Патент на изобретение №2317543
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ВЗЯТИЯ КРОВИ У ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ
(57) Реферат:
Изобретение относится к физиологии, а именно к методам взятия крови при изучении влияния белковых препаратов на показатели естественной резистентности. Сущность способа заключается в том, что кровь у мышей собирают при помощи декапитации головы животных, предварительно помещенных в термостат на 2-5 минут при температуре 40-42°С. Использование изобретения позволяет упростить взятие крови у белых мышей и увеличить количественные показатели собираемой крови и сыворотки. 4 табл.
(56) (продолжение): CLASS=”b560m”pp.87-93. (реферат) [найдено 26.12.2006] Найдено из базы данных Entrez PabMed, PMID: 2328523. ЕФРЕМОВ А.В. и др. Изменение гормонально-метаболических показателей плазмы крови крыс в остром периоде после общей управляемой гипертермии. Бюллетень сибирской медицины, 2006, №2 (он-лайн) [найдено 26.12.2006].
Изобретение относится к физиологии, а именно к взятию крови с последующим отделением сыворотки при изучении влияния белковых препаратов на показатели естественной резистентности. Известен способ получения крови лабораторных животных с помощью декапитации, описанный в SU №1296117 А1 «Устройство для забора крови у мелких лабораторных животных», опубликованный 15.03.1987. Недостатки данного способа заключаются в малых количествах собираемой крови, недостаточных для исследования физиологических показателях крови при влиянии белковых препаратов на организм животного. Упрощение способа взятия крови у белых мышей и увеличение количественных и качественных показателей собираемой крови и сыворотки достигается тем, что кровь берут у белых мышей: контрольных и опытных (иммунизированных препаратом из костного мозга, белковой природы). Для этого отбирают здоровых животных, находящихся в одной весовой и возрастной категориях и в одном физиологическом состоянии. Формируют группы из контрольных и опытных животных. Животных помещают в одинаковые условия после иммунизации опытных и следят за их физиологическим состоянием до появления первого иммунного ответа на введенный антиген. Препарат для введения в заднюю подушечку мыши получают из костного мозга трубчатых костей диких и сельскохозяйственных животных путем осаждения белков из клеток костного мозга с помощью 10% раствора трихлоруксусной кислоты и последующего диализа белкового раствора. Взятие крови у мышей обеих групп проводят декапитацией головы животного. Животных предварительно выдерживают в термостате в течение 2-5 минут при температуре 40-42°С (происходит повышение обмена веществ и разжижение крови мышей). Затем животное с помощью пинцета хватают за складку кожи на загривке, фиксируют и отсекают голову стерильными ножницами. Кровь собирают с помощью воронки в тонкие пробирки Уленгута до тех пор, пока происходят предсмертные судорожные конвульсии тела животных, и кровь порциями выбрасывается в воронку. Кровь после взятия 25-30 мин выдерживают в термостате (35…37°С), затем сгусток ее обводят тонкой металлической палочкой (отделение сгустка от стенок сосуда) и ставят на 16-18 часов в холодильник. Сыворотку отсасывают пипеткой с помощью груши, переносят в стерильный сосуд, закрывают крышкой и хранят в холодильнике. Таким образом, можно получить до 1,5…2 мл крови и Пример 1. Беспородных белых мышей, самцов в одной возрастной категории (4-6 месяцев) массой 18,8±0,3 г иммунизируют препаратом из костного мозга лисиц, содержащим 50,3 г/л общего белка в своем составе (таблица 1), в подушечку задней левой лапки в дозе 0,025 мл на мышь. Через 7-8 дней от животных опытных и контрольных групп собирают кровь для исследования сыворотки на общий белок и его фракции. Проводят декапитацию головы животных, не помещая их предварительно в термостат. Собирают кровь и отделяют сыворотку как описано выше. Таким образом, получают до 0,5±0,04 мл крови.
Пример 2. Иммунизируют лабораторных мышей белковым препаратом из костного мозга лисиц по примеру 1, но перед забором крови методом декапитации животных помещают в термостат на 2-5 минут при температуре 40-42°С. Таким образом, получают 1,7±0,07 мл крови и 0,48±0,01 мл сыворотки. В таблицах 2 и 3 показаны данные исследования крови мышей, полученной заявленным способом, разделенных на две группы: с нормальной температурой тела (контроль) и нагреваемые в термостате, а в таблице 4 – разность средних показателей электрофореза, отобранной сыворотки крови мышей.
При увеличении температуры тела животных количество и видовой состав лейкоцитов изменились незначительно в сравнении с контрольной группой животных.
По данным таблицы 3 видно, что показатели клеточной и гуморальной защиты животных с температурой тела 38,3°С изменились незначительно в сторону увеличения. Показатели ФА – на 14,7%, общего белка – на 2,03% в сравнении с контролем.
Отличительным преимуществом предлагаемого способа взятия крови у мышей является доступность предложенного способа, что позволяет повысить выход собираемой крови и сыворотки, не изменяя при этом ее качественные показатели, и изучить влияние иммуностимулирующих препаратов на организм животного. Так, например, у опытных животных, иммунизированных костномозговым препаратом, в 1,7 раз увеличилось содержание общего белка и в 1,9 раз
Формула изобретения
Способ взятия крови у лабораторных мышей для определения концентрации общего белка, включающий забор крови при помощи декапитации животных, пробы которой помещают в микропробирки, пригодные для центрифугирования, отличающийся тем, что кровь собирают от животных, предварительно помещенных в термостат на 2-5 мин при температуре 40-42°С.
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 09.06.2008
Извещение опубликовано: 20.03.2010 БИ: 08/2010
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
0,5 мл сыворотки.
1+
1