Патент на изобретение №2311196

(54) СРЕДСТВО “ЛИЗОЛАКТ”, ПОТЕНЦИРУЮЩЕЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ АКТИВНОСТЬ ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине и пищевой промышленности, может быть использовано в онкологии в качестве биологически активной добавки к лечебному питанию в комплексном лечении лейкозов и других опухолей. Изобретение касается средства, потенцирующего противоопухолевую активность цитотоксических препаратов и содержащего в одной дозе лизоцим (лизоцим хлорид, лизоцим гидрохлорид) в количестве 0,5-2,0 г, дополнительно содержащего лактулозу в количестве 2,5-10,0 г. Применение заявленного средства позволяет повысить эффективность лечения онкологических больных, ускорить наступления ремиссии, увеличить длительность ремиссии, уменьшить частоту рецидивирования онкологического заболевания, улучшить переносимость полихимиотерапии, снизить частоту и тяжесть течения госпитальной инфекции, дисбиотических, инфекционных, деструктивных, геморрагических и других осложнений цитостатической терапии, повысить эффективность антибиотиков в лечении инфекционно-воспалительных осложнений у онкологических больных, уменьшить общие затраты на лечение онкологических больных. 2 з.п. ф-лы, 2 табл.

(56) (продолжение):

CLASS=”b560m”GEORGIEVA P., BAROT-CIORBARU R. Correlation between inhibited alternative complement activity and the protective effect induced by Nocardia lysozyme digest (NLD) during Klebsiella pneumoniae infection in mice. – Int J Immunopharmacol, 1996 Aug-Sep; vol.18, №8-9, p.515-519, abstract. SAVA G. et al. Lysozyme stimulates lymphocyte response to ConA and IL-2 and potentiates 5-fluorouracil action on advanced carcinomas. – Anticancer Res. 1995 Sep-Oct; vol.15, №5 В, р.1883-1888, abstract. SAVA G. Lysozyme and cancer: role of exogenous lysozyme as anticancer agent (review). Anticancer Res. 1989 May-Jun; vol.9, №3, p.583-591, abstract. RU 2217009 C2, 27.11.2003.

Изобретение относится к медицине и пищевой промышленности может быть использовано в онкологии в качестве биологически активной добавки к лечебному питанию в комплексном лечении лейкозов и сóлидных (других) опухолей.

Известно применение цитотоксических препаратов в лечении пациентов, страдающих онкологическими заболеваниями. К цитотоксическим препаратам, наиболее широко применяемым в схемах противоопухолевой полихимиотерапии (ПХТ), относится циклофосфамид (ЦФ) – активирующееся микросомальными оксидазами пролекарство, метаболиты которого обладают алкилирующим действием. Для усиления противоопухолевой активности и избирательности действия цитотоксические препараты часто применяют в сочетании с различными модуляторами, которые обычно не обладают самостоятельной противоопухолевой активностью или она слабо выражена. Вместе с тем, модуляторы способны повысить эффективность лечения за счет усиления противоопухолевой активности и избирательности действия цитотоксических препаратов. По своему действию модуляторы могут быть специфичны, т.е. нацеленно изменять активность определенных цитотоксических препаратов (например, фолаты в качестве модуляторов антифолиевых антиметаболитов и фторпиримидинов), или неспецифично влиять на активность различных цитотоксических средств (например, иммуномодуляторы). Среди последних особое место принадлежит лизоциму.

В качестве ближайшего аналога заявляемого средства принят лизоцим JP 55033409 (EISAI CO LTD), 08.03.1980

– Известна способность лизоцима повышать противоопухолевую активность некоторых цитостатиков в эксперименте и клинике [Sava,G et al., 1995; Shionoya,H. et al., 1980], повышать неспецифическую резистентность организма и улучшать переносимость полихимиотерапии [Голосова Т.В. и др., 1980; Щербакова Э.Г., 2000].

Однако потенцирующая активность лизоцима выражена недостаточно, показана в отношении единичных цитостатиков при ограниченном числе солидных метастазирующих опухолей, и остается неизученной его эффективность в качестве модулятора противоопухолевого действия цитотоксических препаратов при лейкозах.

Задачей изобретения является создание высокоэффективного средства, позволяющего улучшить результаты цитостатической терапии при лейкозах и других онкологических заболеваниях.

Использование изобретения позволит получить следующий технический результат:

– повысить эффективность лечения онкологических больных;

– ускорить наступление ремиссии;

– увеличить длительность ремиссии;

– уменьшить частоту рецидивирования онкологического заболевания;

– улучшить переносимость полихимиотерапии;

– снизить частоту и тяжесть течения госпитальной инфекции, дисбиотических, инфекционных, деструктивных, геморрагических и других осложнений цитостатической терапии;

– повысить эффективность антибиотиков в лечении инфекционно-воспалительных осложнений у онкологических больных;

– уменьшить общие затраты на лечение онкологических больных.

Для решения поставленной задачи и достижения технического результата предложено средство, потенцирующее противоопухолевую активность цитотоксических препаратов, которое содержит в одной дозе лизоцим (лизоцим гидрохлорид, лизоцим хлорид) в количестве 0,5-2,0 г, и дополнительно содержит лактулозу в количестве 2,5-10 г.

Технический результат средства достигается за счет синергизма антиоксидантного, детоксицирующего, гепатопротективного эффектов входящих в его состав лизоцима и лактулозы, их корригирующего влияния на микробиоценоз и морфофункциональное состояние иммунной и пищеварительной систем.

– Авторами впервые экспериментально установлены новые свойства и эффекты сочетания лизоцима с лактулозой при длительном пероральном применении после однократного парентерального введения цитостатика:

– увеличение продолжительности жизни и повышение выживаемости животных при асцитной форме лимфомы EL4 (табл.1);

– индукция и накопление в первичном очаге опухоли клеток, ответственных за противоопухолевую резистентность организма (лимфоцитов и макрофагов) (табл.2);

– резкое, а у части животных полное подавление размножения опухолевых (лейкозных) клеток в первичном очаге (асцит, злокачественный выпот) (табл.2);

– замедление распространения опухолевых клеток из первичного очага в органы и ткани (т.е. усиление противоинвазивного и антиметастатического эффектов цитостатика);

– снижение токсического влияния цитостатика ЦФ на органы и ткани организма: уменьшение атрофии иммунокомпететных органов, дистрофических изменений сердца и органов пищеварительной системы; ослабление угнетающего эффекта ЦФ на функциональное состояние фагоцитирующих клеток;

– предотвращение дисбиотических изменений микробиоценоза кишечника.

Заявляемое средство «ЛИЗОЛАКТ» предполагается к выпуску в виде биологически активной добавки к детскому и лечебному питанию, пищевого модуля или перорального лекарственного препарата.

Формы выпуска: 1) – бурая сладкая, вязкая жидкость в стеклянных или пластиковых флаконах емкостью от 100 мл (для индивидуального применения) до 500 мл (для обогащения продуктов лечебного питания в условиях производства); 2) – аморфный или кристаллический порошок с наполнителем (например, молоко сухое обезжиренное) в упаковке из пищевой фольги или других материалов, разрешенных для продуктов детского питания, по 10-30 г для индивидуального применения и по 500-1000 г – an gro для производственных условий.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Заявляемое средство «Лизолакт» включает следующие ингредиенты из расчета на одну суточную дозу:

Пример 2. Заявляемое средство «Лизолакт» достоверно усиливает избирательное потенцирующее влияние лизоцима (лизоцима гидрохлорида) на противоопухолевую активность циклофосфамида (ЦФ), что показано в серии экспериментов на модели острого лимфобластного лейкоза (Т-клеточная лимфома EL4) у самцов мышей-гибридов (C 57 B1/6J×DBA/2)F1 (B6D2F1) 2-3-месячного возраста массой тела 22-24 г. Мыши привиты внутрибрюшинно по 5×10⁴ асцитных опухолевых клеток в день 0. ЦФ вводили внутрибрюшинно, однократно, в день 0 в низкой дозе – 100 мг/кг (контрсупрессорная терапия). Лизоцим гидрохлорид (Лиз) и лактулозу (Лакт) в дозах 100 мг/кг и 115 мг/кг соответственно вводили через рот интрагастрально 1 раз в день, 5-дневными курсами с 2-х суточным интервалом, начиная с третьих суток и до гибели подопытных мышей (примеры 2.1.-2.2.) или в течение 12 дн., начиная со дня 0, через 1 час после введения ЦФ (примеры 2.3 и 2.4.). Разовая доза лизоцима составляла 100 мг/кг; лактулозы – 115 мг/кг. Сроки наблюдения за животными составляли 90 дней.

Пример 2.1. В экспериментах на 137 мышах показано, что без цитостатика ни лизоцим, ни лактулоза, ни их сочетание существенно не влияли на выживаемость мышей при асцитной форме лимфомы. Лизоцим, в отличие от лактулозы, потенцировал противоопухолевую активность ЦФ: выживаемость животных на 90-й день эксперимента составила 11%. Сочетание лактулозы с лизоцимом достоверно усиливало потенцирующий эффект лизоцима в отношении противоопухолевой активности ЦФ: достоверно возросла продолжительность жизни мышей, павших в результате развития лейкоза, и к концу срока наблюдения выжило 33,3% животных (пережили 90 суток без признаков лейкоза).

Результаты трех экспериментов представлены в таблице 1.

Пример 2.2. В опыте на 70 животных противоопухолевый эффект оценивали по нарастанию асцита к 20-м суткам опыта; величина асцита отражалась на увеличении массы тела. Сочетание лизоцима с лактулозой достоверно тормозило развитие опухолевого асцита, способствовало накоплению клеток, участвующих в иммунном ответе, (лимфоцитов, макрофагов) и несколько потенцировало активность циклофосфамида (табл.2).

В опыте 3 в группе ЦФ+ЛМ+ЛЛ на каждую опухолевую клетку приходилось в 6 раз больше макрофагов, чем у нелеченых мышей, и в 4 раза больше, чем у мышей, получавших только ЦФ.

Пример №2.3. Морфологическими исследованиями в экспериментах на 30 мышах показано, что 12-кратное применение лизоцима в сочетании с лактулозой, начиная со дня 0 через 1 час после применения циклофосфамида, значительно усиливало противоопухолевую активность цитостатика. На 17-е сутки эксперимента у животных, получавших указанное сочетание, резко снижалась обсемененность опухолевыми клетками лимфоидных органов (селезенка, тимус, лимфатические узлы), ткани сердца, стенки желудка, брыжейки тонкой кишки и прилегающей к органам жировой клетчатки. Сочетание лактулозы с лизоцимом эффективнее, чем только лизоцим, уменьшало проявления токсического действия циклофосфамида, снижая до минимума морфологические проявления острого лекарственного миокардита, обеспечивая более быстрое восстановление поврежденной цитостатиком и опухолевым процессом структуры ткани лимфоидных органов и эпителия тонкой кишки, хотя и не предотвращало атрофических изменений этих органов.

Пример 2.4. В экспериментах на 110 мышах с помощью теста локального адоптивного переноса показано, что у мышей, которым проводили противоопухолевую контрсупрессорную терапию малой дозой ЦФ (100 мг/кг) в сочетании с лизоцимом и лактулозой, на 12-е сутки значительно возрастало число клеток селезенки, участвующих в обеспечении противоопухолевой резистентности организма. У здоровых мышей-реципиентов, которым вводили внутрибрюшинно взвесь селезеночных клеток от этих мышей-доноров в смеси с клетками лимфомы EL4 (10⁴) в соотношении 50:1, выживаемость составила 66,7% при 16,7% в группах животных, которым вводили клетки селезенки от нелеченых мышей-доноров с лимфомой или доноров, получавших только ЦФ. Это свидетельствует об усилении сочетанием лизоцима с лактулозой индукции клеток селезенки с высокой противоопухолевой реактивностью, угнетающих развитие лимфомы.

Таким образом, на экспериментальной модели лимфобластного лейкоза мышей показано, что заявленное средство – сочетание лизоцима с лактулозой «Лизолакт» достоверно потенцирует противоопухолевую активность цитотоксического препарата циклофосфамида.

Формула изобретения

1. Средство, потенцирующее противоопухолевую активность цитотоксических препаратов, характеризующееся тем, что оно содержит в одной дозе лизоцим или лизоцим хлорид или лизоцим гидрохлорид в количестве 0,5-2,0 г и лактулозу в количестве 2,5-10,0 г.

2. Средство по п.1, характеризующееся тем, что лактулоза применяется в виде лактусана 35-40%-ного сиропа, который добавляют к суточной дозе в количестве 7,1-28,6 мл на одну дозу.

3. Средство по п.1, отличающееся тем, что лактулоза применяется в виде лактусана-концентрата 70% сухого или жидкого, который добавляют к суточной дозе лизоцима в количестве 3,6-14,2 г или 3,6-14,2 мл соответственно.