Патент на изобретение №2155599
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ИЗ СМЕСИ ЭКДИСТЕРОИДОВ ИЗ НАДЗЕМНОЙ ЧАСТИ РАСТЕНИЙ SERRATULA CORONATA
(57) Реферат: Изобретение предназначено для использования в области фармацевтической промышленности и технической энтомологии при получении индивидуальных экдистероидов из их смеси. Способ включает сорбцию смеси экдистероидов из раствора на гидрофобных сорбентах до достижения предельной емкости по экдизону и десорбцию, при этом сорбцию проводят из водно-органического раствора. Изобретение позволяет повысить производительность и снизить энергоемкость процесса. 1 з.п.ф-лы. Изобретение относится к способам выделения биологически активных растительных веществ фармацевтической промышленности и технической энтомологии, а именно к технологии получения индивидуальных экдистероидов из их смеси. Известен способ выделения экдизона из смеси экдистероидов, полученных из растений рода Serratula coronata, который осуществляется путем нанесения смеси экдистероидов на хроматографическую колонку с оксидом алюминия с последующим элюированием смесью органических растворителей, выпаркой и перекристаллизацией (a.с. CCCP 1146050. Способ получения 
Недостатками данного способа являются низкая производительность процесса, обусловленная использованием больших объемов растворителей и длительностью процесса.
Недостатком данного способа является длительность процесса вследствие малой растворимости 20-гидроксиэкдизона в воде.
Задачей предлагаемого изобретения является повышение производительности процесса, снижение производительности и энергоемкости процесса.
Отличительными существенными признаками изобретения является использование в качестве элюента для нанесения экдистероидов на сорбент водных растворов органических растворителей, что увеличивает растворимость экдистероидов не менее чем в 5 раз и, таким образом, приводит к значительному уменьшению объема пропускаемого через сорбент раствора, снижению длительности процесса, а следовательно, делает процесс менее трудоемким.
Способ осуществляется следующим образом:Смесь экдистероидов, полученная из надземной части растения рода Serratula coronata, растворяется в водно-органическом растворе (1-25%). Полученный раствор экдистероидов непрерывно пропускают через слой гидрофобного сорбента (по прототипу) до достижения предельной емкости по экдизону, имеющему большее сродство к поверхности сорбента, чем 20-гидроксиэкдизон, инокостерон и макистерон. Достижение предельной емкости по экдизону контролируется методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) или ВЭЖХ. Затем через слой сорбента элюируют 25-100%-ный водный раствор органических растворителей. В качестве органических растворителей используют метанол, этанол, изопропанол, н-бутанол, смесь этилацетата и метанола и др. Растворитель упаривают, а полученный таким образом концентрат, обогащенный экдизоном, очищают препаративной ВЭЖХ и перекристаллизацией. Предлагаемый способ обогащения экдистероидной смеси неосновными компонентами упрощает их дальнейшее выделение известными методами препаративной оф-ВЭЖХ. Пример осуществления способа. В стеклянную колонку (50х100 мм) заливают суспензию 30 г сорбента Диасорб С-16/250 (АО “БиоХимМак”, Россия) в 150 мл метанола. Колонку активируют 150-200 мл 20%-ного водного раствора метанола. 5 г смеси экдистероидов растворяют в 500 мл 20%-ного водного метанола и пропускают через слой активированного сорбента до обнаружения экдизона в элюате. Элюат собирают отдельными фракциями объемом по 20 мл. Контроль ведут методом ТСХ или ВЭЖХ. После обнаружения экдизона (фракция 33) через колонку пропускают по 70 мл 30, 40, 50, 60%-ного водного раствора метанола, а затем 50 мл метанола. Анализ фракций проводят методом ВЭЖХ. Фракции 15-21 содержат 20-гидроксиэкдизон; фракции 22-26 содержат смесь 20-гидроксиэкдизона и инокостeрона, обогащенную 20-гидроксиэкдизоном; фракции 27-32 – смесь 20-гидроксиэкдизона, инокостерона и макистерона А, обогащенную инокостeроном; фракции 33-39 – смесь 20-гидроксиэкдизона, инокостерона, макистерона А и экдизона, обогащенную инокостероном; фракции 40-46 – смесь экдистероидов, обогащенную экдизоном в 10 раз больше по сравнению с исходной смесью; фракция 47 – смесь макистерона С, аюгостерона С, дакрихайнанстерона. По результатам анализа фракции объединяются и упариваются. Дальнейшее выделение индивидуальных веществ ведется известным способом оф-препаративной ВЭЖХ. После препаративной ВЭЖХ выделено: 20-гидроксиэкдизона – 3,6 г (Тпл=241-242oC), инокостерона – 0,5 г (Тпл=255oC), экдизона – 0,2 г (Тпл=237-238oC). Формула изобретения
|
||||||||||||||||||||||||||
