Патент на изобретение №2305328
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА
(57) Реферат:
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования ревматоидного артрита. Для чего вводят 0,07-0,08 мл полного адъюванта Фрейнда (ПАФ), после чего организм животного подвергают воздействию иммобилизационного стресса в течение 1 часа ежедневно в период с 14-х по 28-е сутки. Данный способ моделирования ревматоидного артрита воспроизводим в условиях экспериментальной лаборатории. Предлагаемый способ обеспечивает адекватную воспроизводимость модели, исследование условий и механизмов перехода предболезни в болезнь. 2 табл.
(56) (продолжение): CLASS=”b560m”ревматологов, Минск, 1991, 9-11 окт, с.138-139. RHEE SH et al., “Stress management in rheumatoid arthritis: what is the underlying mechanism? “Arthritis Care Res. 2000 Dec; 13(6):435-42. SCHIEL KA. “A proposed psychosomatic etiologic model for rheumatoid arthritis”. Med Hypotheses. 1999 Oct; 53(4):305-14.
Предлагаемый способ относится к области экспериментальной медицины, патофизиологии. Известен способ моделирования ревматоидного артрита (описание изобретения к авторскому свидетельству №1748174 А1). Он осуществляется путем введения животному бычьего сывороточного альбумина и полного адъюванта Фрейнда; последующей электростимуляцией при помощи имплантированных в полости голеностопных суставов и в хвостовую вену электродов. Недостатком данного способа является его сложность, а также отсутствие постепенного поэтапного развития системного воспаления, клиники поражения суставов, характерной для ревматоидного артрита. Формируется скоротечная тяжелая картина альтеративно-пролиферативных изменений с выраженной деструкцией суставов общей продолжительностью 2 недели. Известен также способ моделирования ревматоидного артрита (описание изобретения к авторскому свидетельству №1098027 А), являющийся наиболее близким по своей технической сущности к изобретению. Он осуществляется внутрикожным введением в задние лапки ПАФ (инактивированная культура БЦЖ, 0,4-0,5 мг на 0,9-1,0 мл смеси равных объемов ланолина и вазелина) при предварительном 4-дневном воздействии на организм животного грязевыми аппликациями на зону проекции надпочечников. Одним недостатком указанного способа является трудно выполнимое внутрикожное введение ПАФ в объеме 0,9-1,0 мл в подушечки задних лап. Другой недостаток – развитие клинически выраженной картины адъювантного артрита без фазы предболезни или продромального периода. Нами предлагается способ моделирования ревматоидного артрита путем введения 0,07-0,08 мл полного адъюванта Фрейнда (ПАФ), состоящего из инактивированной культуры БЦЖ (2 мг/мл в масляной среде: 1 ч. ланолина и 30 ч. вазелинового масла) и последующего воздействия одночасового ежедневного иммобилизационного стресса с 14-х по 28-е сутки. Сущность предлагаемого решения состоит в том, что модель ревматоидного артрита воспроизводится под влиянием двух основных факторов: одного – специфического: введение подпороговой дозы ПАФ; второго – неспецифического: воздействие иммобилизационного стресса. Новизна предлагаемого решения заключается в том, что для воспроизведения модели ревматоидного артрита впервые применяется воздействие иммобилизационным стрессом на организм животных, которым предварительно вводится внутрикожно ПАФ в количестве 0,07-0,08 мл (подпороговая доза). Внутрикожное одноразовое введение ПАФ позволяет получить стадию предболезни адъювантного артрита. Применение иммобилизационного стресса на 14-28-е сутки после введения ПАФ, ежедневно, в течение 1 часа приводит к воспроизведению непосредственно болезни с ярко выраженными проявлениями полиартрита. Новизна предлагаемого нами способа свидетельствуют о творческом характере решения, т.е. говорит о соответствии решения критерию “неочевидности”. Технический результат выражается в получении двухэтапной модели ревматоидного артрита: во-первых, внутрикожным введением подпороговой дозы ПАФ; во-вторых, воздействием иммобилизационного стресса с 14-х по 28-е сутки. Технический результат достигается путем внутрикожного введения подпороговой дозы ПАФ с последующим воздействием на организм животного иммобилизационным стрессом. Предлагаемый способ позволяет исследовать условия и механизмы перехода предболезни в болезнь; изучить различные неспецифические патогенные факторы, вызывающие полиартрит, характер и условия их патогенного действия на организм при весьма надежной воспроизводимости. Предлагаемый способ осуществляется следующим образом. Белым лабораторным крысам-самцам средним весом 145 г вводят 0,07-0,08 мл полного адъюванта Фрейнда (состав ПАФ представляет собой инактивированную культуру БЦЖ (2 мг/мл) в масляной среде (1 ч. ланолина и 30 ч. вазелинового масла)) внутрикожно в подушечки задних лап. В течение последующих 14-ти суток у животных 1 раз в неделю регистрировались основные показатели динамики состояния животных: диаметр окружности голеностопных суставов, ректальная и локальная температуры, СОЭ, количество лейкоцитов в периферической крови. С 14-х по 28-е сутки после введения ПАФ крыс подвергали ежедневному иммобилизационному стрессу. Стресс воспроизводили фиксацией крыс на станке в течение 1 часа. На 28-е сутки животных декапитировали. Кровь бралась для анализа ряда биохимических показателей. Приводим примеры конкретного осуществления предлагаемого способа моделирования ревматоидного артрита. Пример 1. 40 белых лабораторных крыс-самцов весом 135-150 г после внутрикожного введения подпороговой дозы ПАФ наблюдались в течение 28 суток. 1 раз в неделю регистрировались основные показатели динамики состояния животных: диаметр 4 окружности голеностопных суставов, ректальная и локальная температуры, СОЭ, количество лейкоцитов в периферической крови. Результаты показали, что к концу 1-й недели применения стресса была отмечена достоверная отрицательная динамика как по местным показателям: диаметр голеностопных суставов увеличился на 70,3%, локальная температура повысилась на 8,2%, так и по общим: повышение СОЭ на 84,4%, количества лейкоцитов на 50,0%. К концу 2-й недели достоверная динамика усилилась, что было отмечено по всем изучаемым показателям воспалительного процесса: увеличение диаметра голеностопных суставов на 75,7%; общей и локальной температур на 1,1 и 10,8%, соответственно; повышение СОЭ на 177,8%, лейкоцитов на 87,2%. Основные результаты исследований приведены в таблице 1. Пример 2. 40 лабораторных белых крыс-самцов средним весом 145 г подвергали ежедневному иммобилизационному стрессу с 14-х по 28-е сутки со дня введения подпороговой дозы ПАФ. Декапитировали на 28-е сутки. Исследовали следующие биохимические показатели крови: общий белок, общий холестерин, АЛТ, ACT, первичные продукты перекисного окисления липидов (диеновые конъюгаты и кетодиены) в сыворотке крови. Группой сравнения служили животные с адъювантным артритом, воспроизводимым введением 0,2 мл ПАФ в подушечки задних лап. У опытных животных к 28-м суткам были отмечены достоверные изменения следующих показателей: снижение общего белка сыворотки крови на 16,7%, общего холестерина на 15,9%, повышение АЛТ на 67,3%, ACT на 23,4%. В группе этих животных была выявлена активация процессов перекисного окисления липидов. Зарегистрировано повышение продуктов перекисного окисления липидов: диеновых конъюгат на 69,6%, кетодиенов на 74,1%. При сравнении опытной группы животных с группой крыс с адъювантной болезнью по диаметру голеностопных суставов не было выявлено достоверной разницы. Основные результаты исследований приведены в таблице 2. Способ моделирования ревматоидного артрита выполним в условиях лаборатории патофизиологического профиля.
Формула изобретения
Способ моделирования ревматоидного артрита путем введения полного адъюванта Фрейнда (ПАФ), отличающийся тем, что введение ПАФ производят в количестве 0,07-0,08 мл (подпороговая доза), после чего организм животного подвергают воздействию иммобилизационного стресса в течение 1 ч ежедневно в период с 14-х по 28-е сутки.
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 22.11.2007
Извещение опубликовано: 10.07.2009 БИ: 19/2009
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
