Патент на изобретение №2304430

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНЪЕКЦИОННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ФОСФОЛИПИДНОГО ПРЕПАРАТА “ФОСФОГЛИВ” ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ОСТРЫХ И ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПЕЧЕНИ

(57) Реферат:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способа получения инъекционной формы фосфолипидного препарата “Фосфоглив” для лечения и профилактики заболеваний печени, содержащего фосфолипиды растительного происхождения, глицирризиновую кислоту или ее соли и углеводы, путем смешения фосфолипидов, глицирризиновой кислоты или ее солей и углеводов в водной среде с последующими гомогенизацией эмульсионно-дисперсионной смеси при давлении 800-1200 бар, фильтрацией и сублимационной сушкой. Препарат стабилен в течение трех лет. 1 табл.

Изобретение относится к области фармацевтики и касается способа получения инъекционной лекарственной формы фосфолипидного препарата “Фосфоглив” для лечения и профилактики острых и хронических заболеваний печени, нарушения липидного обмена, восстановления функции печени после интоксикации, содержащего растительные фосфолипиды, глицирризиновую кислоту или ее соли и вспомогательные вещества.

Известно, что патологические процессы в печени при различных заболеваниях сопровождаются нарушением структуры и функции мембранных систем гепатоцитов. Повреждение мембран обусловлено нарушением липидного бислоя за счет вовлечения липидов в процессы перекисного окисления и воздействия на них эндогенных фосфолипаз. Изменение физико-химических свойств липидов приводит к нарушению структуры липидного матрикса биомембран и к потере их барьерной функции, что сопровождается инактивацией мембранных ферментных систем.

В ряде исследований, в том числе и в ГУ НИИ БМХ РАМН, было показано, что наиболее перспективным в плане использования фосфолипидов для восстановления поврежденных мембран гепатоцитов являются фосфолипиды растительного происхождения, которые имеют в своем составе незаменимые жирные кислоты (линолевую и линоленовую). Это делает их более жидкими, чем обычный мембранный фосфатидилхолин, позволяя выполнять роль “мембранного клея”, способного репарировать дефекты поврежденных клеточных мембран. Механизм действия растительных фосфолипидов связан с включением в мембраны полиненасыщенного фосфатидилхолина, способного восстанавливать структуру и функцию поврежденных клеток.

Известен ряд препаратов на основе фосфолипидов, применяемых как в виде капсул, драже или таблеток, так и в виде инъекционных форм. Одним из таких препаратов, который уже более 40 лет применяется в практическом здравоохранении для восстановления функций печени является “Эссенциале” и более современный “Эссенциале Н” (Франция-Германия) [1]. “Эссенциале” содержит смесь фосфолипидов, ненасыщенных жирных кислот и витаминов.

В технологии производства инъекционной формы “Эссенциале” для растворения жироподобной фосфолипидной субстанции в качестве детергента используют соль дезоксихолевой кислоты, обладающей цитотоксическим действием и оказывающей негативное воздействие на клетку.

Известен способ получения инъекционной формы фосфолипидного препарата “Фосфоглив” для лечения и профилактики заболеваний печени, содержащего растительные фосфолипиды с высоким содержанием фосфадитилхолина (75-98%), глицирризиновую кислоту или ее соли и вспомогательные вещества [2]. Используемая в качестве эмульгатора глицирризиновая кислота или ее соль помимо мягкого детергентного действия обладает гепатопротекторным противовоспалительным, противоаллергическим и противовирусным свойствами.

Описано два способа получения инъекционной формы препарата “Фосфоглив”.

Первый способ предусматривает смешение спиртового раствора фосфолипида с водными растворами глицирризиновой кислоты или ее соли и мальтозы с последующей обработкой полученной смеси ультразвуком, фильтрацией, отгонкой растворителя и лиофилизацией.

Второй способ заключается в смешение жироподобного фосфолипида с водными растворами соли глицирризиновой кислоты и мальтозы. Полученную смесь подвергают пяти циклам щелевой гомогенизации при давлении 600 бар с последующей фильтрацией, отгонкой растворителя и лиофилизацией.

В указанных известных способах получения инъекционной формы фосфолипидной композиции во всех случаях получают неоднородные и относительно большие по размеру липосомальные частицы, агрегирующие в растворе при хранении. Лиофильно высушенный порошок препарата при хранении в течение 4-6 месяцев при растворении мутнеет, не сохраняет липосомально/мицелярную структуру, частицы укрупняются. Отмечено также увеличение содержания в препарате окисленных фосфолипидов, в частности лизофосфатидилхолина. Поэтому срок хранения такого препарата не превышает трех месяцев. Весь технологический процесс очень сложен в исполнении и не позволяет получать стабильные при длительном хранении, однородные, по размеру не превышающие 30-50 нм липосомально/мицелярные частицы, восстанавливающие свою структуру при растворении в воде после длительного хранения.

Необходимо также отметить, что известные способы получения инъекционной формы фосфолипидной композиции не предусматривают предохранение фосфолипидов в процессе технологической обработки от окисления. При гомогенизации эмульсия разогревается до 90°С, что ускоряет процесс окисления и образования лизофосфатидилхолина. Согласно нормативной документации содержание этого соединения в готовом препарате не должно превышать 3%. Анализ образцов, полученных известным способом, показал, что уровень лизофосфатидилхолина в них превышал 8%, что указывало на низкое качество препарата. В силу указанных причин препарат не мог быть разрешен к использованию в медицинской практике.

Задачей настоящего изобретения является устранение указанных недостатков и разработка технологии получения инъекционной формы лекарственного препарата “Фосфоглив” с содержанием фосфатидилхолина 75-98%, содержащего глицирризиновую кислоту или ее соли и вспомогательные вещества при суммарном содержании фосфолипидов и глицирризиновой кислоты или ее соли 2-80 мас.% и массовом соотношении фосфолипидов и глицирризиновой кислоты не более 4:1.

В соответствии с изобретением описывается способ получения инъекционной формы фосфолипидного препарата для лечения и профилактики заболеваний печени, нарушения липидного обмена и восстановления функции печени после интоксикации, содержащего растительные фосфолипиды с содержанием фосфатидилхолина 75-98%, глицирризиновую кислоту или ее фармацевтически приемлемые соли и вспомогательные вещества при суммарном содержании фосфолипидов и глицирризиновой кислоты или ее соли 2-80 мас.% и массовом соотношении фосфолипидов и глицирризиновой кислоты не более 4:1, путем смешения эмульсии растительных фосфолипидов в водном растворе глицирризиновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли с водным раствором углевода, в качестве которого используют лактозу, мальтозу и/или изомальтозу, при рН 6,5-7,5, и полученную эмульсионно-дисперсионную систему подвергают 5-22 циклам гомогенизации при комнатной температуре и давлении 800-1200 бар с последующими предварительной фильтрацией, стерилизующей фильтрацией и сублимационной сушкой.

Получают мелкодисперсные, однородные и стабильные липосомальные частицы размером 20-100 нм, из которых 95% составляют частицы размером 20-35 нм, что позволяет получать стабильный раствор, наиболее пригодный для внутривенного введения. Однородность частиц обеспечивает высокую прозрачность и стабильность раствора. Частицы восстанавливают свою структуру при растворении в воде после трехлетнего хранения.

Изобретение иллюстрируют следующие примеры.

Пример 1.

Раствор А: 6,9 г динатриевой соли глицирризиновой кислоты растворяют в воде для инъекций и доводят объем до 90 мл. Добавляют 2,25 мл 1 н. NaOH (для достижения в конечном объеме 300 мл рН 6,7-7,5). Добавляют 16,5 г измельченного фосфолипида с содержанием фосфатидилхолина 80%. Растворение проводят на высокоэффективной пропеллерной мешалке в токе инертного газа (азот).

Раствор Б: Растворяют 59,4 г мальтозы в воде для инъекций, тщательно перемешивают на мешалке до тех пор, пока раствор не станет прозрачным, и доводят конечный объем до 150 мл. Можно добавить немного больше воды, чтобы (V раствора А+V раствора Б)300 мл. Смешивают растворы А и Б. Доводят общий объем смеси до 300 мл водой для инъекций.

Гомогенизация раствора

Пропускают раствор через гомогенизатор (модель Mini-Lab 7.30 VH, Rannie, Дания) в течение 60 минут под давлением 800 бар. Охлаждение осуществляют через обратный холодильник. На этом этапе получают гомогенные по размеру липосомы диаметром 40-60 нм. Светопропускание (прозрачность) образца при 660 нм после гомогенизации не менее 60%.

Предфильтрация

Гомогенизированный раствор отфильтровывают под давлением азота 2 атм через мембрану (“Владипор”) 3-4 мкм. Прозрачность раствора при 660 нм не менее 60%.

Стерилизующая фильтрация

Стерилизующую фильтрацию проводят в стерильной комнате в ламинаре (Ламинарбокс ЛБ-Г, Россия) на приборе напорного фильтрования (ПНФ-90, ЗАО “Мембраны”, Россия) через фильтр (“Владипор”) диаметром 0,2 мкм под давлением 3 атм. Прозрачность раствора 65%.

Стерильный розлив во флаконы

Дозатором в ламинарном потоке стерильного воздуха разливают раствор по 10 мл в темные флаконы и замораживают при -25°С.

Сублимационная сушка водного раствора

Замороженные образцы подвергают сублимационной сушке (LSL SECFROID, LYOLAB F, Германия) в течение 48 часов. Получают однородную липосомальную массу плотной консистенции. Флаконы с препаратом укупоривают резиновыми пробкам и закатывают алюминиевыми колпачками. Полученные образцы после трехлетнего хранения при комнатной температуре восстанавливают свою структуру при растворении в воде. Данные остальных примеров приведены в таблице.

Описываемый способ позволяет получить стабильный, высокоэффективный препарат с оптимальным размером наночастиц, который может использоваться в клинической практике в комплексном лечении различных заболеваний, сопровождающихся нарушениями функции печени.

Проведенные клинические исследования показали, что полученный в соответствии с изобретением препарат “Фосфоглив” лиофилизат для приготовления раствора для внутривенного введения обладает высокой эффективностью при лечении заболеваний печени различной этиологии. Внутривенная форма препарата хорошо переносится больными, не дает побочных реакций и приводит к заметному улучшению лабораторных показателей и общего состояния больных. Отмечено позитивное влияние препарата на репликативную активность вирусов гепатитов В и С, а также на иммунный и интерфероновый статусы, что позволяет рекомендовать его для использования в лечении хронических вирусных гепатитов и других заболеваний, при которых отмечается поражение печени.

Источники информации

1. Машковский М.Д. Лекарственные средства, М., 2001, т.1, стр.508.

2. RU 2133122, C1, A61K 31/685, 20.07.97.

Формула изобретения

Способ получения инъекционной лекарственной формы фосфолипидного препарата для лечения и профилактики заболеваний печени, нарушения липидного обмена и восстановления функции печени после интоксикации, содержащего растительные фосфолипиды с содержанием фосфатидилхолина 75-98%, глицирризиновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль и углевод, при суммарном содержании фосфолипидов и глицирризиновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли 2-80 мас.% и массовом соотношении фосфолипидов и глицирризиновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли не более 4:1, путем смешения эмульсии растительных фосфолипидов в водном растворе глицирризиновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли с водным раствором углевода, в качестве которого используют лактозу, мальтозу и/или изомальтозу, при рН 6,5-7,5 и полученную эмульсионно-дисперсионную систему подвергают 5-22 циклам гомогенизации при давлении 800-1200 бар с последующими предварительной фильтрацией и стерилизующей фильтрацией и сублимационной сушкой.