|
|
(21), (22) Заявка: 2004138132/04, 27.12.2004
(24) Дата начала отсчета срока действия патента:
27.12.2004
(46) Опубликовано: 20.06.2006
(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске:
GB 1120337, А, 26.01.1967. GB 1375770, А, 27.11.1974. K.FLOREY, Anal. Profiles Drug. Subs., 1, 397, 1972.
Адрес для переписки:
123182, Москва, пл. акад. И.В. Курчатова, 2, ИМГ РАН, ПЛГ
|
(72) Автор(ы):
Мясоедов Николай Федорович (RU),
Шевченко Валерий Павлович (RU),
Нагаев Игорь Юлианович (RU)
(73) Патентообладатель(и):
Институт молекулярной генетики Российской Академии наук (ИМГ РАН) (RU)
|
(54) ВЫСОКОМЕЧЕННЫЙ ТРИТИЕМ [3H]-АЦЕТОНИД 9АЛЬФА-ФТОРО-16АЛЬФА-ГИДРОКСИПРЕДНИЗОЛОНА
(57) Реферат:
Изобретение относится к высокомеченному аналогу физиологически активного соединения – высокомеченному тритием [3H]-ацетониду 9 -фторо-16-гидроксипреднизолона формулы I:
Высокомеченное тритием соединение I необходимо для изучения физиологически активного не меченного аналога.
Изобретение относится к области органической химии и может найти применение в аналитической химии, биоорганической химии, биохимии и прикладной медицине.
Для изучения физиологически активных соединений необходимы их меченые аналоги и разработка способа их получения.
Известно, что замена атомов соединений на их меченые аналоги не приводит к изменению каких-либо свойств исходного соединения, включая их биологическую активность (Evans Е.А. – Tritium and its compounds London Butterworths,1974, p.48) [1].
Известен ацетонид 9-фторо-16-гидроксипреднизолона формулы:
Данное соединение является известным биологически активным соединением и используется для лечения хронической астмы
(K.FIorey, Anal. Profiles Drug Subs. 1, 397 1972) [2].
Однако его меченный тритием аналог не описан.
Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является расширение ассортимента меченых аналогов физиологически активных веществ.
Достигается указанный технический результат получением нового меченого физиологически активного соединения – высокомеченного тритием [3Н]-ацетонида 9-фторо-16-гидроксипреднизолона формулы:
Ниже приведен пример реализации изобретения.
Пример 1.
В первую камеру реакционной двукамерной ампулы помещали катализатор: 30 мг окиси палладия и 30 мг 5% PdO/BaSO4, в другую – 225 мкл абсолютного диоксана, 25 мкл триэтиламина и 5 мг ацетонида 9-фторо-16-гидроксипреднизолона. Вторую камеру замораживали жидким азотом, ампулу вакуумировали до давления 0.1 Па и заполняли газообразным тритием до давления 333 гПа. Затем первую камеру нагревали до 70°С, в результате чего окись палладия восстанавливалась. Полученная тритиевая вода перемораживалась во вторую камеру. Реакционную ампулу вакуумировали до давления 0,1 Па, продолжая нагревать первую ампулу до 70°С, и заполняли аргоном. Затем содержимое второй камеры переносили в первую камеру, которую запаивали. Таким образом, реакционная смесь состояла из восстановленного катализатора, тритиевой воды, триэтиламина и раствора ацетонида 9-фторо-16-гидроксипреднизолона в диоксане. Содержимое ампулы нагревали в течение 30 мин при 140°С. Затем ампулу вскрывали, реакционную смесь разбавляли 0.5 мл метанола, катализатор отделяли фильтрованием и промывали метанолом (5×1 мл). Тритиевую воду, диоксан и триэтиламин отгоняли на роторе. Лабильный тритий удаляли и полученный продукт несколько раз растворяли в метаноле (5х2 мл), упаривая последний.
Первый этап очистки полученного [3H]-ацетонида 9-фторо-16-гидроксипреднизолона проводили методом тонкослойной хроматографии. Реакционную смесь растворяли в 0,1 мл метанола и наносили на силикагельную пластинку Sorbfil (АО “Сорбполимер”, ПТСХ-П-А-УФ). Подвижная фаза – хлороформ-ацетон (10:1) Rf=0.26. Зону, содержащую [3H]-ацетонид 9-фторо-16-гидроксипреднизолона, вырезали и экстрагировали метанолом (5×5 мл). Метанол упаривали и анализировали методом ВЭЖХ.
ВЭЖХ [3H]-ацетонида 9-фторо-16-гидроксипреднизолона проводили на колонке Kromasil 100 C18, 7 мкм, 4×150 мм, в системе метанол-вода (70:30), скорость элюента – 1,0 мл/мин, время удерживания – 4,19 мин. Для приема и обработки хроматографических данных использовался программно-аппаратный комплекс “МультиХром” (ЗАО “Амперсенд”, Россия) на базе IBM PC/AT. Радиоактивность измеряли на сцинтилляционном счетчике с эффективностью регистрации трития 30% в диоксановом сцинтилляторе.
Выход [3H]-ацетонида 9-фторо-16-гидроксипреднизолона после очистки составил 22%, молярная радиоактивность 1,3 Ки/ммоль. Радиохимическая чистота 97-99%.
Таким образом получено новое высокомеченное тритием физиологически активное соединение.
Формула изобретения
Высокомеченный тритием [3Н]-ацетонид 9-фторо-16-гидроксипреднизолона формулы
|
|
