Патент на изобретение №2312349
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ АКТИВНОСТИ МИЕЛОИДНОГО ДИФФЕРОНА
(57) Реферат:
Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии. Для оценки активности миелоидного дифферона в эксперименте осуществляют количественную оценку незрелых и зрелых клеток, принадлежащих к миелоидному дифферону кроветворения, при этом дополнительно учитывают эозинофилы и базофилы, а также их клетки предшественники, начиная с миелобластов. Определяют индекс миелоидного дифферона (ИМД) как соотношение суммы нейтрофильных, базофильных и эозинофильных миелобластов, промиелоцитов, миелоцитов, метамиелоцитов к сумме палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, эозинофилов и базофилов. При ИМД менее 0,55 выявляют угнетение активности миелоидного дифферона, а при ИМД более 0,60 выявляют увеличение активности миелоидного дифферона. Использование способа позволяет повысить точность и достоверность оценки активности миелоидного дифферона.
(56) (продолжение): CLASS=”b560m”analysis of the myeloid differentiation program: global analysis of gene expression during induced differentiation in the MPRO cell line. Blood. 2002, 100(9), p.3209-20, PMID: 12384419, реф., [он-лайн], [найдено 11.12.2006], найдено из базы данных PubMed.
Изобретение относится к области медицины, а именно к гематологии, и может быть использовано для оценки эффективности проводимой терапии, а также биологического воздействия экстремального фактора на организм. Наиболее близким способом к патентуемому способу можно считать способ оценки активности миелоидного дифферона по книге Е.Д.Гольдберг. Справочник по гематологии. Томск: Изд-во Том. ун-та, 1989, с.27-29. Этот способ заключается в количественной оценке незрелых и зрелых клеток, принадлежащих к миелоидному дифферону кроветворения. При этом учитывают лишь нейтрофильные клетки: миелобласт, промиелоцит, миелоцит, метамиелоцит, палочкоядерные и сегментоядерные нейтрофилы. Недостатком прототипа является то, что он не дает полной информации о состоянии миелоидного дифферона. Изобретение направлено на получение следующего результата: повышение достоверности оценки за счет более полного учета клеток миелоидного дифферона. Это достигается за счет того, что дополнительно учитывают эозинофилы и базофилы, а также их клетки предшественники, начиная с миелобластов, после чего определяют индекс миелоидного дифферона (ИМД) как соотношение суммы нейтрофильных, базофильных и эозинофильных миелобластов, промиелоцитов, миелоцитов, метамиелоцитов к сумме палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, эозинофилов и базофилов и при НМД менее 0,55 выявляют снижение активности миелоидного дифферона, а при ИМД более 0,60 выявляют увеличение активности миелоидного дифферона. Сущность изобретения состоит в том, что нами установлена необходимость учета не только нейтрофильных клеток, но и эозинофилов, базофилов и их предшественников с целью получения достоверной информации о состоянии гранулоцитопоэза. Не учет указанных нами дополнительных клеток дает неполную информацию для оценки активности миелоидного дифферона. На основании проведенной экспериментальной работы и ее математической обработки был введен ранее не используемый критерий – индекс миелоидного дифферона, аналогом для которого послужил известный костномозговой индекс нейтрофилов как соотношение незрелых клеток к зрелым. Сведения о костномозговом индексе нейтрофилов приведены в вышеуказанных источниках. Значения ИМД менее 0,55 и более 0,60 характеризуют отклонения активности миелоидного дифферона от нормы и установлены нами по результатам проведенной экспериментальной работы на 216 крысах линии Wistar (самцах, возраста 6-8 мес. с массой тела 180-220 г). Изучалось воздействие ионизирующего излучения дозами 0,5 Гр и 3 Гр. Тотальное облучение крыс осуществлялось однократно – Тизоль внутрибрюшинно (водный раствор 50%) – 2,5 г/кг; – Деринат внутримышечно (водный раствор 1,5%) – 7 мкг/кг; – Тизоль внутрибрюшинно (водный раствор 50%) – 1,25 г/кг и деринат внутримышечно (водный раствор 1,5%) – 3,5 мкг/кг совместно. – Физиологический раствор внутрибрюшинно – 1 мл (контрольная подгруппа в каждой группе исследования) Способ выполняют следующим образом: осуществляют забор костного мозга, изготавливают цитологический препарат образца косного мозга, фиксированный мазок окрашивают азур II-эозином (по Романовскому-Гимзе). Затем производят подсчет клеток миелоидного ростка с помощью иммерсионной системы светового микроскопа (100×15). Пример №1 (интактный контроль), подсчитано: Миелобласты – 0,9 Промиелоциты – 1,4 Миелоциты – 8,2 Метамиелоциты – 7,4 Палочкоядерные нейтрофилы – 8,1 Сегментоядерные нейтрофилы – 13,3 Эозинофилы – 6,8 Базофилы – 3,4 Производят расчет ИМД: ИМД=(0,9+1,4+8,2+7,4)/(8,1+13,3+6,8+3,4)=0,56 Вывод: ИМД более 0,55, но менее 0,60. Таким образом, данный показатель свидетельствует о нормальной активности миелоидного дифферона. Пример №2 (облучение животного Миелобласты – 0,1 Промиелоциты – 0,4 Миелоциты – 9,5 Метамиелоциты – 7,3 Палочкоядерные нейтрофилы – 11,6 Сегментоядерные нейтрофилы – 20,1 Эозинофилы – 5,3 Базофилы – 3,4 Производят расчет ИМД: ИМД=(0,1+0,4+9,5+7,3)/(11,6+20,1+5,3+3,4)=0,42 Вывод: ИМД менее 0,55. Таким образом, данный показатель свидетельствует о снижении активности миелоидного дифферона. Пример №3 (животное, не подвергшееся воздействию ионизирующего излучения, получавшее терапию тизолем в течение 7 суток), подсчитано: Миелобласты – 0,8 Промиелоциты – 1,9 Миелоциты – 11,3 Метамиелоциты – 7,2 Палочкоядерные нейтрофилы – 7,8 Сегментоядерные нейтрофилы – 13,5 Эозинофилы – 4,1 Базофилы – 2,3 Производят расчет ИМД: ИМД=(0,8+1,9+11,3+7,2)/(7,8+13,5+4,1+2,3)=0,76 Вывод: ИМД более 0,60. Таким образом, данный показатель свидетельствует об увеличении активности миелоидного дифферона.
Формула изобретения
Способ оценки активности миелоидного дифферона в эксперименте, включающий количественную оценку незрелых и зрелых клеток, принадлежащих к миелоидному дифферону кроветворения, отличающийся тем, что дополнительно учитывают эозинофилы и базофилы, а также их клетки предшественники, начиная с миелобластов, после чего определяют индекс миелоидного дифферона (ИМД) как соотношение суммы нейтрофильных, базофильных и эозинофильных миелобластов, промиелоцитов, миелоцитов, метамиелоцитов к сумме палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, эозинофилов и базофилов и при ИМД менее 0,55 выявляют угнетение активности миелоидного дифферона, а при ИМД более 0,60 выявляют увеличение активности миелоидного дифферона.
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 23.05.2008
Извещение опубликовано: 10.01.2010 БИ: 01/2010
|
||||||||||||||||||||||||||
-излучением. В качестве источника