Патент на изобретение №2316207

(54) СЕЛЕКЦИОННО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ СПОСОБ СОЗДАНИЯ ВЫСОКОПРОДУКТИВНОГО И УСТОЙЧИВОГО К ПЕРСИСТЕНТНОМУ ЛИМФОЦИТОЗУ СТАДА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

(57) Реферат:

Изобретение относится к зоотехнии и ветеринарии. Устанавливают генотипы коров маточного поголовья и племенных быков по гену BoLA DRB3. Животных распределяют по группам с различной чувствительностью к персистентному лимфоцитозу: с генотипом, включающим две аллели, обуславливающие устойчивость (Ч/Ч); с генотипом, включающим две аллели, обуславливающие устойчивость (У/У); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую чувствительность, а другую устойчивость (У/Ч); с генотипом, включающим две нейтральные аллели (Н/Н); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую чувствительность, а другую нейтральную (Ч/Н); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую устойчивость, а другую нейтральную (У/Н). Для воспроизводства родительские пары подбирают следующим образом: одного родителя с генотипом У/У, а другого Ч/Ч; или одного родителя с генотипом Ч/У, а другого Ч/Ч; или одного родителя с генотипом Н/У, а другого Ч/У; или одного родителя с генотипом Н/Ч, а другого У/У. Способ позволяет повысить устойчивость крупного рогатого скота к персистентному лимфоцитозу с одновременным повышением их производительности. 6 табл.

Изобретение относится к зоотехнии и ветеринарии и предназначено для использования при формировании высокопродуктивного стада крупного рогатого скота, устойчивого к персистентному лимфоцитозу.

По данным статистики, среди заразных болезней крупного рогатого скота удельный вес лейкоза составляет 53,7%. В 2004 г. зарегистрировано 3215 неблагополучных по лейкозу пункта на территории 60 субъектов федерации.

Животные, у которых выявлен персистентный лимфоцитоз или опухолевая стадия лейкоза, по действующему законодательству (Приказ №359 Минсельхозпрода РФ от 11 мая 1999 года) подлежат немедленному уничтожению.

Наиболее близким по сущности к предлагаемому является способ генетической профилактики лейкоза у КРС (RU 2032996, А01К 67/02) – прототип, включающий тестирование коров на наличие эритроцитарных антигенов групп крови, установление коров, устойчивых к лейкозу, с дополнительным генеалогическим анализом по линиям; тестирование племенных быков по тем же эритроцитарным антигенам, с отбором устойчивых быков (по потомству) и последующим скрещиванием устойчивых родителей для получения устойчивого потомства (4).

Известный способ имеет ряд недостатков:

– среди животных, больных персистентным лимфоцитозом, встречаются носители групп крови, определенные как обеспечивающие устойчивость к этому заболеванию (относительная связь генотипа и устойчивости);

– при отборе устойчивых животных не учитывается связь факторов группа крови/ продуктивность

М.J.Т. Van Eijk, J.A.Stewart-Haynes, J.E.Beever (1992); Г.Е.Сулимова, И.Г.Удина, Г.О.Шайхаев, И.А.Захаров (1995); М.Zanotti et al. (1996); С.П.Павленко (2000); И.Г.Удина и др. (2000) показали, что если в генотипе животного присутствуют аллели (одна или две) гена BoLA DRB 3, ассоциированные с устойчивостью к персистентному лимфоцитозу, то у такого животного не развивается эта стадия лейкоза.

Также установлено, что восприимчивость животного, как правило, связана с его повышенной продуктивностью и ассоциирована с аллелями гена BoLA DRB 3, повышающими риск развития персистентного лимфоцитоза.

Идентификация аллелей гена BoLA DRB 3 (5) заключается в амплификации экзона 2 гена BoLA DRB 3, (размер ПЦР – продукта составляет 284 пн), проведении анализа рестрикционного полиморфизма этой области с помощью эндонуклеаз Rsa I, Hae III, Bst Y I. Сопоставление ДНК – паттернов, полученных с использованием указанных выше рестриктаз, позволяет идентифицировать более 100 аллелей гена BoLA DRB 3. Присутствие в генотипе аллелей BoLA DRB 3.2*11, *28, *23 (У- аллели) обеспечивает устойчивость животных к персистентному лимфоцитозу, а аллели BoLA DRB 3.2*16, *24, *22, *8 (Ч – аллели), связанные с повышенной восприимчивостью к этому заболеванию, часто встречаются у высокопродуктивных животных. Нейтральные аллели (Н – аллели) не ассоциированы ни с продуктивностью, ни с устойчивостью.

Задача изобретения – повысить устойчивость популяций крупного рогатого скота к персистентному лимфоцитозу с одновременным повышением их продуктивности.

Решение задачи достигается тем, что в селекционно-генетическом способе создания высокопродуктивного и устойчивого к персистентному лимфоцитозу стада крупного рогатого скота производится ДНК тестирование маточного поголовья и быков-производителей по гену BoLA DRB3, затем животные распределяются по группам с различной чувствительностью к персистентному лимфоцитозу: с генотипом, включающим две аллели, обуславливающие чувствительность (Ч/Ч); с генотипом, включающим две аллели, обуславливающие устойчивость (У/У); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую чувствительность, а другую устойчивость (У/Ч); с генотипом, включающим две нейтральные аллели (Н/Н); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую чувствительность, а другую нейтральную (Ч/Н); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую устойчивость, а другую нейтральную (У/Н) и для воспроизводства родительские пары подбираются так, чтобы обеспечить в потомстве максимальное насыщение популяции генотипами У/Ч.

При этом У – аллель в генотипе выполняет функцию защиты от персистентного лимфоцитоза, а Ч – аллель является маркером высокой продуктивности.

Способ осуществляется следующим образом.

У племенных быков берутся образцы спермы на анализ ДНК. Амплифицируется экзон 2 гена BoLA DRB 3 (размер ПЦР – продукта составляет 284 пн), а затем проводится анализ рестрикционного полиморфизма этой области с помощью эндонуклеаз Rsa I, Нае III, Bst Y I. Устанавливается генотип животного по гену BoLA DRB 3. Создается картотека быков, в которой помимо основных зоотехнических характеристик учитывается генотип по гену BoLA DRB 3.

У коров маточного поголовья берутся образцы крови на анализ ДНК. Амплифицируется экзон 2 гена BoLA DRB 3 (размер ПЦР – продукта составляет 284 пн), а затем проводится анализ рестрикционного полиморфизма этой области с помощью эндонуклеаз Rsa I, Нае III, Bst Y I. Устанавливается генотип животного по гену BoLA DRB 3.

Затем животные распределяются по группам: с генотипом, включающим две аллели, обуславливающие чувствительность к персистентному лимфоцитозу (Ч/Ч); с генотипом, включающим две аллели, обуславливающие устойчивость к персистентному лимфоцитозу (У/У); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую чувствительность, а другую устойчивость к персистентному лимфоцитозу (У/Ч); с генотипом, включающим две аллели, нейтральные по отношению к персистентному лимфоцитозу (Н/Н); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую чувствительность, а другую нейтральную (Ч/Н); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую устойчивость, а другую нейтральную (У/Н) и для воспроизводства родительские пары подбираются так, чтобы обеспечить в потомстве максимальное насыщение популяции генотипами У/Ч.

В результате проведенных исследований нами установлено, что у быков-производителей (n=60), используемых племпредприятием 000 НПСХП “Астер” г. Краснодар, генотипы распределены следующим образом (табл.1).

Таким образом, создана картотека имеющихся быков. Анализ таблицы 1 позволяет сделать вывод о необходимости направленной селекции для получения быков с генотипом УУ или закупки таких быков.

В хозяйстве “Привольное” Каневского района Краснодарского края (n=90) нами было установлено следующее распределение генотипов по гену BoLA DRB 3 (табл.2).

Для максимального насыщения популяции генотипами У/Ч необходимо осуществить подбор родительских пар следующим образом (табл. 3):

Тогда во втором поколении можно получить 80% животных с генотипом У/Ч; 5%-У/У;15%-У/Н

В других хозяйствах возможно другое распределение генотипов и, следовательно, другой подбор родительских пар (табл. 4):

В таблице 5 представлено распределение генотипов (n=50) в хозяйстве “Бейсуг” Приморско – Ахтарского района и показатели продуктивности для каждого из генотипов, что подтверждает достоверность предлагаемого способа. Из таблицы 5 следует, что группа животных с генотипом Ч/У достоверно превосходит по продуктивным показателям группы У/У, Ч/У и Ч/Н.

В другом хозяйстве – ОАО “Дружба” Приморско-Ахтарского района получены сходные результаты (таблица 6).

Источники информации

Формула изобретения

Способ создания высокопродуктивного и устойчивого к персистентному лимфоцитозу стада крупного рогатого скота, заключающийся в том, что проводят ДНК тестирование маточного поголовья и быков-производителей по гену BoLA DRB3, затем животных распределяют по группам с различной чувствительностью к персистентному лимфоцитозу: с генотипом, включающим две аллели, обуславливающие чувствительность (Ч/Ч); с генотипом, включающим две аллели, обуславливающие устойчивость (У/У); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую чувствительность, а другую – устойчивость (У/Ч); с генотипом, включающим две нейтральные аллели (Н/Н); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую чувствительность, а другую – нейтральную (Ч/Н); с генотипом, включающим одну аллель, обуславливающую устойчивость, а другую – нейтральную (У/Н) и, чтобы обеспечить в потомстве максимальное насыщение популяции генотипами У/Ч, для воспроизводства родительские пары подбирают следующим образом: одного родителя с генотипом У/У, а другого – Ч/Ч; или одного родителя с генотипом Ч/У, а другого – Ч/Ч; или одного родителя с генотипом Н/У, а другого – Ч/У; или одного родителя с генотипом Н/Ч, а другого – У/У.

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 26.04.2007

Извещение опубликовано: 10.08.2008 БИ: 22/2008

NF4A – Восстановление действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение

Дата, с которой действие патента восстановлено: 27.09.2008

Извещение опубликовано: 27.09.2008 БИ: 27/2008

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 26.04.2009

Извещение опубликовано: 27.03.2010 БИ: 09/2010