Патент на изобретение №2297215

(54) АНТИОКСИДАНТНОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ КАТАРАКТЫ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области медицины. Антиоксидантное средство для лечения катаракты содержит 2,2% масляного раствора ионола. Средство позволяет добиться стабилизации и регресса помутнений хрусталика, значительно снизить активность перекисного окисления липидов хрусталика, несколько увеличить содержание восстановленного глутатиона, предотвратить окисление восстановленных белковых тиоловых групп и уменьшить емкости антиоксидантной защиты хрусталика. Применение раствора ионола предупреждает истощение активности глутатион-пероксидазы, способствует поддержанию активности фермента на высоком уровне; способствует определенному восстановлению активности глутатион-редуктазы после оксидативного стресса; увеличивает активность глутатион-8Н-трансферазы хрусталика, средство обеспечивает стабилизацию и регресс формирующейся катаракты. 5 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакотерапии глазных болезней, и может быть использовано для консервативного лечения катаракты,

В этиопатогенезе катаракты одним из ведущих моментов является патологическая активация свободнорадикального окисления липидов мембран и других биополимеров хрусталика (1). В обеспечении прозрачности хрусталика большую роль играет восстановленная форма глутатаона, поддерживая белковые тиоловые группы в восстановленном состоянии (2).

Для консервативного лечения катаракты используются капли “Офтан Катахром”. Препарат оказывает антиоксидантное действие, улучшает метаболизм и трофику тканей глаза (3). Однако ни один из компонентов препарата не является прямым антиоксидантом (4). По данным ряда исследований, препарат не обладает высоким антикатарактальным действием, а эффективен для тканей, расположенных впереди хрусталика (3, 5, 6). Состав препарата: цитохром С – 675 мкг, аденозин – 2 мг, никотинамид – 20 мг, натрия сукцинат – 1 мг, бензалкония хлорид – 40 мкг в 1 мл готового препарата.

В глазной практике местно применяется масляный раствор классического фенольного антиоксиданта – -токоферола ацетата. Данных о влиянии этой лекарственной формы на метаболизм хрусталика нет. Эфир -токоферола не обладает антиоксидантной активностью, а приобретает ее только после гидролиза сложноэфирной связи. В связи с низкой активностью гидролитических ферментов в хрусталике, значительными индивидуальными различиями активности гидролаз целесообразным является использование лекарственных форм активных соединений для достижения целевого эффекта в ткани хрусталика. Доказанная дозозависимая инверсия антиоксидантного эффекта в прооксидантный ряда антиоксидантов определяет необходимость подбора дозы лекарственного препарата для конкретной ткани (4).

Ионол (2,6-ди-трет-бутил-4-метилфенол) – синтетический пространственно затрудненный фенол – обладает доказанной высокой антирадикальной и антиоксидантной активностью в системах in vivo и in vitro, способен задерживать помутнение хрусталика и увеличивать активность глутатион-SH-трансферазы эпителия хрусталика в системе in vitro в условиях присутствия в инкубационной среде 4-гидроксиноненаля (7).

Ионол применяется в клинической практике для уменьшения зоны некроза в острый период инфаркта миокарда, для ускорения рубцевания язв желудка, при раке мочевого пузыря в виде 10% суспензии местно.

Цель изобретения – разработка местного глазного лекарственного препарата с высокими антиоксидантными свойствами, применение которого в эксперименте вызовет стабилизацию и регресс формирующейся катаракты.

Сущность изобретения состоит в том, что для лечения катаракты в эксперименте применен 2,2% масляный раствор ионола в виде инсталляций в конъюнктивальную полость глаза 3 раза в день.

Концентрация раствора была выбрана экспериментальным путем с учетом данных об эффективной антиоксидантной концентрации ионола в системах in vivo и in vitro, данных о фармакокинетике ионола и липотропных глазных лекарственных форм (7, 8). 25 кроликов были разбиты на 5 групп: 1) инсталляции растворителя; 2) инсталляции 22% раствора ионола; 3) инсталляции 10% раствора ионола; 4) инсталляции 2,2% раствора ионола; 5) инсталляции 0,22% раствора ионола. Подопытные животные получали инсталляции указанных растворов 3 раза в день с интервалом в 6 часов в оба глаза в течение 30 дней. Критерием выбора эффективной концентрации было достоверно значимое увеличение лаг-фазы накопления малонового диальдегида (что является мерой емкости антиоксидантной защиты ткани) в гомогенате хрусталика и позитивное изменение активности глутатион-зависимых антиоксидантных ферментов хрусталика. В результате проведенных биохимических анализов хрусталиков подопытных животных инстилляции 2,2% раствора ионола достоверно значимо увеличили продолжительность лаг-фазы накопления малонового диальдегида с 42,5 мин до 52,5 мин; увеличили активность глутатион-SH-трансферазы с 16 ЕД/г белка до 27,5 ЕД/г белка, глутатион-редуктазы с 9,4 ЕД/г белка до 13,2 ЕД/г белка. Основываясь на полученных данных, мы предположили получение достаточно выраженного антиоксидантного и антикатарактального эффекта 2,2% масляного раствора ионола на лабораторной модели катаракты, полученной путем химической индукции свободнорадикального окисления биополимеров тканей глаза.

Предполагаемый результат. Получение достоверно значимого антикатарактального и антиоксидантного (для ткани хрусталика) эффектов при применении заявляемого препарата на лабораторной модели катаракты.

2,2% масляный раствор ионола готовился еженедельно путем растворения 110 мг ионола в 5,0 мл стерильного рафинированного, не обогащенного витамином Е оливкового масла. Между закапываниями препарат хранился в холодильнике при +2°С, непосредственно перед инсталляцией препарат нагревался до комнатной температуры.

Сравнительное исследование антиоксидантной и антикатаракгальной эффективности 2,2% раствора ионола проведено на 54 кроликах-самцах средним весом 2 кг, породы “Шиншилла”. В каждой группе лечения (и группа без лечения) – по 12 животных, по 3 кролика (6 глаз) на каждый срок биохимических исследований. Группа интактных – 6 животных (12 глаз). У всех животных (кроме интактных) была вызвана катаракта путем химической инициации свободнорадикального окисления биополимеров тканей глаза (9). Контрольные методы лечения: placebo, “Офтан Катахром”, масляный раствор -токоферола ацетата (глазная лекарственная форма). Длительность эксперимента – 56 суток. Схема лечения: 3-кратные ежедневные инстилляции 2 капель препарата в конъюнктивальную полость каждого глаза.

Динамику процесса формирования катаракты и эффективность проводимого лечения оценивали экспериментально-клиническими методами: бокового освещения, проходящего света и биомикроскопии.

Для изучения активности свободнорадикального окисления липидов определяли содержание малонового диальдегида; для оценки состояния антиоксидантной защиты хрусталика определяли количество восстановленного глутатиона, суммарную емкости антиоксидантной защиты ткани хрусталика (по продолжительности лаг-фазы накопления малонового диальдегида в инкубируемом в присутствии кислорода гомогенате хрусталика), активность глутатионпероксидазы, глутатионредуктазы и глутатион-SH-трансферазы. Также определяли количество восстановленных тиоловых белковых групп. Выведение животных из опыта для проведения биохимических исследований хрусталиков осуществляли на 14, 28, 42 и 56 сутки от момента введения индуктора катарактогенеза.

У животных всех групп начальные катаракгальные изменения хрусталиков появились к 3-7 суткам в коре и при отсутствии медикаментозного лечения имели тенденцию к неуклонному прогрессу, за исключением 1 случая стабилизации к 42 суткам, К 56 суткам у животных, не получавших лечения, наблюдались сливные очаги помутнения корковых отделов хрусталика. Лечение препаратами начинали со времени появления начальных катарактальных изменений хрусталиков у всех животных (с 7 суток от введения индуктора катарактогенеза).

Эффект заявляемого препарат. Терапия 2,2% масляным раствором ионола более эффективна по проценту стабилизации и регресса помутнений уже к 14 суткам (табл.1).

Табл.1.
Динамика помутнений хрусталиков при лечении исследуемыми препаратами
сроки наблюдения	динамика помутнений	placebo	“Офтан Катахром”	раствор -токоферола ацетата	2,2% раствор ионола
0-14 сутки	прогресс	100%	100%	100%	66,75%
	стабилизация	–	–	–	33,25%
	регресс	–	–	–	–
14-28 сутки	прогресс	100%	100%	100%	44,34%
	стабилизация	–	–	–	44,33%
	регресс	–	–	–	11,33%
28-42 сутки	прогресс	91,7%	75%	83%	33%
	стабилизация	8,3%	25%	17%	50%
	регресс	–	–	–	17%
42-56 сутки	прогресс	83%	67%	83%	17%
	стабилизация	17%	33%	17%	33%
	регресс	–	–	–	50%

Лечение раствором ионола, в сравнении с контрольными методами лечения, достоверно значимо (р<0,05) снижало активность свободнорадикального окисления липидов хрусталика на 14, 28, 42 и 56 сутки; предотвращало окисление белковых восстановленных тиоловых групп на 28 и 56 сутки; увеличивало содержание восстановленного глутатиона на 42 и 56 сутки; более существенно предотвращало уменьшение продолжительность лаг-фазы накопления малонового диальдегида в инкубируемых гомогенатах хрусталиков подопытных животных на 14, 28, 42 и 56 сутки. Применение раствора ионола предотвратило истощение активности глутатион-пероксидазы и глутатион-редуктазы, способствовало поддержанию активности глутатион-пероксидазы на высоком уровне; способствовало увеличению и поддержанию в течение всего эксперимента высокой активности глутатион-SH-трансферазы. В цифровом выражении результаты представлены в таблицах 2, 3, 4 и 5.

Табл.2
Динамика содержания МДА в ткани хрусталиков подопытных животных при лечении сравниваемыми препаратами ( – разница с сериями контрольного лечения достоверна, р<0,05)
сутки выведения	количество исследуемого соединения (в мкмоль/г ткани) – 95% ДИ
животных из эксперимента / вид лечения	без лечения	placebo	“Офтан Катахром”	раствор -токоферола ацетата	2,2% раствор ионола
интактные	0,0034
	(0,0029; 0,0039)
7 сутки эксперимента	0,0199
	(0,015; 0,0248)
14/7 сутки	0,067	0,0662	0,0677	0,0635	0,0118*
эксперимента/терапии	(0,056; 0,078)	(0,0625; 0,0699)	(0,061; 0,0744)	(0,0601; 0,0669)	(0,0107; 0,0129)
28/21 сутки	0,0465	0,04805	0,0477	0,0473	0,0112*
эксперимента/терапии	(0,0372; 0,0558)	(0,04095,0,05515)	(0,0429; 0,0505)	(0,0402; 0,0544)	(0,0101; 0,0123)
42/35 сутки	0,0568	0,05738	0,05609	0,0539	0,018*
эксперимента/терапии	(0,0418; 0,0718)	(0,04928; 0,06548)	(0,05339; 0,05879)	(0,0459; 0,0619)	(0,0169; 0,0191)
56/49 сутки	0,028	0,02744	0,0282	0,028	0,0056*
эксперимента/терапии	(0,0255; 0,0305)	(0,02124; 0,03364)	(0,0239; 0,0325)	(0,0241; 0,0319)	(0,0052; 0,006)

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.

2. Э.В.Мальцев. Хрусталик. М.: “Медицина”, 1988.

3. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России: Справочник. Изд. 9-е. М.: “АстраФармСервис”, 2003.

4. В.З.Ланкин, А.К.Тихазе, Ю.Н.Беленков. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях. Изд. 2-е. М.: РКНПК МЗ РФ, 2001.

7. Н.К.Зенков, Н.В.Кандалинцева, В.З.Ланкин, Е.Б.Меньшикова, А.Е.Просенко. Фенольные биоантиоксиданты. Новосибирск: СО РАМН, 2003. – прототип.

8. А.-Ю.А.Гендролис. Глазные лекарственные формы в фармации. М.: “Медицина”, 1988.

Формула изобретения

Антиоксидантное средство для лечения катаракты, отличающееся тем, что в качестве антиоксиданта содержит 2,2%-ный масляный раствор ионола.

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 22.02.2007

Извещение опубликовано: 20.06.2008 БИ: 17/2008