Патент на изобретение №2306945
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ВЕЩЕСТВ ФЕНОЛЬНОЙ ПРИРОДЫ И ФОСФОЛИПИДОВ
(57) Реферат:
Изобретение относится к области фармакологии и медицины, конкретно к новому комплексному препарату в липосомной форме, характеризующемуся высокой гидрофильностью, улучшенной биодоступностью и терапевтическими свойствами по сравнению со свободными биофлафоноидами и другими веществами фенольной природы. Профилактическая композиция, применяемая для предупреждения или лечения патологических процессов и поддержания высокого уровня функциональной активности организма, включающая комбинации одного или нескольких экстрактов лекарственных растений, содержащих вещества фенольной природы, и фосфолипид, вещества фенольной природы заключены в оболочку из фосфолипида, выбранного из группы: фосфолипиды из бычьего или свиного мозга, или кожи, фосфатидилхолин, фосфатидилсерин, фосфатидилэтаноламин, содержащие одинаковые или различные ацильные группы, яичный лецитин, при этом оболочка выполнена в форме липосом, содержащих холестерол в количестве 11-40%. При этом вещества фенольной природы выбраны из группы: 5,6,7,4
Изобретение относится к области фармакологии и медицины, конкретно к новому комплексному препарату в липосомной форме, характеризующемуся высокой гидрофильностью, улучшенной биодоступностью и терапевтическими свойствами по сравнению со свободными биофлафоноидами и другими веществами фенольной природы. В широко распространенное среди лекарственных растений семейство флавоноидов входит обширный собирательный класс полифенолов. Флавоноидные соединения подразделяются на основные группы флавонов, флавонолов, флаванонов, флаванонолов, катехинов и антоцианов. Флавоноиды обладают широким спектром биологической и антиоксидантной активности. В настоящее время хорошо изучены и задокументированы такие фармакологические свойства флавоноидов, как антиоксидантная, периферическая, вазодилаторная активности, вазопротекторная активность (влияние на хрупкость и проницаемость капилляров), противовоспалительное, антиспазмолитическое, антигистаминное и противоопухолевое действия. Несмотря на многообещающие перспективы клинического применения флавоноидов, их терапевтическая эффективность часто оказывается недостаточной при местном и пероральном применении. При пероральном применении наблюдается слабая абсорбция флавоноидов в кишечнике, обусловленная бактериальной деградацией и формированием не всасывающихся в кишечнике комплексов флавоноидов с другими веществами пищеварительного тракта. Поскольку флавоноиды практически нерастворимы в воде, их парентеральное применение также оказывается затруднительным. Для целей практической медицины несомненную актуальность приобретает поиск путей повышения биодоступности и терапевтической эффективности препаратов, основой которых являются флавоноиды. Одним из таких путей является применение липофильных комплексов флавоноидов с фосфолипидами, разработанных авторами патента США №5043323. Хотя безусловной заслугой авторов является некоторое повышение биодоступности флавоноидов за счет улучшения их абсорбции в кишечнике при применении per os, высокая липофильность комплексов служит серьезным препятствием для парентерального применения препаратов, необходимого для более радикальной терапии ряда патологий. В патенте РФ №2161488 описано применение липофильных комплексов флаволигнанов, представляющих собой смесь силибинина, силидианина и силикристина с натуральными или синтетическими фосфолипидами для терапии опухолей женской половой сферы. Авторам удалось добиться выраженного терапевтического эффекта при пероральном применении препаратов, однако дальнейшее повышение терапевтической эффективности флаволигнанов в данном случае также ограничено высокой липофильностью препаратов, создающей препятствия для их парентерального применения. Наиболее близким техническим решением является профилактическая композиция, применяемая для предупреждения или лечения патологических процессов и поддержания высокого уровня функциональной активности организма, включающая комбинации одного или нескольких экстрактов лекарственных растений, содержащих вещества фенольной природы, и фосфолипид (пат. РФ №2252029). В качестве фосфолипида использовался соевый фосфолипидный комплекс. Таким образом, авторами приведенных выше работ частично решена задача повышения биодоступности флавоноидов за счет увеличения их абсорбции в кишечнике в виде комплексов с фосфолипидами, однако проблема повышения растворимости флаволигнанов в водных растворах с целью создания инъекционных форм остается нерешенной. Изобретательской задачей является создание гидрофильной, липосомной композиции с повышенной биодоступностью, обладающей более высокой терапевтической активностью, способностью к образованию стабильных водных микродисперсий, которая в отличие от ранее предлагаемых липофильных препаратов может быть использована для парентерального введения и обладает более высокой терапевтической активностью. Изобретательская задача решается тем, что предлагается профилактическая композиция, применяемая для предупреждения или лечения патологических процессов и поддержания высокого уровня функциональной активности организма, включающая комбинации одного или нескольких экстрактов лекарственных растений, содержащих вещества фенольной природы, и фосфолипид, вещества фенольной природы заключены в оболочку из фосфолипида, выбранного из группы: фосфолипиды из бычьего или свиного мозга, или кожи, фосфатидилхолин, фосфатидилсерин, фосфатидилэтаноламин, содержащие одинаковые или различные ацильные группы, яичный лецитин, при этом оболочка выполнена в форме липосом, содержащих холестерол в количестве 11-40%. При этом вещества фенольной природы выбраны из группы: 5,6,7,4′-тетраоксифлавон, 5,6,7-триоксифлавон, g-схизандрин, апигенин, астрагалин, ауреузидин, виснагин, виснадин, гесперидин, гиперозид, дезоксисхизандрин, дигидросамидин, дигидросилибин, изоликвиритигенин, изорамнитин, инокостерон, кверцетин, кверцитрин, квинквелозид, келлин, кемпферол, лептозидин, ликвиритигенин, лютеолин, мирицетин, нарингенин, пиранокумарин, розавин, рутин, салидрозид, силидианин, силибинин, силикристин, скополетин, сульфуретин, схизандрин, схизандрол, тилирозид, трицин, умбеллиферон, 6-метокси-7,8-диоксикумарин, фурокумарин, экдистерон, энтеграстероны, 6,7-диоксикумарин и их производные. Данные композиции могут быть получены методами ультразвуковой обработки, экструзии, инжекции эфирных или спиртовых растворов смесей, содержащих компоненты в заявляемых соотношениях. При получении водного раствора предлагаемой композиции образуется стабильная дисперсия микровезикул, которые могут быть использованы для получения инъекционных или инфузионных лекарственных форм. В основе изобретения лежит новая липосомная композиция, которая может содержать одно или несколько веществ фенольной природы или один или несколько содержащих данные вещества экстрактов лекарственных растений и фосфолипиды, отличающаяся способностью к образованию стабильных водных микродисперсий, которая в отличие от ранее предлагаемых липофильных препаратов может быть использована для парентерального введения и обладает более высокой терапевтической активностью. Составы предлагаемой липосомной композиции сведены в таблицу 1.
Аналогично были получены композиции с остальными веществами фенольной природы, указанные выше. Заявляемый препарат, включающий комплексы исходных веществ фенольной природы или содержащих их растительных экстрактов и фосфолипидов, отличается способностью в водных растворах образовывать стабильные дисперсии микровезикул. Стабильность и гидрофильность заявляемого препарата подтверждается отсутствием осадка при длительном хранении, а также данными микроскопии (чертеж). Пример 1. Антиоксидантная активность полученных композиций. Антиоксидантную активность композиций оценивали по их влиянию на генерацию активных форм кислорода у макрофагов, вызванную хризотил-асбестом. В измерительную кювету хемилюминометра помещали 0,85 мл среды, содержащей 110 мМ NaCl, 10 мМ Трис-HCl, рН 7.4, 5 мМ глюкозы, 2.5 мМ MgCl2, 0.65 мМ люминола, рН 7.4. Затем в кювету добавляли 0,1 мл суспензии макрофагов (5·106 клеток/мл) и регистрировали интенсивность хемилюминесценции клеток при 37°С и постоянном перемешивании. Через 5 мин измеряли уровень спонтанной хемилюминесценции макрофагов. Затем в кювету вводили 0,05 мл исследуемых комплексов (концентрация вещества фенольной природы во всех случаях составляла 0,1 мг/мл), а через 3 мин добавляли 0,05 мл физ. раствора, содержащего 0,3 мг хризотил-асбеста. Через 5 мин измеряли максимальный уровень люминесценции макрофагов (ХЛОП). В качестве контрольного образца использовали аналогичную систему, не содержащую исследуемых препаратов (ХЛК). Антиоксидантную активность исследуемых комплексов оценивали в процентах по формуле: Результаты исследования приведены в таблице 2.
Как видно из таблицы 2, антиоксидантная активность веществ фенольной природы или содержащих их экстрактов может быть значительно повышена при включении их в состав заявляемого комплексного препарата. При этом антиоксидантная активность заявляемых комплексных препаратов существенно превышает активность простых смесей веществ фенольной природы с фосфолипидами. Аналогичные результаты были получены при исследовании антиоксидантной активности других вышеперечисленных веществ фенольной природы, входящих в состав комплексных препаратов с фосфолипидами. Пример 2. Специфическая гепатозащитная активность липосомной композиции, включающей силибинин и фосфатидилхолин. Исследование специфической гепатозащитной активности композиций проводили на модели острого токсического гепатита у мышей. В экспериментах были использованы белые беспородные мыши в половозрелом возрасте. Водный раствор препарата вводили внутрижелудочно с помощью зонда в дозе 100 мг/кг по силибинину. В качестве гепатотропного средства использовали парацетамол (модель лекарственного гепатита). Животным вводили препарат впервые за 1 ч до введения парацетамола, а затем еще 5 раз ежедневно. В качестве препарата сравнения использовали простую смесь силибинина и фосфатидилхолина в виде водной суспензии, которую вводили по соответствующей схеме в дозе 100 мг/кг по силибинину. Контрольным животным вводили только парацетамол. Через сутки после последнего введения препаратов животных декапитировали и проводили вскрытие и изучение биохимических показателей крови. Активность аланинаминотрансферазы (АЛАТ) и аспартатаминотрансферазы (АСАТ) определяли по методу Райтмана-Френкеля. Общий белок определяли с помощью биуретового реактива. Относительная масса печени у контрольных животных с гепатитом была увеличена по сравнению со здоровыми интактными животными на 45,6%; у экспериментальных животных этот показатель составлял 23,1% (30,2% при приеме простой смеси). Таким образом, степень выраженности воспалительных процессов у животных, получавших заявленный липосомный комплексный препарат, заметно снижалась. Исследование активности трансаминаз в сыворотке крови показало, что у контрольных животных с гепатитом уровни аланинаминотрансферазы (АЛАТ) и аспартатаминотрансферазы (АСАТ) были повышены по сравнению с интактными животными на 432,9% и 211,5%; у мышей, получавших заявляемый комплексный препарат, эти показатели снижались до 208,6% и 52,3% соответственно (267,3% и 76,0% при приеме простой смеси). Уровень общего белка в сыворотке крови больных гепатитом контрольных мышей снижался до 63,2% (100% – у интактных здоровых животных), в то время как применение заявляемого препарата увеличивало этот показатель до 89,7%. При применении простой смеси уровень общего белка составлял лишь 79,1% от такового для здоровых контрольных животных. Таким образом, применение предлагаемого препарата положительно влияло на дезинтоксикационные функции печени животных с острым лекарственным гепатитом. При этом эффект от комплексного препарата превышал эффект от препарата сравнения (простой смеси силибинина и фосфатидилхолина). Пример 3. Противоопухолевая активность липосомной композиции, включающей экстракты расторопши пятнистой и эхинацеи и соевый лецитин. Исследование противоопухолевой активности композиций проводили на модели меланомы линии В16 у мышей C57BI/6. Для индукции солидных опухолей мышам вводили подкожно клеточную суспензию (2·105 клеток в 0,1 мл физиологического раствора). Экспериментальным животным внутривенно вводили заявляемый комплексный препарат в физиологическом растворе. В качестве препарата сравнения использовали водную суспензию простой смеси, содержащей экстракты расторопши и эхинацеи и соевый лецитин в тех же количествах, вводимую внутрижелудочно через зонд. Препараты вводили один раз в неделю, всего три приема, начиная с 3 дня после прививки опухоли. Каждая экспериментальная группа состояла из шести животных, контрольная – из десяти. Размер солидных опухолей измеряли один раз в 2-3 дня. Объем опухоли вычисляли по формуле Результаты исследования приведены в таблице 3. Как видно из таблицы, противоопухолевый эффект от применения простой смеси был слабовыраженным. В то же время применение заявляемого липосомного комплексного препарата оказывало значительный ингибирующий эффект в отношении роста опухолей, а также приводило к существенному увеличению продолжительности жизни животных по сравнению с контролем.
Таким образом, применение веществ фенольной природы, входящих в состав заявляемого комплексного препарата, значительно увеличивает их противоопухолевый эффект за счет повышенной биодоступности и применения в виде инъекционной формы.
Формула изобретения
1. Профилактическая композиция, применяемая для предупреждения или лечения патологических процессов и поддержания высокого уровня функциональной активности организма, включающая комбинации одного или нескольких экстрактов лекарственных растений, содержащих вещества фенольной природы, и фосфолипид, отличающаяся тем, что вещества фенольной природы заключены в оболочку из фосфолипида, выбранного из группы: фосфолипиды из бычьего или свиного мозга или кожи, фосфатидилхолин, фосфатидилсерин, фосфатидилэтаноламин, содержащие одинаковые или различные ацильные группы, яичный лецитин, при этом оболочка выполнена в форме липосом, содержащих холестерол в количестве 11-40%. 2. Профилактическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что вещества фенольной природы выбраны из группы: 5,6,7,4
РИСУНКИ
PC4A – Регистрация договора об уступке патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение
Прежний патентообладатель:
(73) Патентообладатель:
(73) Патентообладатель:
Договор № РД0041315 зарегистрирован 25.09.2008
Извещение опубликовано: 10.11.2008 БИ: 31/2008
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
-тетраоксифлавон, 5,6,7-триоксифлавон, g-схизандрин, апигенин, астрагалин, ауреузидин, виснагин, виснадин, гесперидин, гиперозид, дезоксисхизандрин, дигидросамидин, дигидросилибин, изоликвиритигенин, изорамнитин, инокостерон, кверцетин, кверцитрин, квинквелозид, келлин, кемпферол, лептозидин, ликвиритигенин, лютеолин, мирицетин, нарингенин, пиранокумарин, розавин, рутин, салидрозид, силидианин, силибинин, силикристин, скополетин, сульфуретин, схизандрин, схизандрол, тилирозид, трицин, умбеллиферон, 6-метокси-7,8-диоксикумарин, фурокумарин, экдистерон, энтеграстероны, 6,7-диоксикумарин и их производные. Средство обладает способностью к образованию стабильных водных микродисперсий, которые в отличие от ранее предлагаемых липофильных препаратов могут быть использованы для парентерального введения и обладают более высокой терапевтической активностью. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 3 табл.
(0% – отсутствие антиоксидантной активности). В качестве препаратов сравнения использовали смеси фосфолипидов с веществами фенольной природы или содержащими их растительными экстрактами.
, где а – короткий, b – длинный диаметр опухоли. Относительный размер опухолей (ОРО) определяли по формуле: 
, где Роп – средний размер опухолей в опытной группе, Рк – средний размер опухолей у контрольных животных. Увеличение продолжительности жизни леченых животных по сравнению с контролем определяли по формуле: 
, где Т – СПЖ леченых животных, дни, С – СПЖ контрольных животных, дни.