Патент на изобретение №2281502

(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ИЗ КРОВИ БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ ГЕЛЬМИНТОВ, ЛИЧИНОК ГЕЛЬМИНТОВ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов. Для обнаружения гельминтов и их личинок получают микроскопические препараты, для чего смешивают пробы крови с антикоагулянтом К₃-ЭДТА и добавляют концентрированный раствор глюкозы не более 10% от объема пробы крови для создания в пробе крови концентрации глюкозы 200-400 ммоль/л, затем инкубируют пробы крови в термостате при 37-60°С в течение 15-30 минут, из верхнего слоя надосадочной жидкости отбирают 10-15 мкл, смешивают с 1% раствором Люголя, готовят мазки и проводят микроскопирование. Изобретение позволяет выявить паразитов в 100% случаях.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для выделения из крови больных, например больных сахарным диабетом I и II типов, гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов. Предложенный способ является новым, ранее в научной и медицинской литературе не описан.

Целью изобретения является разработка способа выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.

Поставленная цель достигается способом получения препарата крови на предметном стекле путем предварительного забора крови у больного с антикоагулянтом К₃-ЭДТА (калиевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты); добавлением концентрированного раствора глюкозы (не более 10% от объема пробы крови) для создания в пробе крови концентрации глюкозы 200-400 ммоль/л; инкубированием пробы крови в термостате при 37-60°С в течение 15-30 минут; забором из верхнего слоя надосадочной жидкости 10-15 мкл жидкости и перенесением ее на предметное стекло; далее добавлением на предметное стекло 10-15 мкл 1% раствора Люголя; смешиванием растворов на предметном стекле и приготовлением тонкого мазка; высушиванием мазка при 37°С в течение 15-20 минут и микроскопии полученного препарата с объективами 10 и 40, что позволяет обнаружить в крови больных сахарным диабетом I и II типов гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.

Новым в предложенном способе является то, что в результате последовательного применения описанных этапов удалось выявить в 100% случаев в крови больных сахарным диабетом I и II типов имевшихся там гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.

Новый способ обнаружения гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов в крови больных сахарным диабетом необходим для улучшения диагностики и лечения этих больных.

Отрабатывая отдельные этапы способа, проверены и обоснованы параметрические значения концентраций, времени, температуры и так далее, что отражено в приведенных примерах.

Пример 1.

1. У больного сахарным диабетом берется 0.5 мл венозной крови с антикоагулянтом К₃-ЭДТА.

2. К ней добавляется 50 мкл раствора глюкозы (раствор глюкозы готовится на физиологическом растворе с концентрацией глюкозы 2200 ммоль/л) и проба перемешивается.

3. Проба инкубируется при 60°С в течение 15 минут.

4. С поверхности надосадочной жидкости берут 15 мкл и переносят на предметное стекло в виде капли.

5. Рядом на предметное стекло помещается 15 мкл 1% раствора Люголя, растворы на предметном стекле смешиваются и делается тонкий мазок.

6. Мазок высушивается при 37°С в течение 15 минут.

7. Микроскопия препарата с объективами 10 и 40 позволила обнаружить в крови паразитов.

Пример 2.

1. У больного сахарным диабетом взято 100 мкл капиллярной крови.

2. К ней добавлено 10 мкл раствора глюкозы с концентрацией 2200 ммоль/л.

3. Проба инкубируется при 60°С в течение 15 минут.

4. С поверхности надосадочной жидкости берут 15 мкл и переносятся на предметное стекло в виде капли.

5. Рядом на предметное стекло помещается 15 мкл 1% раствора Люголя. Растворы на предметном стекле смешиваются и делается тонкий мазок.

6. Мазок высушивается при 37°С в течение 15 минут.

7. Микроскопия препарата с объективами 10 и 40 позволила обнаружить в крови паразитов.

Всего венозная и капиллярная кровь была исследована более чем у 60 больных сахарным диабетом и в во всех препаратах, приготовленных по данной методике, были обнаружены гельминты, личинки гельминтов и другие паразиты.

Предлагаемый способ позволяет в обычных лабораторных условиях с помощью недорогих реактивов получать препараты крови больных сахарным диабетом и визуально определять в них гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.

Формула изобретения

Способ выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов путем получения микроскопических препаратов, отличающийся тем, что смешивают пробы крови с антикоагулянтом К₃-ЭДТА и добавляют концентрированный раствор глюкозы не более 10% от объема пробы крови для создания в пробе крови концентрации глюкозы 200-400 ммоль/л, затем инкубируют пробы крови в термостате при 37-60°С в течение 15-30 мин, из верхнего слоя надосадочной жидкости отбирают 10-15 мкл, смешивают с 1%-ным раствором Люголя, готовят мазки и проводят микроскопирование.

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 20.04.2006

Извещение опубликовано: 10.12.2007 БИ: 34/2007