(4)H), 7.32 (7H, Hаром), 7.43 (2Н, Нпром), 9.56 (2Н, b.s, N+H2), 14.13 (1H, b.s, NH).