Патент на изобретение №2297000
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ИНФЕКЦИОННО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У НОВОРОЖДЕННЫХ ОТ МАТЕРЕЙ С ЭНДЕМИЧЕСКИМ ЗОБОМ
(57) Реферат:
Изобретение относится к области лабораторной диагностики и может быть использовано в педиатрии и неонатологии. Сущность изобретения состоит в том, что у новорожденных от матерей с эндемическим зобом в периферической венозной крови на 5-е сутки жизни определяют содержание CD25+ и HLA-DR+ лимфоцитов и при значении первого показателя, равном или менее 6,9%, и второго показателя, равном или менее 16,5%, прогнозируют возникновение инфекционно-воспалительных заболеваний в течение неонатального периода. Техническим результатом является возможность прогнозировать инфекционно-воспалительные заболевания у детей в течение неонатального периода с высокой точностью, чувствительностью и специфичностью. 1 табл.
(56) (продолжение): CLASS=”b560m”staphylococcal septicemia. Przegl Lek. 2002; 59, Suppl. 1:50-53. HODGE G. et al. Multiple leucocyte activation markers to detect neonatal infection. Clin. Exp. Immunol. 2004, Jan; 135(1):125-129.
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии и неонатологии, и может быть использовано для прогнозирования инфекционно-воспалительных заболеваний у детей от матерей с эндемическим зобом в течение неонатального периода. Актуальность заявляемого способа определяется высокой частотой (по данным разных авторов от 6 до 53%) инфекционной патологии в структуре заболеваемости новорожденных [1, 2, 3] и, в особенности, детей от матерей с эндемическим зобом, которые в течение неонатального периода в 1,5 раза чаще, чем дети, рожденные женщинами без тиреоидной патологии, болеют гнойно-септическими заболеваниями [4, 5] и в 4 раза чаще острыми респираторными заболеваниями [6]. Недостатки способа: 1. Неонатальные инфекции прогнозируются только у недоношенных новорожденных, у которых всегда присутствуют иммунологические нарушения [7]; 2. Повышение уровня IgE может наблюдаться при ряде состояний иммунной системы (миеломной болезни, синдроме Вискотта-Олдрича и др.) и не быть связанным с инфекционным процессом, что снижает специфичность и точность способа; 3. IgE могут связываться с поверхностью реагируемых клеток и при этом его уровень в крови не повышается, в связи с чем возможен большой процент ложноотрицательных результатов; 4. Не указывается точность способа. Недостатки способа: 1. Для прогнозирования инфекционных заболеваний у ребенка необходимо обследовать мать во время беременности, что организационно не всегда возможно; 2. Прогнозируют инфекционные заболевания только у доношенных новорожденных; 3. Срок прогноза ограничен первыми 7-10 днями жизни новорожденного; 4. Недостаточно высокая точность. Недостатки способа: 1. Способ позволяет прогнозировать инфекционно-воспалительные заболевания только у доношенных новорожденных; 2. Способ не является адекватным для прогнозирования инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных от матерей с эндемическим зобом, т.к. известно, что готовность клеток к апоптозу, о чем свидетельствует усиление экспрессии FaS АГ (CD95+) на их поверхности, повышается при активации клеток, а у новорожденных от матерей с зобом параметры активации лимфоцитов снижены по сравнению с детьми от матерей без зоба [8], при возникновении же инфекционно-воспалительных заболеваний это снижение, по нашим данным, еще более усугубляется; 3. Способ невозможно применить для прогнозирования инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных от матерей с эндемическим зобом, т.к. уровень CD4+ лимфоцитов (Т-хелперов) в данной группе детей изначально снижен [8]. Указанные недостатки могут быть устранены в предлагаемом способе. Заявляемый технический результат достигается тем, что в венозной периферической крови новорожденных от матерей с эндемическим зобом на 5-е сутки жизни определяют содержание CD25+ и HLA-DR+ лимфоцитов, и при значении первого показателя, равном или менее 6,9%, и второго показателя, равном или менее 16,5%, прогнозируют возникновение инфекционно-воспалительных заболеваний в течение неонатального периода с точностью 92,0%, чувствительностью 77,8%, специфичностью 96,5%. Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозирование инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных от матерей с эндемическим зобом в течение неонатального периода по определению у них на 5-е сутки жизни в венозной периферической крови показателей содержания CD25+ и HLA-DR+ лимфоцитов. Известно, что молекула CD25 является рецептором к ИЛ-2 (интерлейкину-2) и экспрессируется на Т- и В-лимфоцитах. Через этот рецептор ИЛ-2 осуществляет свои функции как стимулятор гемопоэза, дифференцировки Т-хелперов и цитотоксических лимфоцитов, регулятор синтеза IgM, IgG, IgA В-лимфоцитами и продукции цитокинов [9]. HLA-DR молекулы определяются на поверхности В-лимфоцитов и активированных Т-хелперов, помогая осуществлять функцию представления антигена. В литературе уровень CD25+ и HLA-DR+ лимфоцитов предлагается рассматривать как показатели содержания активированных лимфоцитов. Ранее было установлено, что в периферической крови доношенных детей с постгипоксическим поражением ЦНС средней степени тяжести, с инфекционно-воспалительными заболеваниями, развившимися на 1-м месяце жизни, на 5 день жизни отсутствовали различия в показателях содержания CD25+ и HLA-DR+ в общей популяции лимфоцитов. При тяжелых формах неонатальных инфекций в периферической венозной крови новорожденных 5-10 дня жизни отмечалось снижение содержания CD8+HLA-DR+ лимфоцитов [10]. Одновременно снижение содержания CD25+ и HLA-DR+ лимфоцитов в венозной периферической крови у новорожденных с впоследствии развившимися инфекционно-воспалительными заболеваниями отмечено впервые. Вероятно, выявленные нами отклонения в содержании CD25+ и HLA-DR+ лимфоцитов у новорожденных от матерей с эндемическим зобом являются признаками развивающейся внутриутробно иммунологической недостаточности и определяют неадекватный иммунный ответ на инфекционные агенты в раннем неонатальном периоде. При этом нарушаются процессы презентации антигенов, дифференцировки специфических клонов и продукции антител. Способ осуществляется по стандартной методике следующим образом: 1. У новорожденных от матерей с эндемическим зобом на 5-е сутки жизни из вены берут 1 мл крови. 2. Выделение лимфоцитов из периферической крови осуществляется стандартным методом в градиенте плотности фикол-верографина [11]. 3. В две пробирки вносят по 100 мкл лимфоцитов в концентрации 1×106 кл/мл. В 1 пробирку добавляют 20 мкл моноклональных анти-CD25 антител меченных флюоресцеином, во вторую 20 мкл моноклональных анти-HLA-DR антител меченных флюоресцеином. Обе пробирки инкубируют 30 минут при комнатной температуре, в темноте, после чего клетки отмывают 1 раз 1 мл физиологического раствора центрифугированием при 1500 об/мин в течение 2 минут. Клетки ресуспендируют в 500 мкл физиологического раствора. Учет реакции в обеих пробирках проводят на проточном цитомере, определяя содержание CD25+ и HLA-DR+ клеток в лимфоцитарном гейте. Отличительными признаками заявляемого способа являются: Определение в венозной периферической крови новорожденных от матерей с эндемическим зобом показателей содержания CD25+ и HLA-DR+ лимфоцитов, и при значении первого показателя, равном или менее 6,9%, и второго показателя, равном или менее 16,5%, прогнозируют инфекционно-воспалительные заболевания у новорожденных в течение неонатального периода. Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами. Пример 1. Ребенок А., от матери 21 года, страдающей эндемическим зобом I степени, артериальной гипертензией I степени. Беременность осложнилась поздним гестозом (водянкой II степени), а с 30 недель – угрозой преждевременных родов. Роды в 38 недель. При рождении масса тела 3200 г, оценка по шкале Апгар 7-8 баллов. В ранний неонатальный период отмечалась затянувшаяся конъюгационная желтуха, снижение мышечного тонуса. При исследовании тиреоидного статуса была выявлена гипофункция щитовидной железы. При обследовании новорожденного на 5-е сутки жизни заявляемым способом было установлено: показатель содержания CD25+ лимфоцитов – 4,1%, что ниже заявляемого уровня (6,9%), показатель содержания HLA-DR+ лимфоцитов – 8,4%, что ниже заявляемого уровня (16,5%). Прогнозировалось возникновение инфекционно-воспалительных заболеваний в течение неонатального периода. В раннем неонатальном периоде у ребенка был диагностирован острый пиелонефрит, проведена антибактериальная терапия, выписан на 21 сутки. Заключение: прогноз развития инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденного по заявляемому способу подтвердился. Пример 2. Ребенок С. от матери 29 лет, страдающей эндемическим зобом I степени, артериальной гипертензией I степени, хроническим вазомоторным ринитом. Беременность протекала на фоне анемии I, позднего гестоза (водянка I степени). Роды в 40 недель. При рождении масса 3650 г, оценка по шкале Апгар 7-8 баллов. В ранний неонатальный период отмечалось снижение мышечного тонуса, токсическая эритема. При обследовании новорожденного на 5-е сутки жизни заявляемым способом было установлено: показатель содержания CD25+ лимфоциов в венозной крови – 6,9% (соответствовал заявляемому уровню), показатель содержания HLA-DR+ лимфоцитов – 15,2%, что ниже заявляемого уровня (16,5%). Прогнозировалось возникновение инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденного. В раннем неонатальном периоде был диагностирован гнойный конъюнктивит, а в возрасте 14 дней – острое респираторное заболевание. Заключение. Прогноз возникновения инфекционно-воспалительных заболеваний по заявляемому способу подтвердился. Пример 3. Ребенок М. от матери 25 лет, страдающей эндемическим зобом I степени, хроническим тонзиллитом, вегето-сосудистой дистонией. Беременность осложнилась в I триместре угрозой прерывания, а во II триместре – поздним гестозом (нефропатией I степени). Роды в 35 недель. При рождении масса тела – 2000 г, оценка по шкале Апгар – 7-8 баллов. В ранний неонатальный период отмечалась патологическая убыль (более чем на 10%) первоначальной массы и медленное ее восстановление. При обследовании новорожденного на 5-е сутки жизни заявляемым способом было установлено: показатель содержания CD25+ лимфоцитов – 7,1%, что выше заявляемого уровня (6,9%), показатель содержания HLA-DR+ лимфоцитов – 19,5%, что выше заявляемого уровня (16,5%). Возникновение инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденного не прогнозировалось. В течение периода новорожденности ребенок был здоров. Заключение. Прогноз отсутствия инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденного по заявляемому способу подтвердился. Указанным способом обследовано 75 новорожденных от матерей с эндемическим зобом. Результаты обследования представлены в таблице 1.
Итого: – Точность заявляемого способа: 92,0%. – Чувствительность заявляемого способа: 77,8%. – Специфичность заявляемого способа: 96,5%. Преимущества заявляемого способа: 1. Повышает точность прогноза до 92,0%. 2. Дает возможность уже на 5-е сутки жизни ребенка прогнозировать возникновение инфекционно-воспалительных заболеваний в течение всего неонатального периода до появления клинических признаков заболевания. 3. Может быть использован для прогнозирования инфекционно-воспалительных заболеваний как у доношенных, так и у недоношенных новорожденных. 4. Может быть использован для прогнозирования инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных от матерей с эндемическим зобом. 5. При отсутствии благоприятного прогноза служит основанием для своевременных профилактических мероприятий, что способствует снижению частоты инфекционно-воспалительной патологии новорожденных, уменьшает затраты на их лечение, предупреждает нарушение состояния здоровья ребенка в дальнейшем. Литература 1. Шабанов Н.П. Неонатология. Т.1. – СПб.: Специальная литература, 1995. – 494 с. 2. Яцык Г.В. Руководство по неонатологии. – М., 1998. – 400 с. 8. Жмойдик Е.В. Особенности иммунного статуса и способы антенатальной профилактики иммунологических нарушений у детей от матерей с эндемическим зобом / Автореф. дис. … канд. мед. наук. – Иваново, 2004. – 15 с. 9. Фрейдлин И.С., Тотолян А.А. Клетки иммунной системы. – СПб.: Наука, 2001. – 390 с. Формула изобретения
Способ прогнозирования инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных от матерей с эндемическим зобом путем исследования периферической венозной крови новорожденного на 5-й день жизни, отличающийся тем, что в крови определяют показатель содержания CD25+ и HLA-DR+ лимфоцитов и при значении первого показателя, равном или менее 6,9%, и второго показателя, равном или менее 16,5%, прогнозируют возникновение инфекционно-воспалительных заболеваний в течение неонатального периода.
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 07.07.2007
Извещение опубликовано: 20.02.2009 БИ: 05/2009
|
||||||||||||||||||||||||||
