Патент на изобретение №2281949

(54) ГИДРОБРОМИД 2-АМИНО-4-АЦЕТИЛ-7-БРОМ-8^б-ГИДРОКСИ-3^а,8^б-ДИГИДРОТИАЗОЛО[5,4-b]ИНДОЛА, ЗАЩИЩАЮЩИЙ ОРГАНИЗМ ОТ ГИПОКСИИ И ПЕЧЕНЬ ОТ ОТРАВЛЕНИЯ ЧЕТЫРЕХХЛОРИСТЫМ УГЛЕРОДОМ

(57) Реферат:

Изобретение относится к новому гидробромид 2-амино-4-ацетил-7-бром-8^б-гидрокси-3^a.8^б-дигидротиазоло[5,4-b]индолу:

который защищает организм от гипоксии и печень от отравления четыреххлористым углеродом. Т.пл. 266-267°С (разл.). Соединение получают из 1-ацетил-5-бром-3-индолинона и элементарного брома в среде диоксана с последующим добавлением тиомочевины в изопропиловом спирте. 2 табл.

Изобретение относится к химии конденсированных азотсодержащих гетероциклических систем и конкретно касается соединения формулы 1

Ранее была установлена гепатопротекторная активность гидробромида 2-амино-4-ацетил-8^б-гидрокси-3^a,8^б-дигидротиазоло[5,4-b]индола, другие сведения о биологической активности производных этой гетероциклической системы отсутствуют (Патент 2009127 РФ, МКИ³

Аналогом по действию является эталонный антигипоксант амтизол формулы 3 (Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств / Под редакцией Л.Д.Лукьяновой. – М.: БИ, 1990. – 18 с.).

Целью данного изобретения является расширение арсенала средств, эффективно защищающих организм от гипоксического воздействия и защищающих печень от отравления четыреххлористым углеродом.

При изучении биологической активности заявляемого соединения установлено, что оно защищает организм от воздействия гипобарической гипоксической гипоксии. Это, в свою очередь, позволяет предполагать возможность применения его для предотвращения вредного воздействия фактора гипоксии на людей.

Защитное действие на печень позволяет предполагать возможность применения этого соединения для предотвращения и лечения у людей острых ингаляционных отравлений парами четыреххлористого углерода. Широкое применение четыреххлористого углерода в промышленности, сельском хозяйстве и военном деле делает актуальным поиск фармакологических средств, защищающих организм от воздействия этого токсиканта. Для восстановления функции печени применяют препарат эссенциальных фосфолипидов эссенциале, однако его активность недостаточна.

Поставленная цель достигается химической структурой соединения 1, обладающего вышеуказанным свойством.

Гидробромид 2-амино-4-ацетил-7-бром-8^б-гидрокси-3^а,8^б-дигидротиазоло[5,4-b]индола представляет собой белое кристаллическое вещество, на холоду трудно растворимое в воде, этиловом и изопропиловом спиртах, легко растворимо в диметилсульфоксиде и диметилформамиде, при кипении легко растворимо в спиртах. Вещество неустойчиво к нагреванию.

Заявляемое вещество получают по схеме:

Пример. К суспензии 17,3 г (68,1 ммоль) 1-ацетил-5-бром-3-индолинона в 170 мл диоксана при перемешивании прибавляют раствор 3,36 мл (71,5 ммоль) брома в 90 мл диоксана. Реакционная масса становится прозрачной, через 3 мин прибавляют приготовленный при нагревании и охлажденный до 25°С пересыщенный раствор 6,2 г (81,7 ммоль) тиомочевины в 180 мл изопропилового спирта. Перемешивают 10 мин и затем доводят реакционную массу до кипения. Фильтруют в горячем состоянии, осадок промывают 2×30 мл диоксаном, 4×30 мл эфиром. Сушат в вакууме над хлористым кальцием. Вес белых кристаллов 21,5 г (77%). Т.пл. 266-267°С (разл.). Вещество однородно по данным ТСХ на силуфоле-254, наносят в метаноле, элюент этилацетат-гексан 3:1, R_f 0,21.

Изучение биологической активности заявляемого соединения.

Исследование защитного действия соединения 1 при воздействии гипобарической гипоксической гипоксии. Опыты выполнены на белых беспородных мышах массой 18-20 г. Заявляемое соединение вводили внутрибрюшинно в виде тонкой суспензии с Твином-20 в дозе 88,5 мг/кг за 30 минут до гипоксического эпизода. Оптимальную дозу выбрали на основании предварительных опытов. Эффект препарата сравнивали с известным антигипоксантом амтизолом в эквимолярной дозе 25 мг/кг. Мышам в контроле вводили эквивалентные объемы физиологического раствора.

Гипоксию моделировали в барокамере “поднятием” животных на высоту 10000 м со скоростью 50 м/сек и экспозицией в течение 90 мин. Оценку защитного действия изучали по средней продолжительности жизни и по выживаемости животных после гипоксического эпизода. Активность заявляемого соединения 1 в сравнении с известным аналогом представлена в таблице 1.

Таблица 1 Антигипоксическая активность заявляемого соединения
Соединение	Число животных	Средняя продолжительность жизни, мин	Прирост выживаемости, %
Контроль	10	3,92±2,12	–
Амтизол	9	10,16	89,0**
Соединение 1	8	4,83±1,01	62,5*
Примечание. Различия достоверны по отношению к контрольным животным при *р0,05; **-р0,01

По данным таблицы 1 видно, что заявляемое соединение повышает выживаемость животных на 62,5% по отношению к контролю. Это более 2/3 от активности эталона. Можно сказать, что соединение 1 проявляет антигипоксическую активность.

Острую токсичность определяли на белых нелинейных мышах-самцах массой 18-22 г (Прозоровский В.Б. и др. «Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки», Фармакология и токсикология, 1978, №4, с. 494-502.). Изучаемое соединение вводили внутрибрюшинно однократно в виде суспензии в воде с добавлением Твина-80. Величина LD₅₀ составила 309±29 мг/кг.

Гепатотропное действие изучали на крысах-самцах массой 140-170 г. Четыреххлористый углерод вводили подкожно ежедневно в 50% растворе в вазелиновом масле в течение 4 дней подряд в количестве 0,4 мл/100 г массы. Одновременно с CCl₄ вводили соединение 1 в дозе 88,5 мг/кг внутрибрюшинно. Его сравнивали с известным гепатопротектором эссенциале и соединением 2, которое исследовали в экимолярной дозе 67,6 мг/кг.

Клиническая картина отравления CCl₄ развивается медленно. Основные симптомы тяжелой интоксикации проявляются только к концу 2-х суток и через 4-7 суток приводят к летальному исходу. У всех больных наблюдается тяжелое поражение печени вплоть до жирового перерождения органа. Оценку защитного действия соединения 1 и аналогов проводили, исследуя активность специфической для печени аланиноаминотрансферазы (АлАТ) и аспартатаминотрансферазы (АсАТ) в сыворотке крови. Изменение активности АлАТ и АсАТ в сыворотке крови свидетельствует о повреждающем действии CCl₄ на клеточные мембраны и органеллы клетки. Результаты опытов приведены в табл.2.

Полученные данные свидетельствуют о том, что применение соединения 1 в 2,6 раза уменьшает концентрацию АлАТ и в 1,4 раза концентрацию АсАТ. Таким образом, по способности защищать печень от отравления четыреххлористым углеродом соединение 1 превосходит соединение 2 и эссенциале.

Формула изобретения

Гидробромид 2-амино-4-ацетил-7-бром-8^б-гидрокси-3^a,8^б-дигидротиазоло[5,4-b]индола формулы

защищающий организм от гипоксии и печень от отравления четыреххлористым углеродом.

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 22.09.2007

Извещение опубликовано: 20.05.2009 БИ: 14/2009