Патент на изобретение №2295965

(54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БАЛЬЗАМА РОДИМИНА С ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНОМ

(57) Реферат:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения фитопрепарата, содержащему дигидрокверцетин. Способ получения фитопрепарата, содержащего дигидрокверцетин, путем его экстрагирования из растительного сырья водно-спиртовой смесью, причем сухое растительное сырье, содержащее определенное количество дигидрокверцетина, заливают водой, доводят до кипения и кипятят в течение определенного времени, сразу после кипячения добавляют 40% водно-этанольный раствор, настаивают в течение суток. Вышеописанный способ позволяет получить фитопрепарат в легкоусваиваемой форме с повышенным содержанием дигидрокверцетина.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способов переработки растительного сырья для получения препаратов, обогащенных биологически активными веществами.

Среди биологически активных веществ особый интерес представляют биофлавоноиды, которых к настоящему времени обнаружено несколько тысяч.

Флавоноиды с Р-витаминными свойствами в зависимости от их химической структуры могут обладать следующими свойствами: антиоксидантными, противоопухолевыми, иммуностимулирующими, антитоксическими, антисклеротическими и др.

Отсутствие противопоказаний при терапии флавоноидными препаратами побуждает специалистов вести поиск наиболее эффективных среди этих соединений. Считается, что в настоящее время наиболее универсальным и действенным является дигидрокверцетин (ДГК, С₁₅Н₁₂О₇).

Доступным и перспективным сырьем для получения ДГК является древесина лиственницы сибирской. В этой области разработано немало технологий, позволяющих получать ДГК в сухой кристаллической форме.

Например, известен способ переработки древесины лиственницы с выделением дигидрокверцетина и устройство для его осуществления [1].

Способ включает экстракцию ДГК из древесины, нагретой водно-спиртовой смесью, последующую экстракцию низкокипящим эфиром, абсорбцию водно-ацетоновым растворителем, вакуумную разгонку. Весь технологический процесс протекает в атмосфере инертного газа. Результатом процесса является кристаллический ДГК.

Недостатки известного способа в том, что для обеспечения технологического процесса необходимо сложное оборудование: герметические реакторы, холодильники, нагреватели, пр. Использование взрывоопасных летучих и токсичных экстрагенов обязывает принимать дополнительные меры защиты.

Известно, что кристаллические флавоноиды плохо усваиваются организмом человека. Для применения в медицине предпочтительна жидкая форма ДГК, что позволяет экономить препарат.

Известен способ получения препарата флавитекс [2]. Способ включает обработку опилок древесины лиственницы 60-70% водным раствором этилового спирта при нагревании, упаривание экстракта, отделение смолистых веществ, нагревание экстракта, кристаллизацию, очистку из водного раствора этанола в присутствии активированного угля при нагревании смеси до кипения с последующим выделением целевого продукта, охлаждением и отделением выпавшего осадка.

Способ экологически чист и обеспечивает высокую степень экстракции флавоноидов.

Недостаток способа в сложной технологической цепочке, требующей сложного оборудования. Экстракция водно-спиртовой смесью при высокой температуре и длительное время ведет к потерям этанола. Использование только опилок лиственницы не позволяет получить препарат более чем из двух соединений – ДГК и кемцферола. Конечный продукт также получают в виде сухих кристаллов.

Известно средство, обладающее иммуностимулирующим действием, получаемое способом, наиболее близким по своей сущности к предлагаемому, который (способ) может быть использован для получения препарата с ДГК [3].

Средство получают путем настаивания лабазника вязолистного в 40% или в 70% водном растворе этилового спирта в течение 14 суток. Затем экстракт упаривают досуха. Сухой экстракт содержит ДГК.

Недостатки данного способа в том, что водно-спиртовая смесь используется без нагревания, что не позволяет проводить эффективную экстракцию; в длительности процесса (14 суток); в использовании травы лишь одного растения. Упаривание экстракта до сухого состояния приводит к получению слабоусваиваемого препарата.

Целью предлагаемого изобретения является упрощение способа получения фитопрепарата с ДГК в растворимой форме из различного растительного сырья путем частичного синтеза ДГК из флавоноидов, содержащихся в самом сырье. Кроме того, целью изобретения является усиление антиоксидантных свойств получаемого препарата во время его приготовления за счет образования металло-флавоноидных комплексов. Соединения флавоноидов с ионами переходных металлов, как известно, являются еще более эффективными ловушками для перекисных радикалов [6].

Предлагаемый способ для его осуществления не требует сложного оборудования и может быть использован не только на предприятиях, но и в домашних и полевых условиях. Конечным продуктом является жидкий препарат, содержащий в растворе не только ДГК, но и совокупность других биологически активных веществ, что позволяет получить дополнительный лечебно-профилактический эффект.

Сущность предлагаемого изобретения в том, что для получения конечного продукта может быть использована не только лиственница, но и другие растения, не обязательно содержащие ДГК, но богатые гликозидами кверцетина и флаванонами – предшественниками ДГК, способными в результате катализа превращаться в ДГК.

В процессе гидролиза гликозиды кверцетина легко распадаются на кверцетин и олигосахариды. Кверцетин и ДГК имеют некоторую растворимость в горячей воде. Но при понижении температуры ниже 20°С они выпадают в осадок. Для их удержания в растворе может быть использован этанол, в котором растворимость ДГК 4,8 г/л. Таким образом, концентрация ДГК в водно-спиртовой смеси ограничивается количеством в ней этанола. Из этого следует, что для приготовления водно-спиртового раствора ДГК необязательно использовать сырье с высоким содержанием кверцетина. Для осуществления предлагаемого способа используется сухое сырье, где общее содержание флаванонов, кверцетина, его гликозидов или ДГК составляет от 0,5%.

Это значительно расширяет возможности ассортимента сырьевой базы и позволяет, кроме лиственницы, использовать другие растения, которые пока не находили применения для получения ДГК: цветки боярышника кроваво-красного и лабазника вязолистного, листья ольхи, трава зверобоя, гречихи посевной, горцев – перечного, птичьего, почечуйного, плоды аронии, калины, др.

Количество флавоноидов в сырье от 0,5% выбрано из следующих соображений.

Считается, что поступление Р-витаминных веществ в организм должно составлять от 10 мг в сутки. При приготовлении жидких галеновых препаратов стандартная навеска сырья составляет 100 г на 1 л экстракта. Р-витаминные препараты рекомендуется принимать во время еды, обычно – 3 раза в день. Традиционная форма – это 1 ст. ложка. Расчеты показывают: для обеспечения биотической суточной потребности организма в витамине Р, при его 3-разовом приеме по 1 ст. ложке необходимо, чтобы в исходом сырье содержалось флавоноидов от 500 мг на 100 г сырья, то есть – 0,5%. Очевидно, если содержание флавоноидов в сырье будет больше, количество сырья можно сократить пропорционально. Увеличение приема витамина Р даже на порядок по сравнению с рекомендуемым минимумом, как известно, противопоказаний не имеет. Это означает, что при осуществлении предлагаемого способа необходимо контролировать лишь минимальный уровень флавоноидов в сырье.

Поскольку лечебный эффект флавоноидов потенцируется другими действующими началами растений – моно и сесквитерпенолами, стеролами, тритерпенолами, кислотами,- в состав сырья рекомендуется включать несколько разных растений.

Кроме того, такой сбор может содержать сырье, обладающее выраженным специфическим действием, например: пустырник (седативное), шлемник байкальский (гипотензивное), брусника (мочегонное), жостер (слабительное), пижма (желчегонное), т.п.

При осуществлении предлагаемого способа сырье может проходить следующие технологические фазы. Фаза катализа в водном настое в присутствии ионов переходных металлов и ферментов, находящихся в самом сырье. В этой фазе происходит превращение флавононов в ДГК. Фаза гидролиза в присутствии органических кислот, находящихся в сырье, когда сырье подвергается кипячению в воде. При этом глюкозиды кверцетина распадаются на кверцетин и остатки сахаров. Одновременно может проходить фаза гидрогенизации. Для этого необходимо, чтобы в отваре присутствовал молекулярный водород, который восстанавливает кверцетин до ДГК. Фаза вскипания этанола в горячем отваре, когда происходит дополнительное растворения ДГК.

Для получения ионов металла и молекулярного водорода использовалось устройство РЕМ-01, представляющее собой биметаллическую медно-серебряную пару [4].

Примером осуществления предлагаемого способа служит следующая опытно-экспериментальная работа.

Цель работы. Разработать новую технологию получения в домашних условиях фитопрепарата с дигидрокверцетином (ДГК) на основе водно-спиртовой смеси с низким содержанием этанола.

Методика определения дигидрокверцетина. Методом ВЭЖХ, в лаборатории “Центра сертификации и контроля качества лекарств департамента здравоохранения города Москвы”.

Объект. Смесь лекарственных трав: горец перечный – 50 г, цветки боярышника кроваво-красного – 50 г, бутоны софоры японской – 15 г. Соответствие по ГОСТу 24027.0-80.

Описание технологии. Были приготовлены три навески вышеуказанных трав.

1-я экспериментальная навеска трав помещалась в эмалированную емкость, заливалась 1 л водопроводной воды, доведенной до кипения, и емкость помещалась на водяную баню на 10 минут. Затем емкость с отваром извлекалась из бани и в нее немедленно вливалась водно-спиртовая смесь, с содержанием этанола 40% (водка) в количестве 0,5 литра. В этот момент наблюдалось вскипание водки в горячем отваре. Отвар настаивался сутки при нормальных условиях.

2-я навеска трав (контрольная) проходила ту же процедуру, что и первая, с той разницей, что 40% водно-спиртовая смесь добавлялась в отвар через сутки, в уже остывший отвар.

3-я навеска трав помещалась в эмалированную емкость, куда дополнительно помещалось медно-серебряное устройство “РЕМ-01” (регистрация Минздрава РФ №29/110-41002/4866-03 от 30.01.2003 г.). Затем заливалась 1 литром кипятка из водопроводной воды и настаивалась в открытой емкости сутки в нормальных условиях.

Через сутки емкость с фитосырьем помещалась в водяную баню, где настой доводился до кипения и кипятился 10 минут. После этого в горячий отвар вливалось 0,5 л водки. Затем отвар остывал до комнатной температуры, а устройство “РЕМ-01” извлекалось.

Полученные препараты из всех 3-х навесок отфильтровывались через двойной марлевый фильтр и передавались в лабораторию для определения в них содержания ДГК.

Результаты и их интерпретация

В 1-ом препарате содержание ДГК составило до 0,05% (500 мг/л). Во 2-ом (контрольном) препарате содержание ДГК составило не более 0,006% (60 мг/л). В 3-ем препарате содержание ДГК-0,065% (650 мг/л).

Содержание ДГК в контрольном препарате соответствует известным данным о крайне малой растворимости ДГК в холодной воде и слабой растворимости в этаноле.

Очевидно, что увеличение концентрации ДГК до 500 мг/л, в 1-м опытном препарате произошло за счет вскипания этанола при добавлении водки в горячий отвар. Важно отметить, что данное количество ДГК осталось в растворенной форме и после остывания препарата.

Увеличение концентрации ДГК в 3-ем опытном препарате до концентрации 650 мг/л можно объяснить, по крайней мере, двумя причинами.

Во время настаивания сырья в емкости с устройством РЕМ-01 благодаря выделению устройством ионов Cu²⁺ произошло каталитическое превращение флаванонов в ДГК. Такой катализ возможен в присутствии флаванон-3-гидроксилазы, которая обнаруживается в флавоноидсодержащем сырье.

Второй причиной образования ДГК мог стать молекулярный водород, выделяющийся на серебряной составляющей устройства “РЕМ-01”. В результате гидрогенизации при кипячении сырья содержащийся в нем кверцетин мог восстановиться до ДГК.

Выводы

1. Метод вскипания этанола в горячей воде при приготовлении жидкого фитопрепарата позволяет значительно увеличить концентрацию в нем дигидрокверцетина.

2. Присутствие в сырье устройства “РЕМ-01” при приготовлении фитопрепарата способствует дополнительному синтезу дигидрокверцетина и увеличивает его концентрацию, по крайне мере, на 30%.

3. Метод вскипания этанола следует рассматривать как новый технологический прием, для приготовления галеновых препаратов, осуществимый в домашних условиях.

Новизна предлагаемого изобретения заключается в том, что предлагается способ получения препарата с содержанием ДГК в жидкой, легкоусваиваемой форме вместо его сухой кристаллической формы. Для производства препарата предлагается использовать широкий список растительного сырья, содержащего как ДГК, так и любые флавоноловые гликозиды и (или) флаваноны с их содержанием от 0,5%. Ранее предлагалось сырье обязательно содержащее дигидрокверцетин, и в значительно большей концентрации. Впервые для приготовления препарата с ДГК предлагается использовать метод вскипания этанола в остывающей воде, что делает изобретение соответствующим уровню техники. Также уровень техники предлагаемого изобретения заключается в возможности превращения флавоноловых гдикозидов и флаванонов в ДГК без применения дорогостоящего оборудования и без сложной технологии.

Впервые предложен и экспериментально осуществлен метод катализа флаванонов в ДГК в присутствии ионов Cu²⁺ Ранее такой катализ осуществлялся в присутствии ионов Fe²⁺ [5].

Для получения молекулярного водорода с целью восстановления кверцетина до ДГК впервые предложено использование биметаллической пары. Ранее молекулярный водород получали обработкой сырья соляной кислотой и цинковой пылью, что приводило к загрязнению сырья хлоридом цинка [5].

Предлагаемый способ экологически чист, прост и доступен для осуществления в домашних условиях.

Источники информации

1. Патент RU №2206568, БИ № 17 от 20.06.2003.

2. Патент RU №2236863, БИ № 27 от 27.09.2004.

3. Патент RU №2246962, БИ № 6 от 27.02.2005.

4. Патент RU №2190573, БИ № 28 от 10.10.2002.

5. Запрометов М.Н. Фенольные соединения. М.: Наука, 1993, стр.127-130.

6. В.В.Горбачев, В.Н.Горбачева. Витамины, макро- и микроэлементы. Минск: Книжный дом “Интерпрессервис”, 2002, стр.76-79.

Формула изобретения

Способ получения фитопрепарата, содержащего дигидрокверцетин, путем его экстрагирования из растительного сырья водно-спиртовой смесью, отличающийся тем, что сухое растительное сырье, содержащее флавоноиды, в том числе не менее 500 мг дигидрокверцетина, заливают 1 л воды, доводят до кипения и кипятят в течение 10 мин, сразу после кипячения добавляют 0,5 л 40%-ного водно-этанольного раствора, настаивают в течение суток.

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 04.10.2007

Извещение опубликовано: 20.05.2009 БИ: 14/2009