Патент на изобретение №2303058

(54) СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ, ОСЛОЖНЕННЫХ ДИСБАКТЕРИОЗОМ “БИОБАЛАНС-К”

(57) Реферат:

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к биологически активным комплексам, препаратам для медицины, сельского хозяйства и пищевой промышленности, и может быть использовано для приготовления лечебно-профилактических препаратов на основе живых лакто- и бифидобактерий. Средство содержит чистую культуру Lactobacillus acidophilus №100 АШ, чистую культуру Bifidobacterium bifidum штамм №1, чистую культуру Lactobacillus rhamnosus ВКПМ В-9072 и топинамбур в соответствующих количествах. Каждая из культур лиофилизирована в среде культивирования с добавлением сахарозо-желатино-молочной среды. Средство апробировано с положительным результатом в Московском НИИ педиатрии и детской хирургии в 2005 г. 1 табл.

Предлагаемое изобретение относится к области биотехнологии, а именно к биологически активным комплексам, препаратам для медицины, сельского хозяйства и пищевой промышленности, и может быть использовано для приготовления лечебно-профилактических препаратов на основе живых лакто- и бифидобактерий.

Широко известны средства, направленные на восстановление нормального биоценоза кишечника, в частности пробиотики – бактерийные препараты из живых микроорганизмов – представителей облигатной микрофлоры кишечника – это колибактерин, лактобактерин, бифидумбактерин, бификол и т.п. сухие препараты [1].

Известно также средство для лечения кишечных инфекций, осложненных дисбактериозом, включающее компоненты, мас.%:

Наиболее близким к предложенному средству является комплексный пробиотик “Цитродофилус” для коррекции микробной экологии пищеварительного тракта, содержащий ацидофильные бактерии, бифидобактерии с титром 10⁹ КОЕ/капсулу и топинамбур [3].

В задачу наших исследований входило создание высокоэффективного средства для профилактики и лечения кишечных инфекций, осложненных дисбактериозом, содержащего комплекс натуральных биологически активных биологических продуктов, обладающих наряду с противоинфекционным – антидисбактериозным действием, способностью к быстрой нормализации деятельности желудочно-кишечного тракта и повышением неспецифической резистентности организма.

Данная задача была достигнута тем, что средство для лечения кишечных инфекций, осложненных дисбактериозом, содержит при следующем соотношении компоненты, мас.%:

Данный штамм размножается на всех питательных средах, используемых для культивирования пробиотиков, в основе которых содержится гидролизат обрата молока и казеина. Выращивание культуры проводят в ферментерах. Контролируют все параметры процесса. Культивирование проводят в несколько этапов, по схеме пробирка колба бутыль ферментер, при соблюдении правил асептики. Каждый этап подвергается контролю на микробиологическую чистоту. Жидкий препарат после контроля разливают в стерильные флаконы, укупоривают, этикируют, маркируют. Для получения капсул и таблеток жидкий препарат помещают в сахарозо-желатиновую среду и подвергают сублимации, при параметрах Т°С -40 – +25°C в течение 48 часов. Сухой препарат подвергается контролю на микробиологическую чистоту. Сухая биомасса смешивается с наполнителями и фасуется в таблетки и капсулы. Готовый продукт контролируется по всем необходимым параметрам.

Предлагаемое средство, названное нами «БИОБАЛАНС – К», представляет собой смесь из микробной массы живых, антагонистически активных Lactobacillus acidophillus штамм №100 АШ, Lactobacillus rhamnosus штамм СТ-2-05, ВКПМ В-9072, Bifidobacterium bifidum, штамм №1, лиофилизированных в среде культивирования с добавлением сахарозо-желатино-молочной среды (СЖМ), а также с добавлением топинамбура, помещенных в капсулы или сформованных в таблетки.

Исследование различных композиций показало, что наиболее выраженный эффект достигается при использовании следующего состава ингредиентов (мас.%). Форма выпуска 2 вида: 1 – таблетки, 2 – капсулы.

Для производства таблеток используют следующие компоненты, мас.%:

Для производства капсул используют следующие компоненты: мас. (%):

Штамм СТ-2-05 Lactobacillus rhamnosus депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ФГУП ГосНИИ Генетика под № ВКПМ В-9072.

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ:

– Палочки (0,3-0,5)×(1,5-2) мкм, располагаются короткими цепочками или хаотично.

– Неподвижные споры, капсул не образуют.

– Окраска по Грамму – положительная.

– Отношение к кислороду – микроаэрофил.

– Отношение к рН: пределы (3-7,4), оптимум (5,05±0,5).

– Отношение к температуре: термофил, пределы (15-45)°С.

– Антигенные свойства: Групповой антиген – С.

СПОСОБНОСТЬ К СБРАЖИВАНИЮ УГЛЕВОДОВ:

– Образует при сбраживании L+ молочную кислоту.

– Не образует газа из глюкозы.

– Сбраживает галактозу, лактозу, мальтозу, манит, сахарозу, сорбит, фруктозу, глюкозу, рамнозу.

– Не сбраживает арабинозу, рацинозу, мелибиозу, ксилозу.

– Активность кислотообразования – не менее 120°Т.

УСТОЙЧИВОСТЬ К АНТИБИОТИКАМ.

– Устойчив к олеандомицину, полимиксину, ристомицину, стрептомицину.

– Слабо чувствителен – к канамицину, неомицину, фузидину.

– Предельные ингибирующие концентрации мкг/мл: гентамицин – 600, левомицетин – 500, мономицин – 600, стрептомицин – 700, полимиксин – 10000, канамицин – 1000, тетрациклин – 450.

– Антагонизм: зона подавления роста (мм)

Sh. Sonnei 5063-19, Sh. Flexneri 170-21, Sh. Flexneri 377, Coli 157-13, St. aureus 209-11, Pr. Vulgaris 177-20, Pr. mirabilis 3177-12.

Рекомендуемая среда и условия культивирования: на основе гидролизата обрата молока (ГОМ) с добавлением автолизата дрожжей, солей и глюкозы. Рекомендуемый метод хранения – лиофилизированная культура, температура не выше 4°С.

КУЛЬТУРАЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА:

Продукт, синтезируемый штаммом – L+ молочная кислота.

– Продуктивность штамма – 2,75% в колбах.

– Способность определения активности штамма с указанием метода – титрование, среда МРС-5.

– Способ, условия и состав сред для размножения штамма – среда Блаурока или МРС-5, полужидкая.

– Оптимальные условия и состав среды для ферментации – питательная среда на основе гидролизата обрата молока (ГОМ) с добавлением ростовых добавок экстракта дрожжей, глюкозы и солей.

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ШТАММА:

– Мутации, делеции, инверсии – нет. Плазмиды – нет.

– Профаги – нет.

Прочие генетические особенности – нет.

– Штамм не является зоопатогенным, фитопатогенным, не представляет опасности.

Микроскопические показатели предложенного средства должны соответствовать требованиям Сан ПиН 2.3.2.1078-01 (индекс 1.10.10.1), отражены в таблице.

Предложенное средство позволяет нормализовать ферментативное расщепление пищи, тем самым нормализовать функции желудочно-кишечного тракта. Бифидо- и лактобактерии, входящие в состав средства, синтезируют эндогенные витамины, участвуют в модуляции иммунитета, осуществляют санитарную очистку кишечника, подавляют рост и размножение патогенных микроорганизмов.

Лактобактерии рамнозус стимулируют колонизационную резистентность пищеварительного тракта, длительно колонизируют слизистые кишечника человека. Позитивное действие заключается в лечебно-профилактическом эффекте при острых диареях различного происхождения, вызванных бактериальными и вирусными агентами; дисбактериозах, вызванных применением антибиотиков и другими факторами. Позитивный эффект выявляется при гиперхолестеринемии, аллергиях, новообразованиях и при иммунодефицитных состояниях. Включение топинамбура, содержащего набор микроэлементов, витаминов и инулин, который является пребиотическим средством, способствующим восстановлению собственной нормофлоры – бифидобактерий, позитивно влияет на поджелудочную железу, ее функциональную активность, снижает уровень глюкозы в крови, положительно воздействует на гипоталамические структуры, уменьшает в толстой кишке содержание канцерогенов и гнилостных субстанций.

Предложенное средство апробировано с положительным результатом в Московском НИИ педиатрии и детской хирургии в январе-марте 2005 г.

Задачей испытаний являлась оценка клинической эффективности БАД, названной нами «Биобаланс – К», при коррекции дисбиоза кишечника у больных с разной патологией ЖКТ.

В группу наблюдения вошли 25 пациентов (14 мальчиков и 11 девочек) от 2-х до 17 лет, с разной гастроэнтерологической патологией, осложненной дисбактериозом кишечника.

Обследование включало клиническую оценку статуса, лабораторные и другие методы исследования. Больные основной группы – 10 человек (6 мальчиков и 4 девочки) получали «Биобаланс – К».

В контрольную группу были включены 15 детей (9 мальчиков и 6 девочек) от 3-х до 17 лет, с различной патологией ЖКТ и дисбактериозом. Пациенты этой группы получали одно из известных пробиотических средств (флорадофилюс, линекс, пробифор).

Лечение обеих групп проводилось 14 дней, дети получали возрастные дозировки. Контрольные исследования проводились через 1 и 2 месяца после окончания лечения.

Результаты клинических испытаний показали, что «Биобаланс – К» обладает выраженным пробиотическим действием. Клинический эффект от приема «Биобаланса – К» в большинстве случаев является более выраженным и стойким.

Предложенное средство найдет применение в медицине как биологически активный комплекс, содержащий нормофлору человека для лечения больных с дисбактериозом, как БАД в качестве профилактического средства, входящего неотъемлемой частью в состав функционального питания здорового человека.

Просим предложенное средство назвать «Биобаланс – К» согласно утвержденной документации.

Источники информации

1. Кн. В.А.Княжева «Дисбактериоз. Теория и практика», Нижний Новгород, 1999, с.70-73.

2. Патент РФ №2076716, кл. А61К 35/20, 35/66, 1997.

3. ШЕНДЕРОВ Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Пробиотики и функциональное питание, т.111. M.: Грантъ, 2001, с.207.

Формула изобретения

Средство для лечения кишечных инфекций, осложненных дисбактериозом, характеризующееся тем, что оно содержит при следующем соотношении компонентов, мас.%:

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 11.06.2008

Извещение опубликовано: 10.10.2009 БИ: 28/2009

NF4A – Восстановление действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение

Дата, с которой действие патента восстановлено: 10.10.2009

Извещение опубликовано: 10.10.2009 БИ: 28/2009