Патент на изобретение №2287994

(54) СПОСОБ ИММУНОТЕРАПИИ ВИРУСНЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ТЕЛЯТ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области ветеринарии. Больным телятам после подтверждения диагноза подкожно до клинического выздоровления вводят иммунную сыворотку животных – доноров с титрами гемагглютининов к вирусу ИРТ 1:256, к вирусу ПГ-3 1:1280 и к вирусу ВД-БС 1:1024 и дополнительно применяют пробиотический препарат лактобифадол из расчета 32×10⁸ микробных клеток бифидо- и 4×10⁷ лактобактерий. Способ повышает эффективность лечения, повышает количество выздоровевших животных, сокращает продолжительность лечения и количество рецидивов. 3 табл.

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии, касается способа иммунотерапии и может быть использовано для лечения вирусных респираторных болезней телят, протекающих как ассоциированная инфекция парагрипп-3 (ПГ-3), инфекционный ринотрахеит (ИРТ) и вирусная диарея – болезнь слизистых оболочек (ВД-БС).

Известны способы иммунотерапии вирусных респираторных болезней телят с применением моновалентных (живых и инактивированных) или поливалентных вакцин [1]. Известные способы иммунотерапии основаны на комплексных мероприятиях, включающих интраназальную прививку телят в первые недели жизни, их ревакцинацию (парентерально) через 3-4 месяца, а также вакцинацию коров [2]. Но при сложности осуществления известные способы малоэффективны, что обусловлено наличием у телят колостральных антител, которые блокируют антигены вводимых вакцин, тем самым блокируя формирование иммунитета и усугубляя инфекционный процесс. Живые вакцины, кроме того, обладают иммунодепрессивным действием и могут вызывать поствакцинальную болезнь.

Известен также способ иммунотерапии вирусных респираторных болезней телят с применением иммунной сыворотки крови животных-реконвалесцентов. Сыворотка крови животных-реконвалесцентов представляет собой препарат, содержащий антитела к возбудителям, формирующим вирусно-бактериальный фон животноводческого комплекса, однако набор антител сыворотки крови животных-реконвалесцентов и их титр не всегда соответствуют полному набору антигенной структуры “местной микрофлоры”, а при изготовлении препарата и сложности контроля не обеспечиваются стабильность и высокое качество готовых форм, что снижает эффективность терапевтического вмешательства с применением сыворотки крови животных-реконвалесцентов.

В качестве предпочтительного аналога рассматривается способ иммунотерапии вирусных респираторных болезней телят с применением иммунной сыворотки животных-доноров [3]. Лечебно-профилактические иммунные сыворотки получают гипериммунизацией животных, они быстро обеспечивают формирование пассивного иммунитета, но из-за невысокой концентрации специфических антител в сыворотке крови терапевтическая эффективность иммунных сывороток животных-доноров невысока.

Цель изобретения – повышение эффективности.

Поставленная цель достигается применением иммунной сыворотки животных-доноров в комплексе с пробиотиком лактобифадол.

Иммунную сыворотку готовят по методу Н.И.Горбань (1981) из крови животных-доноров из хозяйства, для которого она предназначается, предварительно обследованных на вирус лейкоза крупного рогатого скота в РИД с отрицательными результатами. Животных иммунизируют двух- или трехвалентной вакциной. Эффективная сыворотка должна содержать антитела к этиологическим агентам вирусных респираторных болезней телят (гемагглютинины) в следующих титрах: к вирусу ПГ-3 – 1:1280, к вирусу ИРТ – 1:256, к вирусу ВД-БС – 1:1024.

Пробиотик лактобифадол изготовлен из живых бактерий видов В.adolescentis и L.acidophilum методом контактно-сорбционной сушки биомассы, обеспечивающей минимальное изменение ее биологических свойств [4].

Способ осуществляется следующим образом.

Больным телятам после постановки диагноза подкожно вводят иммунную сыворотку животных-доноров, содержащую гемагглютинины к вирусам ПГ-3, ИРТ и ВД-БС в титрах 1:1280, 1:256 и 1:1024 соответственно, и дополнительно после первой инъекции применяют пробиотический препарат лактобифадол в дозе 32×10⁸ микробных клеток бифидо- и 4×10⁷ микробных клеток лактобактерий. Препараты назначают с интервалом в 48 часов до клинического выздоровления.

Эффективность иммунотерапии с применением иммунной сыворотки животных-доноров в комплексе с пробиотическим препаратом лактобифадол определяли в условиях хозяйств Нижегородской области с заболеваемостью респираторными болезнями до 80,0% при летальности до 18,0% с тенденцией к стационарности. Результаты серологических исследований показали циркуляцию вирусов ПГ-3, ИРТ и ВД-БС. Количество серопозитивных животных составило в среднем 64% на ПГ-3, 87,2% на ИРТ и 98,8% на ВД-БС.

Клинически болезнь характеризовалась повышением температуры тела до 41,3°С, серозно-слизистыми выделениями из носовых отверстий, угнетением общего состояния, конъюнктивитом, кашлем, учащенным дыханием. У вынужденно убитых телят в период острого течения в легких обнаруживали уплотненные участки красного цвета, признаки энфиземы, гиперемию слизистой оболочки, слизисто-гнойный экссудат в трахее и бронхах, признаки геморрагического катарального гастроэнтерита. Заглоточные и бронхиальные узлы увеличены.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 1. Для обоснования дозы пробиотического препарата лактобифадол подбирали 4 группы телят 30-45-дневного возраста с подтвержденным диагнозом ассоциированная инфекция ПГ-3, ИРТ и ВД-БС 3 группы – опытные, 1 группа – контрольная. Телятам всех групп подкожно с интервалом в 48 часов до полного клинического выздоровления вводили иммунную сыворотку животных-доноров с содержанием гемагглютининов к вирусам ПГ-3, ИРТ и ВД-БС в титрах 1:1280, 1:256 и 1:1024 соответственно в дозе 2 мл/кг живой массы. Телятам опытных групп после первой инъекции дополнительно применяли пробиотический препарат лактобифадол из расчета микробных клеток: 24×10⁸ и 3×10⁷, 32×10⁸ и 4×10⁷, 4×10⁹ и 5×10⁷ бифидо- и лактобактерий соответственно. За телятами вели клинические наблюдения. Учитывали длительность лечения, наличие рецидивов, летальность и вынужденный убой. До начала и по окончанию лечения брали кровь для иммунологических исследований. Иммунный статус оценивали по показателям лизоцимной активности сыворотки крови (определяли по В.Г.Дорофейчук), бактерицидной активности сыворотки крови (определяли по О.В.Смирновой и Т.А.Кузьминой), фагоцитарной активности нейтрофилов крови (определяли по А.Н.Маянскому) и -лизинной активности сыворотки крови (определяли по О.В.Бухарину). Результаты представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 2 Дозозависимое влияние лактобифадола на иммунологические показатели
ПОКАЗАТЕЛИ	Группы телят
	1-ая опытная n=10	2-ая опытная n=10	3-я опытная n=10	4-ая контрольная n=10
Бактерицидная активность сыворотки крови, %
Лизоцимная активность сыворотки крови, %
-лизинная активность сыворотки крови, %
Функциональная активность нейтрофилов крови, %
– спонтанный тест
– индуцированный тест
Примечание: числитель – показатели до начала опыта, знаменатель – показатели после лечения.

Как видно из таблиц 1 и 2, при испытанных дозах получены стабильные результаты. В качестве оптимальной дозы для применения на практике можно рекомендовать дозу из расчета 32×10⁸ микробных клеток бифидо- и 4×10⁷ микробных клеток лактобактерий на голову, обеспечившую максимальные показатели относительно контроля и граничных доз. Доза ниже рекомендуемой обеспечивала лишь незначительное повышение показателей относительно контроля, а доза выше рекомендуемой обеспечивала показатели на уровне рекомендуемой дозы, что сделало эти дозы экономически нецелесообразными.

Пример 2. Сравнительную эффективность заявленного и известных способов иммунотерапии вирусных респираторных болезней телят определяли в условиях хозяйства, длительно неблагополучного по вирусным респираторным болезням, на 3 группах телят 30-45-дневного возраста, подобранных по принципу аналогов, с выраженной клиникой респираторных болезней. Лечение проводили по следующим схемам: 1 группа – до клинического выздоровления сыворотка животных-доноров, содержащая гемагглютинины к вирусам ПГ-3, ИРТ и ВД-БС в титрах 1:1280, 1:256 и 1:1024 соответственно, подкожно в дозе 2 мл/кг живой массы с интервалом в 48 часов и дополнительно внутрь лактобифадол из расчета 32×10⁸ микробных клеток бифидо- и 4×10⁷ микробных клеток лактобактерий на голову (заявленный способ); 2 группа – до клинического выздоровления сыворотка животных-доноров, содержащая гемагглютинины к вирусам ПГ-3, ИРТ и ВД-БС в титрах 1:1280, 1:256 и 1:1024 соответственно, подкожно в дозе 2 мл/кг живой массы с интервалом в 48 часов (способ-аналог); 3 группа – до клинического выздоровления внутримышечно сыворотка животных-реконвалесцентов в дозе 2 мл/кг живой массы двукратно с интервалом в 24 часа и дополнительно внутримышечно 4% раствор гентамицина в дозе 1,1 мл/кг живой массы 2 раза в день. За телятами вели клинические наблюдения с учетом течения болезни, ее исхода и рецидивов. Результаты представлены в таблице 3.

Проведенные исследования показали эффективность включения пробиотического препарата в схему лечения вирусных респираторных болезней телят (таблица 3), поскольку течение вирусных болезней часто осложняется развитием секундарной микрофлоры. Так, в условиях хозяйства, в котором проводили экспериментальные исследования, изолировали (в процентах от числа исследованных проб, давших положительный результат на вирусные инфекции) от клинически здоровых телят сальмонеллы (60%), пастереллы (30%), от больных – культуры диплококков (30%), стрептококков (25%), стафилококков (20%), пневмококков (20%) с различной вирулентностью. Расшифровка этиологической структуры респираторных заболеваний в условиях стационарного неблагополучия по вирусным инфекциям вследствие скрытого вирусоносительства у переболевших животных и выяснение роли каждого инфекционного агента обусловили выбор пробиотического препарата лактобифадол. Оба вида бактерий, входящих в его состав, относятся к доминирующим по численности и физиологической значимости родам резидентной микрофлоры кишечника животного организма, обладают выраженной антагонистической активностью в отношении гнилостной, патогенной и условно-патогенной микрофлоры, что обеспечивает помимо синтеза антибиотических веществ, перекиси водорода, лизоцима, интерферона, интерлейкина конкурентоспособную адгезию на эритроцитах и иммуномодулирующее действие. Схема лечения, включающая иммунную сыворотку животных-доноров и пробиотический препарат лактобифадол, обеспечивает воздействие на различные патологические мишени, возникающие при течении вирусных респираторных заболеваний, что подтверждается результатами исследований.

Источники информации

1. Урбан В.П., Найманов И.Л. Болезни молодняка в промышленном животноводстве. – М.: Колос, 1984. – С.192-196.

2. Инфекционные болезни животных. Справочник / Сост. Ю.Ф.Борисович, Л.В.Кириллов; под ред. Д.Ф.Осидзе – М.: Агропромиздат, 1987. – С.99.

3. Иммунопрофилактика болезней животных Пер. с нем. Н.Б.Черных. – М.: Колос, 1981. – С.274-277.

Формула изобретения

Способ иммунотерапии вирусных респираторных болезней телят, включающий иммунизацию подкожным введением иммунной сыворотки животных – доноров с интервалом в 48 ч до клинического выздоровления, отличающийся тем, что используют гипериммунную сыворотку с титрами гемагглютининов к ИРТ 1:256, к ПГ-3 1:1280 и ВД-БС 1:1024 и дополнительно – пробиотический препарат лактобифадол из расчета 32·10⁸ микробных клеток бифидо- и 4·10⁷ лактобактерий.

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 19.07.2007

Извещение опубликовано: 27.02.2009 БИ: 06/2009