Патент на изобретение №2276368

(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ АНТИОКСИДАНТНОГО ДЕЙСТВИЯ ПОЛИВИТАМИННОГО КОМПЛЕКСА ПРИ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ЧЕЛЮСТНО-ЛИЦЕВОЙ ОБЛАСТИ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области медицины, а именно челюстно-лицевой хирургии и биохимии, и касается способа прогнозирования антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области путем исследования витаминов в плазме крови, где определяют количество витаминов A, B_c, D, К, Е нейтрализующих свободные радикалы О^2- и ионы H⁺, ОН^–, количество витаминов B₁, B₂, В₆, С, РР, В₃, В₁₂, H, выделяющих данные ионы при преобразовании в активные метаболиты, коферменты и простетические группы, затем вычисляют коэффициент синергизма Кс по формуле: К_с=(A+B_c+E+D+K)/(В₁+В₂+В₆+С+РР+В₃+В₁₂+Н) и при его значении, большем 1,1449, прогнозируют антиоксидантное действие, а при значении, меньшем 1,1449, прогнозируют отсутствие антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления. Технический результат: разработка нового метода прогнозирования антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области. 6 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно челюстно-лицевой хирургии и биохимии.

Результаты исследований витаминной обеспеченности населения России свидетельствуют о массовом распространении полигиповитаминозов среди значительной части взрослого населения. Гиповитаминозный фон значительно усугубляется при любых заболеваниях. Поэтому лечение практически любого больного должно включать коррекцию витаминного дефицита включением в комплексную терапию поливитаминных препаратов [16]. Однако в большинстве стран рынок заполнен неэффективными и нерациональными комбинированными поливитаминными препаратами, а также витаминами в высоких дозах, что представляет угрозу для здоровья и оборачивается дополнительными расходами. Из 4 регионов мира в обзоре руководств по назначению было указано в 1990-1991 годах, что более 80% из 636 витаминов нельзя было рекомендовать. В США в сообщении 1991 года указывалось на обнаруженные огромные различия в количестве витаминов в более чем 3400 различных препаратов, находившихся на рынке в 1986 году. В состав препаратов могли входить любые количества витаминов от 7% рекомендуемой суточной потребности витамина Е до 50000% суточной потребности витамина В₆ в препаратах с одним ингредиентом; и от менее 0,5% суточной потребности витамина А, Е, B₁, В₃, В₆ до 53333% суточной потребности витамина B₁ в препаратах поливитаминов [21, 22]. Известно, что витамины могут взаимно усиливать оказываемые ими физиологические эффекты, взаимно уменьшая токсичность [10]. При этом количественная характеристика этого явления синергизма остается абсолютно неизученной.

При воспалении активируется свободнорадикальное окисление. Установлено также, что противомикробная защита осуществляется при непременном участии свободных радикалов и инициируемых ими реакций [19].

Точный механизм бактерицидного действия О^2- неизвестен; однако in vitro мощный окислитель О^2- вызывает (неизвестным путем) нарушение структуры нуклеиновых кислот и полисахаридов и окисляет тиоловые группы в белках [13].

Таким образом, организмы, использующие кислород, должны, сталкиваться с угрозой внутриклеточного образования О₂ ^– и Н₂О₂. Для защиты от этих реакционоспособных соединений кислорода служат ферментативные защитные механизмы. Организмы, которые не выработали такие защитные механизмы, могут обитать только в анаэробных условиях [12].

Результаты исследований, полученные С.Г.Сулеймановой с соавт., 1992, показывают, что течение всех 3 форм гнойно-воспалительных заболеваний ЧЛО, а именно: абсцесс, флегмона, хронический остеомиелит нижней челюсти, сопровождается развитием синдрома липидной гипероксидации, выражающейся в увеличении содержания гидроперекисей липидов в плазме и эритроцитах крови на фоне низкого уровня -токоферола [17].

Активация процесса ПОЛ вызывает существенные изменения в составе биологических мембран клеток. Образующиеся при окислении ненасыщенных жирных кислот токсичные продукты (перекиси, эпоксиды и др.) разрушают структуру и нарушают функцию различных биологических мембран, вызывают инактивацию ферментов, повреждают белки и нуклеиновые кислоты, влияя тем самым на функциональную активность организма в целом [17].

Уровень свободнорадикальных (СР) процессов и активность параметров антиоксидантной системы (АОС) в перефирической крови в известной мере отражают общее состояние этой системы, функционирование которой обеспечивает устойчивость организма к внешним воздействиям [6].

При этом известно, что в отличие от других незаменимых пищевых веществ (незаменимых аминокислот, полиненасыщенных жирных кислот) витамины не служат пластическим материалом или источником энергии [18]. Следовательно, такие продукты, как Н⁺, ОН^–, О^2-, образующиеся при преобразовании витамина в активный метаболит, кофермент или простетическую группу, должны утилизовываться организмом чтобы избежать мутагенных последствий этих веществ.

Таким образом, все витамины можно разделить на две группы:

1-я группа – это витамины, нейтрализующие свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН^–.

2-я группа – это витамины, являющиеся источником свободных радикалов О^2- и ионов Н⁺, ОН^–.

1-я группа.

Витамин А.

При всасывании в кишечнике эфиров витамина А, растворенных в жирах пищи, их молекула подвергается ряду превращений: гидролизу с образованием витамина А-спирта, эмульгированию его желчными кислотами с образованием мицелл, всасыванию и реэтерификации в кишечных ворсинках с последующим поступлением эфиров витамина А в составе хиломикронов по лимфатическим путям в печень. В печени хиломикроны, содержащие эфиры витамина А, подвергаются расщеплению с высвобождением ретинилпальмитата, который гидролизуется с образованием свободного ретинола. Последний снова эстерифицируется и превращается вторично в пальмитат витамина А, который соединяясь с белками печени, образует запасную форму этого витамина [4].

Предварительным этапом включения витамина А в метаболические процессы является расщепление его эфиров, в основном ретинилпальмитата, с образованием активной формы витамина А-ретинола [4].

Первым этапом окислительного превращения витамина А и промежуточным этапом в процессе превращения каротина является альдегид витамина А-ретиналь. Окисление витамина А-спирта в витамин А-альдегид носит обратимый характер и катализируется алкогольдегидрогеназой и альдегидредуктазой в присутствии НАД и НАДФ [4].

Витамин А-кислота (ретиноевая кислота) является продуктом необратимого окисления ретиналя. В процессе обмена ретиноевая кислота, как и ретинол, подвергается окислительному декарбоксилированию. Соединение, образующееся при 14-С-декарбоксилировании ретиноевой кислоты, окончательно идентифицировано. Этот процесс прослежен in vivo. Возможно, начальный этап процесса связан с механизмом реакции образования свободных радикалов. Однако независимо от пускового механизма сам факт декарбоксилирования in vivo небольших количеств ретинола и ретиноевой кислоты показывает, что этот процесс является, по-видимому, одним из нормальных путей обмена витамина А, а не реакцией, связанной с детоксикацией вводимых извне больших доз ретиноевой кислоты [4].

Следовательно, в основе обмена витамина А лежат процессы его этерификации (с образованием сложного эфира и воды, где катализатором являются ионы Н⁺), гидролитического расщепления эфиров (взаимодействие с ионами воды Н⁺ и ОН^–, т.е. ионом водорода и гидроксила воды) и ферментативного окисления витамина А-спирта (взаимодействие витамина А-спирта и О^2- с последующим образованием витамина А-альдегида и воды).

Таким образом, в организме витамин А препятствует образованию свободных радикалов О^2- и ионов H⁺, ОН^–.

Витамин D.

Биологически активными продуктами превращения витамина D в тканях, обладающие более полярным характером, чем холекальциферол (витамин D₃) и эргокальциферол (витамин D₂) является 25-оксихолекальциферол и 25-оксиэргокальциферол, а также 1,25-диоксихолекальциферол соответственно [4].

Образование из холекальциферола 25-оксихолекальциферола происходит за счет присоединения О^2- в положении 25 атома, а 1,25-диоксихолекальциферол образуется за счет присоединения к 25-оксихолекальциферолу О^2- в положении 1 атома [4].

Таким образом, в организме витамин D препятствует образованию свободных радикалов О^2-.

Витамин Е.

В понятие “витамин Е” объединена сравнительно большая группа природных и синтетических веществ, являющихся производными токола и обладающих в разной степени биологической активностью -токоферола.

Токоферолы легко вступают во взаимодействие со свободными радикалами и активными формами кислорода. Это обуславливает их способность тормозить свободнорадикальные процессы перекисного окисления органических соединений (в частности, ненасыщенных жирных кислот) молекулярным кислородом.

Токоферолы чувствительны к кислороду воздуха (ультрафиолетовому свету и другим окислителям), которые превращают их в соответствующие хиноны [18].

Данное превращение происходит при окислении витамина Е (взаимодействие -токоферола и О^2- с последующим образованием -токохинона и воды) [7,18].

Токофероновая кислота и токоферонолактон являются активными формами -токоферола. Лишь небольшая часть -токоферола, превращающегося в токоферонолактон, проходит через стадию -токохинона [4].

Данное превращение происходит при взаимодействии -токоферола и О^2- с последующим образованием токофероновой кислоты и токоферонолактона [7].

Таким образом, в организме витамин Е препятствует образованию свободных радикалов О^2-.

Витамин К.

Витамины группы К представлены в живых организмах различными производными 2-метил-1,4-нафтохинона, различающимися характером боковых цепей. К данной группе относятся два типа хинонов с изопреноидными боковыми цепями: витамин K₁ (филлохинон) и витамин К₂ (менахинон), природные аналоги которых способны превращаться друг в друга.

При восстановлении хинонов образуются соответствующие гидрохиноны за счет присоединения 2Н⁺ в положении 1 и 4 атомов [4].

Таким образом, в организме витамин К способен связывать ионы Н⁺.

Витамин В_с (фолиевая кислота).

Фолиевая кислота (В_с) метаболически неактивна, но является предшественником коферментов, включающихся в обменные процессы.

Важной химической особенностью фолиевой кислоты является способность ее птеридинового кольца к восстановлению путем присоединения 4 водородных атомов в 5, 6, 7 и 8 положениях с образованием тетрагидрофолиевой кислоты (ТГФК) [4].

Таким образом, в организме витамин В_с при преобразовании в кофермент ТГФК связывает 4 атома Н⁺.

2-я группа.

Витамин B₁ (тиамин).

Биологически активной формой, с которой связаны основные функции витамина B₁ в живых организмах, является пирофосфорный эфир тиамина, в образовании которого принимает участие АТФ, ионы магния и специфический фермент – тиаминкиназа. Опытами с меченным ³²P АТФ доказан перенос на тиамин целиком пирофосфатной группы тиаминкиназы [2].

Реакция идет по общему уравнению [4]:

Таким образом, при фосфорилировании тиамина происходит замещение атома водорода Н⁺ пирофосфатной группой.

Витамин В₂ (рибофлавин).

Рибофлавин, всосавшийся в кишечнике, подвергается фосфорилированию. При этом образуются две коферментные формы: флавинмононуклеотид (ФМН) и флавинадениндинуклеотид (ФАД) [4].

Простетическая группа флавопротеидов представлена не свободной молекулой рибофлавина, а в виде комплексов с фосфатом, называемый рибофлавин-5′-фосфатом или флавинмононуклеотидом (ФМН), или с адениловой кислотой, называемый флавинадениндинуклеотидом (ФАД) [2].

ФМН синтезируется в организме животных из свободного рибофлавина и АТФ при участии специфического фермента – флавинокиназы. Реакцию синтеза этого кофермента можно представить следующим уравнением [2]:

Образование ФАД в тканях также протекает при участии специфического фермента – флавиннуклеотифосфорилазы (или ФАД-синтетазы). Исходным веществом для синтеза является ФМН:

Таким образом, при фосфорилировании рибофлавина происходит замещение атома водорода Н⁺ остатком фосфорной кислоты при образовании ФМН. В ФМН также замещается атом водорода H⁺ остатком мононуклеотида адениловой кислоты при преобразовании в ФАД.

Витамин РР (никотиновая кислота, никотинамид, ниацин).

НАД⁺ и НАДФ⁺ образуются в организме человека из витамина ниацина. Ниацин включает никотиновую кислоту и ее амид (никотинамид) – каждое из этих соединений может выполнять функции витамина в пищевом рационе. Для синтеза НАД⁺ или НАДФ⁺ ферменты, находящиеся в цитозоле большинства клеток, используют только никотиновую кислоту, но не никотинамид.

Никотиамидный фрагмент НАД⁺ образуется из никотинатного фрагмента, когда последний находится в составе нуклеотида; амидная группа поступает из глутамата и замещает атом Н⁺ никотиновой кислоты [8].

При фосфорилировании 2′-гидроксильной группы аденозинового фрагмента НАД⁺ происходит замещение атома водорода Н⁺ остатком фосфорной кислоты при образовании НАДФ⁺ [8].

Витамин В₃ (пантотеновая кислота)

Пантотеновая кислота является амидом, образованным пантоевой кислотой и -аланином. Пантотеновая кислота легко всасывается в кишечнике и затем фосфорилируется АТФ с образованием 4′-фосфопантотената (данной реакции предшествует процесс диссоциации пантотеновой кислоты на ионы с выделением иона H⁺, который не участвует в дальнейших превращениях). На пути превращения в активный кофермент А к фосфопантотенату присоединяется цистеин, затем отщепляется карбоксильная группа последнего (что равносильно присоединению тиоэтиламина), в результате образуется 4′-фосфопантетеин. Подобно многим коферментам, в состав которых входят водорастворимые витамины, активная форма пантотената содержит адениловый нуклеотид; 4′-фосфопантетеин аденилируется с образованием дефосфокофермента А. На конечной стадии АТФ фосфорилирует дефосфокофермент А по 3′-гидроксильной группе рибозы с образованием кофермента А [8].

Таким образом, при образовании из пантотеновой кислоты кофермента А происходит отщепление атома водорода H⁺.

Витамин В₆ (пиридоксин).

Формами витамина В₆ являются пиридоксин, пиридоксаль и пиридоксамин.

Основной метаболически активной формой витамина В₆ является фосфорный эфир пиридоксаля – пиридоксаль-5-фосфат.

Биосинтез пиридоксальфосфата в организме может осуществляться либо путем фосфорилирования пиридоксаля при участии пиридоксалькиназы, либо путем фосфорилирования пиридоксина и пиридоксамина и последующего окисления их пиридоксинофосфатоксидазой [4].

Таким образом, при фосфорилировании витамина В₆ происходит замещение атома водорода H⁺ остатком фосфорной кислоты при образовании пиридоксаль-5-фосфата.

Витамин B₁₂.

Последовательность превращения витамина B₁₂ в кофермент: кобаламин (оксикобаламин (Со¹⁺)5′-дезоксиаденозилкобаламин (Со¹⁺) или метилкобаламин (Со¹⁺).

Образование Со¹⁺-производных кофермента может происходить путем -элиминирования (отщепления атома водорода из -положения рибозильного остатка кофермента) в результате взаимодействия кофермента с оксигруппой апофермента [4].

Таким образом, при превращении витамина B₁₂ происходит отщепление атома водорода Н⁺.

Витамин С (аскорбиновая кислота).

Приматы (человек и высшие обезьяны), морская свинка и некоторые другие животные не способны к биосинтезу аскорбиновой кислоты. Они нуждаются в экзогенном витамине С.

При окислении аскорбиновой кислоты в организме животных и человека образуется дегидроаскорбиновая кислота (ДАК) (эта реакция сопровождается выделением двух атомов водорода Н⁺), которая затем превращается в 2,3-дикето-L-гулоновую кислоту (эта реакция сопровождается выделением H₂O). При распаде последней образуется щавелевая кислота. Кроме того, в результате декарбоксилирования дикетогулоновой кислоты из нее образуется ксилоза, которая далее по обычной схеме превращается в глюкозу.

Для поступления витамина С в клетки важен переход аскорбиновой кислоты в ДАК. Такие данные имеются для эритроцитов, в которые ДАК диффундирует без энергетических затрат. ДАК в клетке за счет НАДФН быстро восстанавливается в аскорбиновую кислоту, Скорость выхода аскорбиновой кислоты из эритроцита приблизительно в 40 раз меньше по сравнению с вхождением ДАК в эритроцит. Это объясняется тем, что ДАК, являясь неионизированной и жирорастворимой формой витамина С, более способна к диффузии, чем отрицательный ион аскорбиновой кислоты, поскольку мембрана эритроцита имеет заряд отрицательного знака. Таким образом, есть основание считать, что ДАК является транспортной формой витамина С, во всяком случае в отношении ее включения в эритроциты [4].

Таким образом, для поступления витамина С в клетки важен переход аскорбиновой кислоты в ДАК, то есть ее транспортную форму, что сопровождается выделением двух атомов водорода H⁺.

Биотин (витамин Н).

В биотиновых ферментах карбоксильная группа биотина соединена с -NH₂-группой лизина ферментного белка ковалентной связью. Таким образом, биотиновый фермент представляет собой молекулу ацетилкоэнзим-А-карбоксилазы, в которой кофактор биотин ковалентно связан с апоферментом. Образование данного фермента происходит с отщеплением гидроксила воды ОН^– от биотина в положении 10 атома.

Биотин является коферментом ацетилкоэнзим-А-карбоксилазы. Существует также еще другая форма битинфермента – это -метил-кротонилкоэнзим-А-карбоксилаза, данная форма способна карбоксилировать свободный биотин, переводя его в 1′-N-карбоксибиотин в реакции карбоксилирования или фиксации СО₂ (с участием CO₂ ил НСО₃ ^–) сопряженные с распадом АТФ в соответствии с уравнением:

RH+НСО₃ ^–+АТФR-COOH+АДФ+Н₃PO₄

В то же время известно, что органические кислоты, аналогично неорганическим кислотам, обладают ярко выраженными кислотными свойствами и в воде происходит их диссоциация на ионы:

R-COOHR-COO^–+H⁺

При этом R-COO^– – это СО₂˜биотинфермент, структура которого считается общепринятой [4].

Таким образом, при образовании из биотина (витамина Н) CO₂˜биотинфермента происходит выделение иона водорода Н⁺ и гидроксила воды ОН^–.

Таким образом, все рассмотренные витамины можно разделить на две группы:

1-я группа – это витамины, нейтрализующие свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН^–. К ним можно отнести витамины А, В_с, Е, D, К.

2-я группа – это витамины, являющиеся источником ионов Н⁺ и ОН^–. К ним можно отнести витамины B₁, В₃, В₆, С, РР, В₅, Н, В₁₂.

Следовательно, количество витаминов, нейтрализующих свободные радикалы О^2- и ионов Н⁺, ОН^–, должно быть равно количеству витаминов, выделяющих данные ионы при преобразовании в активные метаболиты, коферменты и простетические группы, а их соотношение должно приближаться в плазме крови к цифре “1”. Такое соотношение двух групп было рассмотрено нами как коэффициент синергизма витаминов (К_с):

К_с=1-я группа/2-я группа

К_с=(А+В_с+Е+В+К)/(В₁+В₂+В₆+С+РР+В₃+В₁₂+Н)

Исходя из имеющихся литературных данных [4, 9, 18], приведенных в таблице 1, было проведено исследование К_с для содержания витаминов в плазме крови, пище и моче. Причем было обнаружено, что данный коэффициент существенно отличается по содержанию в пище и плазме крови. Так если при максимальном содержании витаминов в плазме крови он составил 1,1449 (1,2), то есть приближается к “1”, то при минимальном содержании витаминов в крови он повышается до 2,1 (что можно рассматривать как адаптацию антиоксидантной системы организма). При этом К_с для суточной нормы содержания витаминов в пище составил 0,3-0,4.

Следовательно, если в поливитаминном препарате К_с будет выше 1,2, дополнительно к лечебному действию, оказываемому витаминами, он будет обладать выраженным антиоксидантными свойствами.

При исследовании К_с в комплексном поливитаминном препарате “Винибис” было обнаружено, что значение К_с составляет 15 (таблица 1). При этом содержание в минимальной суточной лечебной дозе данного препарата (4 г) большинства витаминов от 2 и более 1000 раз меньше минимальной лечебной дозы (таблица 1). Ранее было обнаружено, что антиоксиданты оказывают выраженное действие и в сверхмалых дозах [20]. Поэтому было предположено, что комплексный поливитаминный препарат “Винибис” сохранит лечебное действие в дозе меньшей 4 г. С целью подтвердить сделанное нами предположение, было проведено исследование лечебного действия препарата “Винибис” на очаг воспаления при острых гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области в дозе от 1,3 до 3,25 г, что соответствует 2-5 таблеткам данного препарата.

Известно, что при остром одонтогенном остеомиелите, осложненном флегмоной, в ротовой жидкости увеличивается содержание элементов, которые преимущественно содержатся в костной ткани [11], что позволяет судить о динамике патологического процесса. Известно, что кальций является основным структурным элементом костей скелета и зубов человека: 99% кальция содержится в костной и хрящевой ткани. Кроме того, известно также, что стронций в организме человека конкурирует с кальцием за включение в кристаллическую решетку оксиапатита кости. При увеличении концентрации кальция в рационе в 5 раз накопление стронция в организме снижается вдвое [1]. Кроме того, известно также, что около 80-87% всего фосфора находится в скелете человека.

Обмен кальция и кремния тесно связан между собой. Кремний способствует биосинтезу коллагена и образованию костной ткани. Установлено, что при переломах костей количество кремния в области перелома возрастает почти в 50 раз [3].

Поэтому было выбрано изучение содержания фосфора (Р), кальция (Са), кремния (Si) и стронция (Sr) в ротовой жидкости в процессе комплексного лечения препаратом “Винибис” при острых гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области, а также определение соотношения концентраций этих элементов как критерия диагностики и лечения.

Известно, что атомно-абсорбционные методы дают возможность определения практически всех элементов периодической системы и отличаются высокой избирательностью и чувствительностью (до 10^-14 г). Поэтому был выбран прямой электротермический атомно-абсорбционный анализ ротовой жидкости на содержание данных элементов.

Материалы и методы исследования.

Обследовано 39 больных в возрасте от 19 до 68 лет (таблица 2, таблица 3, таблица 4), из них:

– с острым одонтогенным гнойным периоститом (ОП) – 6 человек;

– с острым одонтогенным остеомиелитом (OO) – 6 человек;

– с травматическим переломом нижней челюсти, осложненным нагноением костной раны (НКР) – 6 человек;

– с острым одонтогенным остеомиелитом, осложненным флегмоной (ОФ) – 8 человек;

– с хроническим травматическим остеомиелитом, осложненным гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях (ТОФ) – 6 человек;

– с одонтогенной аденофлегмоной (АФ) – 6 человек.

Исследовали смешанную нестимулированную слюну (ротовую жидкость) у 6 практически здоровых людей без стоматологических заболеваний в возрасте от 20 до 27 лет (контрольная группа) (таблица 5, таблица 6).

Курс лечения комплексным поливитаминным препаратом “Винибис” при остром одонтогенном гнойном периостите и при остром одонтогенном остеомиелите составлял 5 дней по 1 таблетке 2 раза в день (1,3 г в сутки); при нагноении костной раны составлял 7 дней по 1 таблетке 2 раза в день (1,3 г в сутки); при остром одонтогенном остеомиелите, осложненном флегмоной, составлял 5 дней по 1 таблетке 3 раза в день (1,95 г в сутки); при хроническом травматическом остеомиелите, осложненном гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях, составлял 5 дней по 1 таблетке 4 раза в день (2,6 г в сутки); при одонтогенной аденофлегмоне составлял 5 дней по 1 таблетке 5 раз в день (3,25 г в сутки).

Методика исследования смешанной нестимулированной слюны (ротовой жидкости). Пациент предварительно поласкает рот бидистилированной водой в количестве 50 мл в течение 5 мин. Ротовую жидкость набирают в сухую чистую полиэтиленовую пробирку в количестве 2,0 мл. Ротовая жидкость отбирается микропипеткой объемом 10-20 мкл и вводится в кювету атомно-абсорбционного спектрометра. Регистрируется сигнал атомной абсорбции соответствующего элемента. Условия регистрации: спектрометр AAS-30 с атомизатором ЕА-3 фирмы “Carl-Zeiss-Yena” (Германия) предварительно градуируется по растворам фосфора (Р), кальция (Са), кремния (Si) и стронция (Sr) с известной концентрацией. По этому результату выдается сразу в единицах концентрации. Полное время анализа (от момента взятия пробы у пациента до получения результата анализа) составляет 2 минуты.

Забор биологической пробы проводился через 2-3 часа после завтрака (10-11 часов утра). Перед сбором слюны обследуемые тщательно прополаскивали рот бидистилированной водой (50 мл), 2-3 раза сплевывали в раковину, после чего в течение 10-15 мин способом сплевывания собирали слюну в чистые полиэтиленовые пробирки. Слюну собирали в хорошо освещенном помещении, при этом обследуемые сидели, дышали через нос, не разговаривали и не курили.

Полученные данные обработаны методом вариационной статистики. Расчеты производили с помощью персонального компьютера типа IBM PC/XT. При обработке цифровых данных проводилось вычисление средней арифметической, средней ошибки средней арифметической, определение достоверности разности средних величин (по критерию t Стьюдента).

Были получены результаты, которые представлены в таблице 2, таблице 3, таблице 4, таблице 5, таблице 6.

Результаты исследования.

В процессе лечения острого одонтогенного гнойного периостита препаратом “Винибис” (группа из 3 человек) из-за увеличения Sr соотношение Ca/Sr уменьшилось с 1881±378 до 513±170 (р<0,05). Без использования препарата “Винибис” (группа из 3 человек) соотношение Ca/Sr уменьшалось незначительно (р>0,05).

В процессе комплексного лечения острого одонтогенного остеомиелита препаратом “Винибис” (группа из 3 человек) концентрация Р не изменялась по сравнению с контрольной группой (6 человек) 192,77±29,67 мкг/мл (р>0,05). Без “Винибиса” (группа из 3 человек) его концентрация наоборот увеличивалась с 196,47±33,12 до 302,73±14,27 мкг/мл (р<0,05).

В процессе лечения нагноения костной раны соотношение Ca/Si увеличивалось до значений контрольной группы (6 человек). Без использования препарата “Винибис” (группа из 3 человек) соотношение Ca/Si увеличивалось незначительно (р>0,05). С использованием препарата (группа из 3 человек), соотношение Ca/Si увеличивалось значительно при выздоровлении (р<0,05).

У пациентов с острым одонтогенным остеомиелитом, осложненным флегмоной, при лечении без использования препарата “Винибис” (группа из 5 человек) концентрация Са в ротовой жидкости увеличивалась с 75,71±14,63 до 95,56±7,37 мкг/мл (р>0,05). С использованием препарата (группа из 3 человек) концентрация Са уменьшалась с 112,09±8,05 до 60,49±2,75 мкг/мл (р<0,05). В контрольной группе здоровых людей (6 человек) концентрация Са составила 54,78±4,47 мкг/мл.

В процессе лечения хронического травматического остеомиелита, осложненного гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях, с препаратом “Винибис” (группа из 3 человек) соотношение Ca/Si уменьшалось с 258±60 до 98±35 (р>0,05). Без “Винибис” (группа из 3 человек) это соотношение наоборот увеличивалось с 330±151 до 427±35 (р<0,01). В контрольной группе здоровых людей (6 человек) оно составило 133±29.

У пациентов с одонтогенной аденофлегмоной при лечении без использования препарата “Винибис” (группа из 3 человек) соотношение концентраций Ca/Sr не изменялось и составило 511±108. С использованием препарата (группа из 3 человек) соотношение Ca/Sr увеличивалось с 208±59 до 975±98 (р<0,05). В контрольной группе здоровых людей (6 человек) оно составило 3656±925.

Вывод: Использование препарата “Винибис” в комплексном лечении при остром одонтогенном гнойном периостите способствует уменьшению срока пребывания в стационаре с 8 до 5 койко-дней и способствует выведению Sr из костной ткани.

Использование данного препарата при остром одонтогенном остеомиелите предупреждает увеличение концентрации Р и развитие остеопороза, и уменьшает срок лечения с 13 до 11 койко-дней.

При травматическом переломе нижней челюсти, осложненного нагноением костной раны, препарат “Винибис” прекращает патологический процесс в костной ране и увеличивает соотношение Ca/Si из-за уменьшения концентрации Si, поступающего из линии перелома. Без использования данного препарата соотношение Ca/Si в среднем на 17 день после травмы достоверно не изменяется (р>0,05) вследствие процесса резорбции соединительной ткани в области линии перелома. Следовательно, данный комплексный поливитаминный комплекс способствует более ранней консолидации отломков и уменьшает срок пребывания в стационаре с 17 до 15 койко-дней при нагноении костной раны (Патент РФ №2232008).

Использование препарата “Винибис” в комплексном лечении острого одонтогенного остеомиелита, осложненного флегмоной, прекращает остеопороз, снижает концентрацию Са и уменьшает срок лечения с 13 до 11 койко-дней (Патент РФ №2232029).

При хроническом травматическом остеомиелите, осложненном гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях, “Винибис” способствует прекращению резорбции костной ткани, уменьшает соотношение Ca/Si из-за снижения концентрации Са и уменьшает срок лечения с 28 до 17 койко-дней (Патент РФ №2232025).

Использование препарата “Винибис” в комплексном лечении одонтогенной аденофлегмоны увеличивает отношение Ca/Sr из-за снижения концентрации Sr в ротовой жидкости и уменьшает срок лечения с 18 до 9 койко-дней (Патент РФ №2210378).

Заключение.

Таким образом, предположение, что препарат “Винибис” как антиоксидант сохранит лечебное действие на очаг воспаления при острых гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области в дозе, меньшей 4 г, а именно от 1,3 до 3,25 г, что соответствует 2-5 таблеткам данного препарата, подтверждается полученными результатами исследований.

Следовательно, соотношение количества витаминов, нейтрализующих свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН^–, к количеству витаминов, выделяющих данные ионы при преобразовании в активные метаболиты, коферменты и простетические группы, возможно использовать как коэффициент синергизма для прогнозирования антиоксидантного действия поливитаминного комплекса.

Библиографический список.

2. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия: Учебник. / Под ред. С.С.Дебова. – М.: Медицина, 1983, 752 с., ил.

4. Витамины. Под редакцией М.И.Смирнова. – М.: Медицина, 1974. – 495 с., ил.

5. Воспалительные заболевания челюстно-лицевой области и шеи: (Руководство для врачей) / Под ред. проф. А.Г.Шаргородского. – М.: Медицина, 1985. – 352 с.; ил.

7. Жиряков В.Г. Органическая химия. – М.: Химия, 1971. – 496 с.

8. (301-1). Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: В 2-х томах. T.1. Пер. с англ.: – М.: Мир, 1993. – 384 с., ил.

10. Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2 т. Т2. – 14-е изд., перераб., испр. и доп.- М.: ООО “Издательство Новая волна”: Издатель С.Б.Дивов, 2002. – 608 с., 8 с. ил.

11. Мубаракова Л.Н. Морфофункциональная оценка состояния очага острых одонтогенных гнойно-воспалительных заболеваний методом лучевой диагностики: Автореф. дис. канд. мед. наук. – Казань, 1999. – 20 с.

12. Основы биохимии / А.Уайт, Ф.Хендлер, Э.Смит, Р.Хилл, И.Леман; пер. с англ. В.П.Сукачева, Л.М.Гинодмана, Т.В.Марченко; под ред. и с предисл. Ю.А.Овчинникова. – М.: Мир, 1981. – T.1. – 534 с.; ил.

13. Основы биохимии / А.Уайт, Ф.Хендлер, Э.Смит, Р.Хилл, И.Леман; пер. с англ. Л.М.Гинодмана; под ред. и Ю.А.Овчинникова. – М.: Мир, 1981. – Т.3. – 726 с.; ил.

18. Тутельян В.А., Спиричев В.Б., Суханов Б.П., Кудашева В.А. Микронутриенты в питании здорового и больного человека (справочное руководство по витаминам и минеральным веществам). – М.: Колос, 2002. – 424 с.: ил. (Учебники и учебные пособия для студентов высших учебных заведений).

21. Chetley A., Gilbert D., Problem Drugs, The Hague, HAL 1986, 6 of Vitamins section.

Формула изобретения

Способ прогнозирования антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области путем исследования витаминов в плазме крови, отличающийся тем, что определяют количество витаминов А, Bc, D, К, Е, нейтрализующих свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН^–, количество витаминов B₁, В₂, В₆, С, РР, В₃, В₁₂, H, выделяющих данные ионы при преобразовании витаминов в активные витамины, коферменты, простетические группы, затем вычисляют коэффициент синергизма Кс по формуле

Кс=(A+Bc+E+D+K)/(B₁+B₂+B₆+C+PP+B₃+B₁₂+H)

и при его значении большем 1,1449 прогнозируют антиоксидантное действие, а при значении меньшем 1,1449 – отсутствие антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления.

MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 01.02.2007

Извещение опубликовано: 20.06.2008 БИ: 17/2008