|
(21), (22) Заявка: 2006103653/13, 08.02.2006
(24) Дата начала отсчета срока действия патента:
08.02.2006
(46) Опубликовано: 10.07.2007
(56) Список документов, цитированных в отчете о поиске:
RU 2007072 С1 15.02.1994. EUNICE OLIVEIRA CALVETE at al “Sucrose concentration on in vitro rooting of strawberry plants”, Hortic. bras., v.20, n.2, jun. 2002. US 2002168770 14.11.2002.
Адрес для переписки:
127276, Москва, ул. Ботаническая, 35, Институт физиологии растений им. К.А. Тимирязева РАН, патентная служба
|
(72) Автор(ы):
Высоцкая Ольга Николаевна (RU), Алексеенко Лилия Владимировна (RU)
(73) Патентообладатель(и):
Институт физиологии растений им. К.А. Тимирязева РАН (RU)
|
(54) СПОСОБ ПОДГОТОВКИ РАСТЕНИЙ ЗЕМЛЯНИКИ САДОВОЙ (FRAGARIA L.), РАЗМНОЖЕННЫХ IN VITRO, К УСЛОВИЯМ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ EX VITRO
(57) Реферат:
Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству, а именно к садоводству, и может быть использовано в питомниководстве для подготовки растений, размноженных in vitro, к условиям культивирования ех vitro. Размножают in vitro растения земляники садовой (Fragaria L.), выдерживают на питательной среде с 4-10% сахарозы 20-60 дней в темноте при температуре от 1 до 10°С и переносят подготовленные растения в почвенный субстрат. Изобретение позволяет эффективно подготовить растения, размноженные in vitro, к росту и развитию ex vitro и увеличить показатели генеративной и вегетативной продуктивности растений земляники садовой (Fragaria L.) в первые годы культивирования в грунте. 2 ил., 2 табл.
Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству, а именно к садоводству, и может быть использовано в питомниководстве для подготовки растений, размноженных in vitro, к условиям культивирования ex vitro.
Кроме того, после культивирования на питательных средах дополненными высокими концентрациями сахаров существенно возрастает резистентность растительного материала к глубоким стрессовым воздействиям (Высоцкая О.Н., Попов А.С. “Способ криосохранения меристем, изолированных из растений земляники садовой (Fragaria L.) in vitro” / Патент №2220563, C1, 2004).
Недостатком этого способа является то, что в нем предлагают использовать редуцирующий сахар: глюкозу, которая легко окисляется и вводить которую в питательную среду желательно через специальные фильтры после этапа автоклавирования (холодный способ стерилизации). Данный способ можно считать аналогичным решением поставленной перед нами задачи.
Недостатком данного способа мы считаем отсутствие эффекта стимуляции формирования генеративных органов у растений земляники ex vitro.
Задачей, на решение которой направлено изобретение, является такая подготовка растений, размноженных in vitro, которая позволяет им не только успешно адаптироваться к нестерильным условиям, но и быстро переходить ex vitro в генеративное состояние.
Поставленная задача решается тем, что перед перенесением в почвенный субстрат размноженные in vitro растения помещают на агаризованную питательную среду с 4-10% сахарозы, выдерживают 20-60 дней в темноте при температуре от 1 до 10°С.
Суть настоящего изобретения в том, что предлагаемый способ подготовки размноженных in vitro растений земляники садовой (Fragaria L.) к условиям ex vitro, заключающийся в помещении этих растений на агаризованную питательную среду с 4-10% сахарозы и выдерживании их 20-60 дней в темноте при температуре 1-10°С, позволяет не только подготовить растения к пересадке в нестерильные условия, но и стимулировать ex vitro вегетативную и генеративную продуктивность этих растений (таблица 1; таблица 2, приложение: фиг.1, фиг.2).
Изобретение иллюстрируется следующим примером:
Пример 1
Полученные в результате размножения растения с корнями или же без корней in vitro на агаризованной питательной среде Мурасиге и Скуга без индолилуксусной кислоты и бензиламинопурина, дополненной 4-10% сахарозы, помещают на 20-60 дней в темноту при температуре 1-10°С.
После этого растения земляники пересаживают в почвенную смесь в теплице, а затем переносят в полевые условия.
Из высаженных в почвенную смесь растений более 95% оставались живыми и в теплице до перенесения в полевые условия формировали не только усы, но и цветки (Приложение, фиг.2).
После перенесения в полевые условия данные растения земляники образовывали генеративных органов на 55-56% больше, а вегетативных органов на 38-77% больше, чем те, которые перед перенесением в нестерильные условия культивировали на среде с 3% сахарозы (табл.1, табл.2).
После перенесения в полевые условия данные растения земляники образовывали на 67-68% больше генеративных органов, а вегетативных органов на 43-92% больше, чем те, которые перед перенесением в нестерильные условия культивировали на среде с 3% сахарозы (табл.1, табл.2).
Таблица 1. Влияние способа подготовки к высадке в грунт растений in vitro на генеративную продуктивность ex vitro земляники садовой (Fragaria L.) сорта Роксана. |
Вариант |
Среднее количество цветоносов на одно растение |
Среднее количество генеративных образований на одно растение |
Контроль* |
18,0±2,2 (100%) |
78,9±9,8 (100%) |
Способ** |
28,0±2,2 (156%) |
122,2±9,7 (155%) |
* Подготовка растений in vitro на среде с 3% сахарозы при 20-28°С и 16-часовом дне. |
** Подготовка растений in vitro 20-60 дней в темноте при 1-10°С на среде с 4-10% сахарозы. |
Таблица 2. Влияние способа подготовки к высадке в грунт растений in vitro на вегетативную продуктивность ex vitro земляники садовой (Fragaria L.) сорта Роксана. |
Вариант |
Среднее количество листьев |
Среднее количество усов |
Среднее количество розеток |
2003 |
2004 |
2003 |
2004 |
2003 |
2004 |
Контроль* |
22,9±2,8 (100%) |
50,6±5,5 (100%) |
10,0±1,3 (100%) |
– |
24,1±3,8 (100%) |
34,5±4,8 (100%) |
Способ** |
35,9±3,0 (157%) |
70,0±7,4 (138%) |
17,7±1,5 (177%) |
– |
37,3±4,4 (155%) |
47,6±5,6 (138%) |
* Подготовка растений in vitro на среде с 3% сахарозы при 20-28°С и 16-часовом дне. |
** Подготовка растений in vitro 20-60 дней в темноте при 1-10°С на среде с 4-10% сахарозы. |
Техническим результатом заявленного способа является то, что пребывание in vitro 20-60 дней в темноте при температуре от 1 до 10°С на питательной среде с 4-10% сахарозы стимулирует генеративную и вегетативную продуктивность размноженных in vitro растений земляники садовой (Fragaria L.) в первые годы культивирования ex vitro (табл.1, табл.2) и даже ускоряет их цветение (фиг.1, фиг.2). Этот эффект можно проиллюстрировать тем, что в расчете на одно растение возрастают следующие показатели: среднее количество цветоносов на 56%, среднее количество генеративных образований на 55%, среднее количество листьев на 38-57%, среднее количество усов на 77%, а среднее количество розеток на 38-55%.
Формула изобретения
Способ подготовки размноженных in vitro растений земляники садовой (Fragaria L.) к условиям культивирования ex vitro, включающий подготовку растений in vitro, отличающийся тем, что растения выдерживают на питательной среде с 4-10% сахарозы 20-60 дней в темноте при температуре от 1 до 10°С, а затем переносят в почвенный субстрат.
РИСУНКИ
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 09.02.2008
Извещение опубликовано: 10.11.2009 БИ: 31/2009
|
|