Патент на изобретение №2319486
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) СРЕДСТВО ДЛЯ ДЕСТРУКЦИИ ОПУХОЛЕВОЙ ТКАНИ И КОРРЕКЦИИ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ОРГАНИЗМА – ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЯ И СПОСОБ ДЕСТРУКЦИИ ОПУХОЛЕВОЙ ТКАНИ И КОРРЕКЦИИ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ОРГАНИЗМА – ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЯ
(57) Реферат:
Изобретение относится к экспериментальной медицине и биологии и может использоваться в медико-биологических экспериментах с целью разработки новых способов лечения онкологических заболеваний. Изобретение заключается в том, что животным ежедневно дают препарат «олигохит актив» per os из расчета 90-100 мг/кг веса животного, общим курсом не менее 7 дней. Способ позволяет вызвать деструкцию опухолевой ткани, которая выражается в увеличении количества погибающих клеток и уменьшении числа активных клеток опухоли животных и провести коррекцию эндогенной интоксикации организма-опухоленосителя. Способ не вызывает патологических изменений в тканях, не подверженных злокачественной трансформации, и улучшает состояние организма-опухоленосителя. 3 н.п. ф-лы, 2 табл.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и биологии и может использоваться в медико-биологических экспериментах с целью поиска новых способов лечения онкологических заболеваний. Поиск новых подходов к терапии злокачественных новообразований остается актуальной медико-биологическим задачей. Основными способами лечения онкологических заболеваний, приводящих к деструкции (лат. destructio – разрушение) опухолевой ткани, являются лучевая терапия [29], фотодинамическая терапия [11], а также химиотерапия, основанная на использовании различных фармакологических веществ (цитостатики, антиметаболиты, противоопухолевые антибиотики и ферменты [19]). Однако большинство из них, наряду с деструкцией опухолевых клеток, вызывают опосредованные патологические изменения в других органах и системах организма. Известен способ повышения эффективности химиопрепарата за счет снижения общей токсичности, посредством стимулирования процессов лимфообразования в физиологическом режиме с использованием биофизических (электромагнитное поле, гипербарическая оксигенация и др.), фармакологических (глюкоза, реополиглюкин, манитол, аскорбиновая кислота, прозерин и др.) и биомолекулярных (группа эндогенных морфинов и др.) факторов [8]. Известны способы тепловой деструкции раковых клеток посредством воздействия на патологически измененный участок биоткани: СВЧ электромагнитным полем неинвазивным излучателем [26]; ультразвуковыми волнами с помощью многоканальной антенной решетки путем сканирования [4]; лазерным излучением с плотностью мощности 0,5-2 Вт/см2, с длиной волны (1,264±0,01)мкм и с частотой следования импульсов (22,5±1) кГц [5]. Ограничением широкого применения данных способов деструкции опухоли является, во-первых, необходимость в специализированном и высокотехнологичном оборудовании, а во-вторых, вероятность повышения интоксикации организма в результате действия этих физико-химических факторов на ткани, не подверженные злокачественной трансформации. В связи с чем существует необходимость в разработке способов деструкции опухолевой ткани, не вызывающих патологических изменений в тканях, не подверженных злокачественной трансформации, но и способствующих улучшению состояния организма-опухоленосителя. В задачу предлагаемого изобретения положено расширение арсенала средств для деструкции опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации организма-опухоленосителя, а также разработка способа применения нового средства. Поставленная задача достигается тем, что предлагается: 1. Применение препарата «олигохит актив» в качестве средства для деструкции опухолевой ткани. 2. Применение препарата «олигохит актив» в качестве средства для коррекции эндогенной интоксикации организма-опухоленосителя. 3. Способ деструкции опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации организма опухоленосителя, включающий введение лекарственного средства, отличающийся тем, что опухоленосителю per os ежедневно в дозе 90-100 мг/кг веса вводят препарат «олигохит актив» общим курсом не менее 7 дней. «Олигохит актив» (иногда употребляют синоним – олигосахарид хитозана сукцинат-аскорбат) (ТУ 9289-004-57184729-03) представляет собой водорастворимый продукт, в котором олигосахарид хитозана (олигохит) (70%), сукцинат (15%) и аскорбат (15%) находятся в ионной связи друг с другом. В физиологических условиях янтарная кислота диссоциирована, поэтому название ее аниона – сукцинат часто применяют как синоним термина «янтарная кислота», а аскорбат – как синоним термина «аскорбиновая кислота». Исследования последних лет показали наличие у сукцината биологической активности с уникальным сочетанием проявлений: по отношению к здоровому организму он выступает в роли адаптогена, а при наличии патологических проявлений демонстрирует нетипично высокий для адаптогенов терапевтический эффект [28]. Сукцинат является нормальным клеточным метаболитом, играет большую роль в обеспечении энергетического баланса в клетке [2, 9, 15], обладает антигипоксическим [12, 28, 30], антиоксидантным [6, 28], радиопротекторным [10] и детоксицирующим действиями [28]. Известны несколько работ, в которых сообщается о результатах применения янтарной кислоты (ЯК) при опухолевом росте: T.Kamata с сотр. (1970) наблюдали торможение роста саркомы М-1 у крыс после введения ЯК [15], А.Л.Коваленко и М.Г.Романцов (1999) показали, что в результате введения ЯК наблюдается существенное уменьшение частоты спонтанных опухолей мышей и увеличение максимальной продолжительности их жизни [6]; Е.В.Козырева (1997) выявила снижение показателя смертности онкологических больных на фоне комплексного применения янтарной, лимонной и В настоящее время аскорбиновая кислота (АК) применяется в комплексной терапии злокачественных новообразований. Однако данные литературы о влиянии АК на рост опухолей противоречивы. Л.С.Трухановой (1987) на модели канцерогенеза, индуцированного 1,2-диметилгидразином и эстрадиолдипропионатом, показано, что при введени мышам линии СВА растворов АК в концентрациях 0,3; 0,75; и 1,5% наблюдается отчетливая тенденция к уменьшению массы опухоли с увеличением концентрации АК [22]. В работе М.Polydock et al. показано увеличение продолжительности жизни (в 2 раза) мышей с асцидной карциномой Эрлиха на фоне введения АК в дозе 10 мг/кг [31], а по наблюдениям Т.Shingu et al. – ускорение роста опухоли (доза 25 мг/сутки) [32]. В эксперименте Н.А.Харьковской с сотр. введение морским свинкам АК в дозе 0,3 мг/кг массы приводило к полному рассасыванию саркомы, а в дозе 1 г/кг – ускорение роста опухоли [24]. Следовательно, вопрос о возможностях применения этого витамина в онкологии остается открытым. В последние годы в различных областях медицины широко применяется хитозан и его производные. Хитозан получают путем переработки морских ракообразных, а после ферментативного расщепления высокомолекулярного хитозана образуется новый, водорастворимый продукт – олигосахарид хитозана. В таком виде он легко абсорбируется в кишечнике и быстро попадает в системный кровоток, а затем с током крови доносится к «органам-мишеням». Одно из новых направлений использования его в качестве носителя для лекарственных форм [25]. К.А.Трескуновым и Б.А.Комаровым предложено применять хитозан в виде солевой формы с L-глутаминовой кислотой в сочетании со специальными фитосборами параллельно с лучевой терапией и комплексной химиотерапией до и после операции при лечении онкозаболеваний [21]. Возможность применения препарата «олигохит актив» в качестве средства деструкции опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации организма опухоленосителя была показана на экспериментальной модели лимфосаркомы Плисса. Злокачественных опухоли, независимо от вызвавшей их причины, локализации и гистогенеза характеризуются морфологическим атипизмом, проявляющемся в нарушении структуры ткани или клеток [14]. Так, выбранная нами модель экспериментальной опухоли лимфосаркома Плисса (ЛФС), полученная в 1958 году после подкожной перевивки опухоли, возникшей у крысы, получавшей 3,3 дихлорбензидин, характеризуется следующими особенностями: состоит из мягких, округлой формы клеток, большая часть которых занята крупным ядром; хроматин располагается главным образом в периферической зоне ядра; ядрышки крупные, гиперхромные; цитоплазма отличается умеренной базофилией. Опухоль обладает ярко выраженным инфильтративным ростом в пограничные соединительную и жировую ткань, а также мышцы; метастазирует [16]. Способ деструкции опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации был разработан на модели лимфосаркома Плисса; он заключается в том, что животному – опухоленосителю ежедневно per os дают раствор «олигохит актив» концентрацией 90-100 мг/кг веса, общим курсом не менее 7 дней. Выбор дозы и курса введения обоснован как теоретическими данными, так и собственными экспериментальными исследованиями. В статье М.В.Васина с сотр. показано, что максимальный антитоксический и антиоксидантный эффект достигается при дозе ЯК 100 мг/кг веса [3]; а Н.И.Федотчева с сотр. выявили, что в гипометаболических состояниях эффективными дозами при введении сукцината перорально являются 50-100 мг/кг веса [23]. Срок введения веществ выбран как минимальный и соответствующий однократному введению для человека [18]. В наших исследованиях показано, что использование препарата «олигохит актив» в концентрации 90-100 мг/кг веса, общим курсом 7 дней, эффективно для коррекции морфологического состояния печени [27] и свободнорадикального баланса организма опухоленосителя. Для сравнения были введены группы животных, получавших отдельно янтарную кислоту, олигосахарид хитозана и олугосахарид хитозана сукцинат по той же схеме. Эксперимент выполнен на 60 белых беспородных крысах, которые были разделены на группы: 1 группа – интактная (n=10). Здоровые животные, не подвергавшиеся каким-либо воздействиям. 2 группа – контрольная (n=10). Животные с ЛФС, без воздействия, получавшие чистую воду. 3 группа – опытная-1 (n=10) (животные с ЛФС, получавшие с 6 дня роста опухоли раствор янтарной кислоты, 7 дней). 4 группа – опытная-2 (n=10) (животные с ЛФС, получавшие с 6 дня роста опухоли раствор олигосахарида хитозана, 7 дней). 5 группа – опытная-3 (n=10) (животные с ЛФС, получавшие с 6 дня роста опухоли раствор олигосахарида хитозана сукцината, 7 дней). 6 группа – опытная-4 (n=10) (животные с ЛФС, получавшие с 6 дня роста опухоли раствор «олигохит актив», 7 дней). 1) На гистологических срезах, окрашенных гематоксилином и эозином, наряду с визуальным описанием ткани ЛФС Плисса, для объективной оценки эффекта вводимых препаратов проводили количественное изучение методом морфометрического анализа, основанного на принципах стереологии с использованием окулярной морфометрической сетки Стефанова С.Б., содержащей 25 узлов, при увеличении микроскопа 10×40×1.5 [20]. На площади препарата, ограниченной сеткой, подсчитывали общее количество клеток опухоли, количество активных клеток и погибающих клеток опухоли. К погибающим клеткам относили клетки с лизирующимися ядрами, а также в состоянии пикноза и кариорексиса [16]. Полученные данные были обработаны на IBM PC/AT с помощью пакетов прикладных программ Statistica-6.0 (Windows ХР). Результаты представлены в таблице 1.
Гистологическое исследование ЛФС Плисса контрольной группы показало: опухоль состоит из тесно прилегающих друг к другу лимфоидных клеток мелкой округлой формы с круглыми ядрами, занимающими почти целиком базофильную цитоплазму. В отдельных участках опухоли небольшие зоны некроза со слабовыраженной лимфоцитарно-макрофагальной инфильтрацией. Введение сукцината животным с ЛФС Плисса приводит к замедлению прорастания опухоли в жировую клетчатку, хотя строение опухолевой ткани со стороны опухоли не изменено. Применение олигосахарида хитозана приводит к фрагментации опухолевой ткани с признаками полнокровия и отека, дискомплексации и вакуолизации клеток, склерозированию сосудов. В то же время выраженного некроза опухоли нет, отмечена лишь дистрофия отдельных опухолевых клеток. После применения олигосахарида хитозана сукцината наблюдалась дискомплексация и небольшой некроз опухоли с сохранившимися участками опухолевой ткани. У крыс-опухоленосителей применение комплекса «олигохит актив» вызвало обширные очаги некроза, с обильной инфильтрацией соединительно тканых элементов, в которых опухолевые клетки характеризовались выраженными дистрофическими изменениями. Морфологические исследования позволили количественно оценить изменения, происходящие в опухоли крыс при введении исследуемых веществ. Под влиянием янтарной кислоты общее количество клеток в опухоли, по сравнению с контролем (36,5±2,4) достоверно не изменилось (37,2±3,7), но уменьшилось число гибнущих на 35% (1,9±0,6), а количество активных клеток имеет тенденцию к росту (35,3±3,6) и (33,6±2,3 – в контроле). По-видимому, ЯК – неспецифический стимулятор пролиферации клеток. На фоне введения олигосахарида хитозана общее число клеток опухоли снизилось незначительно (34,4±3,3), при достоверном увеличении количества гибнущих клеток в 1,9 раза (5,6±1,2) и снижении количества активных клеток на 15% (28,8±1,7), по сравнению с контролем. Введение олигосахарида хитозана сукцината не вызвало достоверных изменений в ткани ЛФС Плисса. «Олигохит актив» достоверно снизил общее количество опухолевых клеток (31,4±2,0), в результате увеличения в 4,7 раза количества дегенерирующих опухолевых клеток (13,6±1,3), и уменьшения числа активных клеток опухоли в 1,9 раза (17,8±1,5), по сравнению с аналогичными показателями животных контрольной группы (таблица 1). 2) Уровень эндогенной интоксикации оценивали по методу М.Я.Малаховой (1995) путем определения веществ низкой и средней молекулярной массы (ВСНММ) в плазме крови экспериментальных животных [13]. Регистрация спектра исследуемого раствора в зоне ультрафиолета на СФ позволяет произвести комплексную оценку токсических повреждающих факторов и более 200 наименований веществ нормального и патологического метаболизма. Суть метода состоит в осаждении крупномолекулярных частиц плазмы крови и эритроцитов 15%-м раствором трихлоруксусной кислоты с последующей спектрофотометрией водного раствора супернатанта при длине волны 238-298 нм. Шаг длины волны 4 нм. Расчет количества веществ низкой и средней молекулярной массы производится по формуле: ВНСММ=(Е238+Е242+Е246+…+Е298)*4 (у.е.). Полученные данные были обработаны на IBM PC/AT с помощью пакетов прикладных программ Statistica-6.0 (Windows XP). Результаты представлены в таблице 2.
Как видно из таблицы 2 через 14 дней после перевивки ЛФС Плисса в плазме крови животных контрольной группы уровень эндогенной интоксикации вырос в среднем на 38% (12,64±0,25 у.е.) по сравнению с показателями интактных животных (9,13±0,13 у.е.). Наибольшая коррекция уровня эндогенной интоксикации в плазме крови животных-опухоленосителей наблюдалась на фоне введения препарата «олигохит актив» (9,35±0,17 у.е.) – на 26% ниже уровня эндогенной интоксикации в плазме крови животных контрольной группы (12,64±0,25 у.е.). В группе крыс с ЛФС Плисса, получавших водный раствор янтарной кислоты, содержание ВНСММ (10,42±0,17 у.е.) в плазме крови на 18% ниже, чем в контрольной группе (12,64±0,25 у.е.). В то время, как введение растворов олигосахарида хитозана и олигосахарида хитозана сукцината незначительно повлияло на развитие эндогенной интоксикации у крыс с перевитой ЛФС Плисса (на 8% и 4%, соответственно). Таким образом, сравнительное изучение биологического действия различных веществ на экспериментальной модели перевивной опухоли выявило, что применение комплекса «олигохит актив» приводит к деструкции опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации организма опухоленосителя, что позволяет предложить данный способ для использования в медико-биологических экспериментах с целью поиска новых способов лечения онкологических заболеваний, а также применения этого способа в ветеринарной практике. Пример 1 (Серия экспериментов, иллюстрирующая эффективность препарата «олигохит актив» в отношении деструкции опухолевой ткани) На 14 день после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса (на 8 день после начала введения веществ) проведена декапитация всех подопытных животных под эфирным наркозом. Морфометрическое описание гистологических срезов, окрашенных гематоксилином и эозином, заключалось в подсчете общего количества клеток опухоли, количества активных)1 погибающих клеток опухоли на площади, ограниченной окулярной морфометри ческой сеткой Стефанова С.Б. К погибающим клеткам относили клетки с лизирующимися ядрами, а также в состоянии пикноза и кариорексиса. 1) Крысе №22, весом 260 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма лимфосаркомы (ЛФС) Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. На 14 день после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса проведена декапитация животного №22 под эфирным наркозом. Морфометрический анализ гистологических срезов ткани опухоли животного №22 показал, что общее количество клеток опухоли равно 37, количество активных клеток – 34, количество погибающих клеток опухоли – 3. 2) Крысе №32, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора янтарной кислоты в концентрации 90-100 мг/кг веса. По сравнению с контролем, достоверных изменений морфометрических показателей ткани ЛФС Плисса не было: общее количество клеток опухоли – 37, количество активных опухолевых клеток – 35 и погибающих клеток опухоли – 2. 3) Крысе №45, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора олигосахарида хитозана в концентрации 90-100 мг/кг веса. Морфометрический анализ гистологических срезов ткани опухоли животного №45 выявил снижение общего количества клеток на 11% (33) и количества активных опухолевых клеток на 17% (28), по сравнению с контролем. Число погибающих клеток опухоли увеличилось до 5. 4) Крысе №4, весом 245 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора олигосахарида хитозана сукцината в концентрации 90-100 мг/кг веса. Морфометрический анализ гистологических срезов ткани опухоли животного №4 показал, что общее количество клеток опухоли – 40, количество активных опухолевых клеток – 38, число погибающих клеток опухоли – 2. 5) Крысе №12, весом 255 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора препарата «олигохит актив» в концентрации 90-100 мг/кг веса. Общее количество клеток ЛФС Плисса на площади препарата, ограниченной сеткой, изменилось, по сравнению с контролем, незначительно (33). В то время как количество активных клеток опухоли снизилось на 44% (19), а число гибнущих клеток опухоли в 4,7 раза (14). Пример №2 (Серия экспериментов, иллюстрирующая эффективность препарата «олигохит актив» в отношении коррекции эндогенной интоксикации организма опухоленосителя). На 14 день после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса (на 8 день после начала введения веществ) проведена декапитация всех подопытных животных под эфирным наркозом. Измерение уровня эндогенной интоксикации организма проводили по содержанию веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ) в плазме крови экспериментальных животных. 1) Крыса №51, весом 265 г не подвергалась каким-либо воздействиям, содержалась в стандартных условиях. Уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №51 составил 9,00 у.е. 2) Крысе №22 (контроль), весом 260 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма лимфосаркомы (ЛФС) Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. На 14 день после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №22 составил 12,83 у.е. Эндогенная интоксикация увеличилась на 42% по сравнению с показателем животного №51. 3) Крысе №32, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора янтарной кислоты в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли (на 8 день после начала введения раствора янтарной кислоты) уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №32 составил 10,34 у.е. Эндогенная интоксикация ниже на 19% по сравнению с контролем. 4) Крысе №45, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора олигосахарида хитозана в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли (на 8 день после начала введения раствора олигосахарида хитозана) уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №45 составил 11,65 у.е. Эндогенная интоксикация ниже аналогичного показателя животного контрольной группы на 9%. 5) Крысе №4, весом 245 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора олигосахарида хитозана сукцината в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли (на 8 день после начала введения раствора олигосахарида хитозана сукцината) уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №4 составил 12,15 у.е. Эндогенная интоксикация ниже аналогичного показателя животного контрольной группы на 5%. 6) Крысе №12, весом 255 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора препарата (олигохит актив» в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли (на 8 день после начала введения раствора препарата «олигохит актив») уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №12 составил 9,47 у.е. Эндогенная интоксикация ниже аналогичного показателя животного контрольной группы на 26%. Пример №3 (Серия экспериментов, иллюстрирующая способ деструкции опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации организма опухоленосителя). На 14 день после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса (на 8 день после начала введения веществ) проведена декапитация всех подопытных животных под эфирным наркозом. Измерение уровня эндогенной интоксикации организма проводили по содержанию веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ) в плазме крови экспериментальных животных. Морфометрическое описание гистологических срезов, окрашенных гематоксилином и эозином, заключилось в подсчете общего количества клеток опухоли, количества активных и погибающих клеток опухоли на площади, ограниченной окулярной морфометрическои сечкой Стефанова С.Б. К погибающим клеткам относили клетки с лизирующимися ядрами, а также в состоянии пикноза и кариорексиса. 1) Крыса №51 весом 265 г не подвергалась каким-либо воздействиям, содержалась в стандартных условиях. Уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №51 составил 9,00 у.е. 2) Крысе №22 (контроль), весом 260 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма лимфосаркомы (ЛФС) Плисса в 0,5 мл физиологическою раствора. На 14 день после перевивки опухолевого штамма ЛФС Плисса уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №22 составил 12,83 у.е., что на 42% выше по сравнению с показателем здорового животного №51. Морфометрический анализ гистологических срезов ткани опухоли животного №22 показал, что общее количество клеток опухоли равно 37, количество активных клеток – 34, количество погибающих клеток опухоли – 3. 3) Крысе №32, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора янтарной кислоты в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли (на 8 день после начала введения раствора янтарной кислоты) уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №32 составил 10,34 у.е., что на 19% ниже, чем в контроле. Достоверных изменений морфометрических показателей ткани ЛФС Плисса, по сравнению с контролем, не было: общее количество клеток опухоли – 37, количество активных опухолевых клеток – 35 и погибающих клеток опухоли – 2. 4) Крысе №45, весом 250 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора олигосахарида хитозана в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли (на 8 день после начала введения раствора олигосахарида хиптозана) уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №45 составил 11,65 у.е., ниже аналогичного показателя животного контрольной группы на 9%. Морфометрический анализ гистологических срезов ткани опухоли животного №45 выявил снижение общего количества клеток на 11% (33) и количества активных опухолевых клеток на 17% (28), по сравнению с контролем. Число погибающих клеток опухоли увеличилось до 5. 5) Крысе №4, весом 245 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора олигосахарида хитозана сукцината в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли (на 8 день после начала введения раствора олигосахарида хитозана сукцината) уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №4 составил 12,15 у.е., что на 5% ниже аналогичного показателя животного контрольной группы. Морфометрический анализ гистологических срезов ткани опухоли животного №4 показал, что общее количество клеток опухоли – 40, количество активных опухолевых клеток – 38, число погибающих клеток опухоли – 2. 6) Крысе №12, весом 255 г в область правого бедра подкожно трансплантировали взвесь клеток опухолевого штамма ЛФС Плисса в 0,5 мл физиологического раствора. С 6-го дня после трансплантации опухоли в течение 7 дней животное получало ежедневно по 1 мл водного раствора препарата «олигохит актив» в концентрации 90-100 мг/кг веса. На 14 день после трансплантации опухоли (на 8 день после начала введения раствора препарата «олигохит актив») уровень эндогенной интоксикации в плазме крови крысы №12 составил 9,47 у.е., что ниже аналогичного показателя животного контрольной группы на 26%. Общее количество клеток ЛФС Плисса на площади препарата, ограниченной сеткой, изменилось, по сравнению с контролем, незначительно (33). В то время как количество активных клеток опухоли снизилось на 44% (19), а число гибнущих клеток опухоли в 4,7 раза (14). ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ 2. Афанасьев В.В. Клиническая фармакология реамберина (очерк): Пособие для врачей. – СПб., 2005: 44 с. 4. Загускин С.Л. и др. Способ селективной деструкции раковых клеток. Патент RU №2147848. 5. Загускин С.Л. и др. Способ избирательной деструкции раковых клеток. Патент RU №2147847. 6. Коваленко А.Л., Романцов М.Г. Реамберин 1,5% для инфузий: от эксперимента в клинику. – СПб.: «СП Минимакс»; 1999: 112 с. 7. Козырева Е.В. Использование янтарной кислоты и других компонентов энергетического обмена в лечении онкологических больных. / сб. науч. статей «Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве». – Пущино: ОНТИ ПНЦРАН; 1997: 113-117. 8. Колганов А.С. Способ усиления эффективности действия противоопухолевого химиопрепарата. Патент RU №2112983. 13. Малахова М.Я. Метод регистрации эндогенной интоксикации. – СПб.: М.А.П.О; 1995: 35 с. 14. Молотков О.В., Ефременков С.В., Решедько В.В. Патофизиология в вопросах и ответах: учебное пособие. / Под ред. О.В.Молоткова. – Смоленск: САУ; 1999: 271-273. 15. Морозкина Т.С. Энергетический обмен и питание при злокачественных новообразованиях. / Под. ред. В.С.Шапота. – Мн.: Беларусь; 1989: 191 с. 17. Помыткин И.А., Соловьев С.П. Способ лечения новообразований. Патент RU №2275920. 18. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. / Ред. В.П.Фисенко и др. – М.: ЗАО «ИИА «Ремедиум»; 2000: с.21. 20. Солопаева И.М., Стефанов С.Б., Жданова Т.Ф. Количественная морфология биоктатов органов пищеварения. / Методич. рекомендации. -Горький; 1982: 16 с. 21. Трескунов К.А., Комаров Б.А. Способ лечения онкозаболеваний. Патент RU №2165253. 24. Харьковская Н.А., Фарон Р.А., Хрусталев С.А. Экспериментальное изучение влияния аскорбиновой кислоты на спонтанный бластомогенез. Рук. деп. В ВИНИТИ 26.01.87. Рег. №570-В87. 25. Хитозан per os. Пер. с англ. / Под ред. Риккардо А.А. Муццарелли. – Н.Новгород.: изд-во «Вектор-ТиС»; 2001: 372 с. 26. Шафранов В.В. и др. Способ деструкции сосудистых опухолей у детей. Патент RU №2157134. 27. Щербатюк Т.Г. и др. Способ коррекции морфологического состояния печени опухоленосителей. Патент RU №2271813. 28. Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве: сб. науч. статей. / Под ред. М.Н. Кондрашовой – Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН; 1997: 300 с. 29. Ярмоненко С.П., Вайнсон А.А. Радиобиология человека и животных: Учеб. Пособие. / Под. ред. С.П.Ярмоненко. – М.: Высш. шк.; 2004: 549 с. 30. Chance, B.C. Hollunger G. The interaction of energy and electron transfer reactions in mitochondria / J. Biol. Chem.; 1961; 236(5): 1534-1584. Формула изобретения
1. Применение препарата «олигохит актив» в качестве средства для деструкции опухолевой ткани. 2. Применение препарата «олигохит актив» в качестве средства для коррекции эндогенной интоксикации организма-опухоленосителя. 3. Способ деструкции опухолевой ткани и коррекции эндогенной интоксикации организма-опухоленосителя, включающий введение лекарственного средства, отличающийся тем, что опухоленосителю per os ежедневно в дозе 90-100 мг/кг веса вводят препарат «олигохит актив» общим курсом не менее 7 дней.
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 08.08.2008
Извещение опубликовано: 10.07.2010 БИ: 19/2010
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
-кетоглутаровой кислот с витаминами и травами [7]. И.А.Помыткин и С.П.Соловьев предложили в комплексе с изотопологами использовать соль ЯК как дополнительное средство в лечении новообразований [17]. Однако в работе В.Н.Анисимова и М.Н.Кондрашовой показано, что подкожные введения животным сукцината натрия в дозе 50 и 250 мг/кг в течение 10 дней, начиная с 3-го дня после трансплантации опухолей, мало влияли на рост перевиваемых опухолей у мышей и крыс [1].
0,05 по сравнению с контрольной группой.