Патент на изобретение №2281763

(54) СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ БЕСПЛОДИЯ КОРОВ

(57) Реферат:

Изобретение относится к ветеринарии и касается профилактики бесплодия у коров. Для этого коровам однократно за 20-25 дней до отела вводят внутримышечно селенит натрия в виде 0,5% раствора в дозе 10 мл и тетравит в дозе 10 мл двукратно до и двукратно после отела с интервалом в 10 дней. Янтарную кислоту в смеси с аскорбиновой кислотой в соотношении 1:1 вводят внутрь ежедневно в течение 20-25 дней до и после отела из расчета смеси на голову 0,5-1,5 г. Способ обеспечивает за счет подбора доз и режима введения активизацию системы антиоксидантной защиты и, естественной резистентности и, как следствие, профилактику бесплодия у коров. 6 табл.

Изобретение относится к ветеринарии, касается способа профилактики бесплодия коров и может быть использовано для увеличения производства животноводческой продукции и повышения ее качества.

Бесплодие (отсутствие плода в матке) – сложное биологическое явление. К бесплодным коровам относят не осемененных или осемененных, но не оплодотворившихся в течение 30 дней после родов, а молодых самок – через 30 дней по достижении ими физиологической зрелости. Бесплодие наносит большой экономический ущерб. Так., при продуктивности 3000 кг один день бесплодия – это потеря 0,0035 теленка и 3 кг молока. В основе бесплодия лежит совокупность причин. Из основных причин, обусловливающих бесплодие коров, следует назвать болезни репродуктивных органов воспалительного характера, вызываемые условно патогенными микроорганизмами, грибами, микоплазмами, хламидиями, риккетсиями, вирусами, в частности эндометриты, которые в результате стрессовой дезадаптации под действием, в первую очередь, экологических факторов, приобретают массовый характер. К неблагоприятно воздействующим на организм животного экологическим факторам относятся техногенные и биогенные загрязнения, биогеохимические провинции, характеризующиеся низким содержанием в почвах и растениях жизненно необходимых элементов, несбалансированное кормление, недоброкачественные корма, отсутствие активного моциона, неудовлетворительные параметры микроклимата в помещениях и другие нарушения зоогигиены содержания. Наиболее выраженное отрицательное воздействие они оказывают на стельных коров, в организме которых происходят повышенные энергозатраты, вызванные интенсивной эксплуатацией и развитием плода /1-5/.

Известны способы профилактики бесплодия с применением антибиотиков, сульфаниламидов, нитрофуранов и их комбинаций /6/. Общий недостаток известных способов – относительно низкая эффективность – обусловлен недостаточной специфической активностью препаратов вследствие появления в результате их использования высокорезистентных штаммов бактерий и грибов, их иммунодепрессивного действия и увеличения “лекарственных” болезней.

Известны также способы профилактики бесплодия восполнением иммунологической недостаточности с применением различных групп препаратов – неспецифических иммуностимуляторов (корпускулярные иммуностимуляторы: липосомы, латекс, микроцеллюлоза и др.; препараты микробного, вирусного происхождения и их синтетические аналоги: продигиозан, зимозан, ликопид и др.; препараты из тканей человека и животных и их синтетические аналоги: тимоген, спленин, пантокрин, препараты из крови и сыворотки и др.; препараты растительного происхождения: чайного дерева, лимона, чеснока, эхинацеи и др.; синтетические иммуномодуляторы: дибазол, метилурацил, левамизол и др.; гормоны: эстрадиол, синэстрол, тироксин, тиреоидин и др.; витамины, микроэлементы и их соли) /7/. Многие витамины и микроэлементы участвуют в иммунологических реакциях, активизируя (или супрессируя) действия различных ферментов, например, соединения селена, в частности натрий селенит /8/, барий селенистокислый /9/, селенопиран /10/.

Наиболее перспективными относительно превентивного эффекта можно считать способы профилактики бесплодия с применением антиоксидантных витаминов и микроэлементов и/или их комплексов, например, препаратов нутрил Se, мувисел (комплекс антиоксидантных витаминов и селенит натрия) /11/, ганасупервит (комплекс витаминов и микроэлементов) /12/, вследствие того, что в этиопатогенезе массовых послеродовых патологий ведущую роль играет состояние стрессовой дезадаптации, характеризующееся явлениями активизации процессов перекисного (свободнорадикального) окисления липидов (ПОЛ), резким снижением мощности системы антиоксидантной защиты (АОЗ) и иммунобиологической резистентности. Так, нашими исследованиями в производственных условиях подтверждена взаимосвязь между окислительным стрессом и иммунобиохимическим статусом у стельных коров. У коров с акушерской патологией за 15 дней до отела отмечали снижение показателей гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, Т- и В-лимфоцитов, общего белка сыворотки крови (ОБС), нарушение межфракционных соотношений, повышение уровня общих липидов и холестерина, снижение уровня общих иммуноглобулинов, витамина Е, лизоцимной, бактерицидной активности сыворотки крови и фагоцитарной активности нейтрофилов при значительном по сравнению с коровами с нормальным течением родов и послеродового периода повышении продуктов перекисного окисления, в частности малонового диальдегида. Следовательно, накопление в организме высокоактивных продуктов ПОЛ является одной из причин, приводящих к супрессии факторов неспецифической иммунологической резистентности организма (таблица 1).

В качестве ближайших аналогов нами рассматриваются способы иммунокоррекции с сочетанным применением тетравита и селените натрия /12/ и тетравита, селенита натрия и янтарной кислоты /13/.

Цель изобретения – высокоэффективный и экологически безопасный способ профилактики бесплодия коров.

Поставленная цель достигается комплексом оптимально подобранных биологически активных средств и параметрами их применения по оригинальной схеме.

Способ осуществляется следующим образом.

Коровам за 20-25 дней до отела однократно внутримышечно вводят селенит натрия в виде 0,5% раствора в дозе 10 мл, двукратно до и двукратно после отела с интервалом 10 дней – тетравит в дозе 10 мл с содержанием в 1 мл 50000 МЕ витамина А, 25000 ME витамина D, 20 мг витамина Е, 5 мг витамина F, в течение 20-25 дней до и после отела внутрь смесь янтарной и аскорбиновой кислот в соотношении 1:1 в дозе 1,0 г на голову.

Осуществимость способа определяли в научно-производственном опыте на коровах черно-пестрой породы молочной продуктивностью 3500-3800 кг в условиях одного из хозяйств Нижегородской области с высокой (более 90%) заболеваемостью репродуктивных органов после отела и длительным сроком бесплодия. Перед опытом и на 2-3 день после отела у коров брали пробы крови для лабораторных исследований с целью определения состояния иммунобиохимического гомеостаза по уровню следующих показателей: гемоглобина, эритроцитов, ОБС, общих иммуноглобулинов (определяли общепринятыми методами), глюкозы (определяли орто-толуидиновым методом), общих липидов (определяли по Криницкому в модификации Волгина, 1969), продуктов ПОЛ – диеновые конъюгаты и кетодиены (определяли по Плацерту, 1976), малоновый диальдегид (определяли с тиобарбитуровой кислотой), лизоцимной активности сыворотки крови (определяли по В.Г.Дорофейчук), бактерицидной активности сыворотки крови (определяли по О.В.Смирновой и Т.А.Кузьминой), фагоцитарной активности нейтрофилов крови (определяли по B.C.Гостеву).

Результаты исследований подвергали биометрической обработке и корреляционному анализу с применением компьютерной программы.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 1. Для изучения влияния янтарной кислоты и смеси янтарной и аскорбиновой кислот в соотношении 1:1 на фоне селенита натрия в виде 0,5% раствора и тетравита на процессы ПОЛ и иммунобиохимический статус по принципу аналогов формировали 4 группы глубокостельных коров по 10 голов в каждой. Коровам первых трех групп за 20-25 дней до отела однократно внутримышечно вводили селенит натрия в виде 0,5% раствора в дозе 10 мл и двукратно до и двукратно после отела с интервалом 10 дней – тетравит в дозе 10 мл с содержанием в 1 мл 50000 МЕ витамина А, 25000 ME витамина D, 20 мг витамина Е, 5 мг витамина F. Коровам второй группы в течение 20-25 дней до и после отела дополнительно давали внутрь янтарную кислоту в дозе 1,0 г, коровам третьей группы – смесь янтарной и аскорбиновой кислот в соотношении 1:1 в дозе 1,0 г. Коровам четвертой группы препаратов не применяли, они служили контролем. Результаты исследований приведены в таблицах 2 и 3.

Таблица 2. Влияние различных антиоксидантов на показатели продуктов ПОЛ и системы АОЗ у коров
Показатели	Группы коров
	1-я, n=10 гол. (селенит натрия + тетравит)		2-я, n=10 гол. (селенит натрия + тетравит + янтарная кислота)		3-я, n=10 гол. (селенит натрия + тетравит + янтарная и аскорбиновая кислоты)		4-я, n=10 гол. (без препаратов)
	М±m	±в %	М±m	±в %	М±m	±в %	M±m	±в %
Диеновые конъюгаты, ед.А/мл		+10,3		-39,0		-56,7		+63,6
Кетодиены, ед.А/мл		+16,6		-15,3		-27,0		+50,7
Малоновый диальдегид, мкмоль/л		+0,7		-20,4		-29,0		+32,4
Активность каталазы, мм Н2O2/ л·мин		-15,0		-12,0		-7,9		-28,2
Витамин Е, мкмоль/л		+6,0		+10,7		+15,2		-45,1
Примечание: в числителе – показатели за 20-25 дней до отела в знаменателе – показатели на 2-3 день после отела

Как видно из данных таблицы 2, показатели продуктов ПОЛ у всех коров за 20-25 дней до отела характеризовались высокими уровнями. Так, содержание первичных продуктов ПОЛ – диеновых конъюгатов превышало физиологические нормы для этого периода в 1,59-2,17 раза, кетодиенов – в 1,27-1,53 раза, вторичных продуктов ПОЛ – малонового диальдегида – в 4,61-4,78 раза. Показатели системы АОЗ были снижены как в неферментативном (витамин Е), так и в ферментативном (каталаза) звене. На 2-3 день после отела показатели продуктов ПОЛ значительно повысились у коров четвертой (контрольной) группы: содержание диеновых конъюгатов на 63,6%, кетодиенов на 50,7%, малонового диальдегида на 32,4% по сравнению со сухостойным периодом и превысили физиологические нормы для данного периода в 1,82; 1,29 и 2,73 раза соответственно. Вместе с этим у коров контрольной группы отмечено резкое снижение показателей АОЗ – активности каталазы на 28,2%, витамина Е – на 45,1% по сравнению со сухостойным периодом. Применение селенита натрия и тетравита в первой опытной группе обеспечивало менее резкое повышение показателей продуктов ПОЛ после отела: содержание диеновых конъюгатов на 10,3%, кетодиенов на 16,6%, малонового диальдегида на 0,7% по сравнению со сухостойным периодом, менее резко снизилась активность каталазы, а уровень витамина Е повысился на 6%. Назначение комплекса антиоксидантных средств коровам второй и третьей опытной групп способствовало снижению уровней продуктов ПОЛ на 2-3 день после отела: диеновых конъюгатов на 39 и 56,7%, кетодиенов на 15,3 и 27%, малонового диальдегида на 20,4 и 29% соответственно. Активность каталазы снижалась во второй группе на 12%, в третьей группе – на 7,9%, уровень витамина Е повысился во второй группе на 10,7%, в третьей – на 15,2%.

Таким образом, сочетанное применение селенита натрия, тетравита, янтарной и аскорбиновой кислот обеспечивало снижение уровней продуктов ПОЛ и повышению активности АОЗ на 2-3 день после отела.

Таблица 3. Влияние различных антиоксидантов на состояние иммунобиохимического гомеостаза коров
Показатели	Группы коров
	1-я, n=10 гол (селенит натрия + тетравит)		2-я, n=10 гол (селенит натрия + тетравит + янтарная кислота)		3-я, n=10 гол (селенит натрия + тетравит + янтарная и аскорбиновая кислоты)		4-я, n=10 гол (без препаратов)
	М±m	±в %	М±m	±в %	М±m	±в %	M±m	±в %
Гемоглобин, г/л		+10,0		+19,5		+26,6		+2,4
Эритроциты, 1012/л		+10,4		+20,0		+31,9		+1,9
Общий белок сыворотки крови, г/л		+8,0		+14,2		+19,0		+1,1
Иммуноглобулины, г/л		+14,0		+18,4		+26,0
Глюкоза, моль/л		+14,3		+20,5		+26,3		-47,4
Общие липиды, г/л		-12,2		-13,7		-18,8		+4,2
Общий холестерин, Ммоль/л		-19,9		-24,0		-47,4
Лизоцимная активность, %		+17,7		+21,9		+33,3		-42,9
Бактерицидная активность, %		+13,9		+14,8		+26,5		-7,3
Фагоцитарная активность нейтрофилов, %		+8,0		+17,0		+35,4		-15,0
Примечание: в числителе – показатели за 20-25 дней до отела в знаменателе – показатели на 2-3 день после отела

Из данных таблицы 3 видно, что иммунобиохимический статус у коров за 20-25 дней до отела характеризовался снижением ряда показателей ниже уровня физиологической нормы – содержание гемоглобина на 3,3-5,6%, количество эритроцитов на 10-13%, гамма-глобулинов на 4,4-8,8%, что указывало на наличие гипоксии и снижение иммунобиологической резистентности, а содержание глюкозы до уровня нижней границы физиологической нормы – на снижение интенсивности процессов гликолиза и биоэнергитических процессов. Установлен повышенный уровень общих липидов вследствие нарушения метаболизма липоидных соединений, что может привести к расстройству синтеза стероидных гормонов, нарушению инволюционных процессов репродуктивных органов после отела и бесплодию. Низкие показатели лизоцимной, бактерицидной активности сыворотки крови и фагоцитарной активности нейтрофилов крови свидетельствовали о снижении естественной резистентности у сухостойных коров. После отела у коров контрольной группы отмечено резкое падение показателей естественной резистентности и глюкозы. У коров опытных групп проявилась тенденция к нормализации иммунобиохимического статуса, о чем свидетельствовало повышение основных показателей – содержание гемоглобина, количество эритроцитов, содержание общего белка сыворотки крови, количество гамма-глобулинов, уровень глюкозы, лизоцимная, бактерицидная активность сыворотки крови и фагоцитарная активность нейтрофилов крови.

Пример 2. Для обоснования оптимальной дозы янтарной и аскорбиновой кислот в соотношении 1:1 на фоне селенита натрия в виде 0,5% раствора и тетравита по принципу аналогов формировали 4 группы глубокостельных коров по 10 голов в каждой. Коровам всех групп за 20-25 дней до отела однократно внутримышечно вводили селенит натрия в виде 0,5% раствора в дозе 10 мл и двукратно до и двукратно после отела с интервалом 10 дней – тетравит в дозе 10 мл с содержанием в 1 мл 50000 МЕ витамина А, 25000 ME витамина D, 20 мг витамина Е, 5 мг витамина F. Коровам второй, третьей и четвертой опытных групп в течение 20-25 дней до и после отела дополнительно давали внутрь янтарную и аскорбиновую кислоты в соотношении 1:1 в дозе 0,5 г; 1,0 и 1,5 г соответственно. Результаты исследований представлены в таблицах 4 и 5.

Таблица 4. Влияние различных антиоксидантов на показатели продуктов ПОЛ и системы АОЗ у коров
Показатели	Группы коров
	1-я, n=10 гол.		2-я, n=10 гол.		3-я, n=10 гол.			4-я, n=10 гол.
	селенит натрия + тетравит		селенит натрия + тетравит + янтарная и аскорбиновая кислоты, доза г на голову
			0,5			1,0			1,5
	М±m	±в %	M±m	±в %		M±m	±в %		M±m	±в %
Диеновые конъюгаты, ед.А/мл		+10,3		-46,4			56,7			-54,8
Кетодиены, ед.А/мл		+16,6		-19,7			-27,0			-27,3
Малоновый диальдегид, мкмоль/л		+0,7		-22,3			-29,0			-27,9
Активность каталазы, мм Н2О2/л·мин		-15,0		-10,0			-7,9			-8,0
Витамин Е, мкмоль/л		+6,0		+11,8			+15,2			+15,8
Примечание: в числителе – показатели за 20-25 дней до отела в знаменателе – показатели на 2-3 день после отела

Как видно из таблиц 4 и 5, при испытанных дозах получены стабильные результаты. В качестве оптимальной дозы для применения на практике можно рекомендовать дозу 1,0 г на голову, обеспечившую максимальные показатели относительно контроля и граничных доз. Граничные дозы обеспечивают повышение показателей относительно контроля, но являются экономически нецелесообразными.

Таблица 5. Влияние различных антиоксидантов на состояние иммунобиохимического гомеостаза коров
Показатели (селенит натрия + тетравит + янтарная и аскорбиновая кислоты)	Группы коров
	1-я, n=10 гол (селенит натрия + тетравит)		2-я, n=10 гол		3-я, n=10 гол		4-я, n=10 гол
			селенит натрия + тетравит + янтарная и аскорбиновая кислоты, доза г на голову
			0,5		1,0			1,5
	М±m	±в %	M±m	±в %	M±m	±в %		M±m	±в %
Гемоглобин, г/л		+10,0		+23,7		+26,6			+26,4
Эритроциты, 1012/л		+10,4		+20,0		+31,9			+1,9
		+8,0		+14,2		+19,0			+19,0
Иммуноглобулины, г/л		+14,0		+21,2		+26,0			+26,4
Глюкоза, моль/л		+14,3		+20,7		+26,3			+26,8
Общие липиды, г/л		-12,2		-13,7		-18,8			+4,2
Общий холестерин, ммоль/л		-19,9		-35,0		-47,4			-50,0
Лизоцимная активность, %		+17,7		+27,3		+33,3			+32,4
Бактерицидная активность, %		+13,9		+20,8		+26,5			+26,9
Фагоцитарная активность нейтрофилов, %		+8,0		+25,0		+35,4			+30,0
Примечание: в числителе – показатели за 20-25 дней до отела в знаменателе – показатели на 2-3 день после отела

Пример 3. Эффективность заявленного способа определяли в сравнении с известными способами: способами-аналогами (селенит натрия + тетравит, селенит натрия + тетравит + янтарная кислота) и базовым способом (фармакопрофилактика с применением схемы: тетравит + окситоцин + синестрол) на 4 группах глубокостельных коров, сформированных по принципу аналогов в зимнестойловый период. Все животные содержались в одинаковых условиях на аналогичном рационе. После курса профилактики за коровами вели клинические наблюдения, учитывали характер течения предродового периода, родов и послеродового периода, заболеваемость, сроки инволюции половых органов, число осемененных и оплодотворившихся из них, сроки от отела до оплодотворения, продолжительность бесплодия. Результаты представлены в таблице 6.

Как видно из таблицы 6, заявленный способ обеспечивал значительное по сравнению с известными способами повышение основных показателей, сопоставимое со способом-прототипом.

Полученные данные подтвердили осуществимость способа и достижение технического результата – профилактика бесплодия у коров введением в схему, включающую сочетанное применение селенита натрия, тетравита и янтарной и аскорбиновой кислот. Предложенное сочетание антиоксидантов обеспечило резкое снижение уровня токсических продуктов ПОЛ и как результат – повышение активности системы АОЗ и естественной резистентности. Повышение уровня резистентности по основным показателям до физиологической нормы создало необходимую основу для эффективной лечебно-профилактической защиты коров. Высокая эффективность способа, полученная в неблагоприятных условиях, простота его осуществления и экономичность позволяют рекомендовать применение способа в хозяйствах различных форм собственности.

Источники информации

2. Шахов А.Г., Бузлама B.C., Самохин В.Т. Эколого-адаптационная стратегия защиты здоровья и продуктивности животных в современных условиях. Воронеж, 2001, с.3-4.

6. Червяков Д.К., Евдокимов П.Д., Вишкер В.C. Лекарственные средства в ветеринарии. М.: Колос, 1977, – с.290-338.

7. Теория и практика использования биологически активных веществ в животноводстве, Киров, 6-7 октября 1998 г.: Тез. докл. науч. конф. Киров, 1998, – 98 с.

8. Соколов В.Д. Фармакология, 2-е изд., исправленное и дополненное. М.: Колос, 2000, – с.360-361.

9. RU 2201237 C2, 2003.03.27.

10. RU 2212888 C2, 2003.09.07.

11. Емелина Н.Т. и др. Витамины в кормлении сельскохозяйственных животных и птицы. М.: Колос, 1980.

13. Методические рекомендации по диагностике, терапии и профилактике болезней органов размножения. М., 2000, – 39 с. – аналог.

Формула изобретения

Способ профилактики бесплодия у коров, включающий применение селенита натрия, тетравита и янтарной кислоты, отличающийся тем, что селенит натрия в виде 0,5%-ного раствора в дозе 10 мл вводят внутримышечно однократно за 20-25 дней до отела; тетравит вводят в дозе 10 мл двукратно до и двукратно после отела с интервалом в 10 дней, янтарную кислоту в смеси с аскорбиновой кислотой в соотношении 1:1 вводят ежедневно в течение 20-25 дней до и после отела из расчета смеси на голову 0,5-1,5 г.

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 27.04.2007

Извещение опубликовано: 20.12.2008 БИ: 35/2008