Патент на изобретение №2270027

(54) ВАКЦИНА ПРОТИВ ТРИХОФИТИИ И МИКРОСПОРИИ ЛОШАДЕЙ

(57) Реферат:

Изобретение относится к области ветеринарной микологии. Вакцина содержит антиген из штамма Microsporum canis ВИЭВ №473 и антиген из штамма Trichophyton equinum “Английская лошадь” №508, взятые в равных соотношениях, и защитную среду на основе сахарозы и желатина. Вакцину используют с профилактической и терапевтической целью. Вакцина апробирована с положительным результатом в неблагополучных по трихофитии и микроспории коневодческих хозяйствах. Эффективность вакцины составила 96-100%.

Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарной микологии, в частности к получению вакцины против трихофитии и микроспории лошадей.

Известна ассоциированная вакцина против трихофитии и микроспории лошадей, состоящая из штамма гриба Microsporum canis ВИЭВ №473 и штамма гриба Trichophyton equinum №Л 2251/70 (СССР), взятых в равных соотношениях с конечной концентрацией каждого штамма (1-8)·10⁷ микроконидий в 1 мл вакцины и защитной среды на основе сахарозы и желатина (не патентованное название ЭКВИДЕРМ) (1).

В задачу наших исследований входило получить ассоциированную вакцину из циркулирующих в настоящее время штаммов возбудителей, обеспечивающих создание в организме лошадей напряженного и длительного иммунитета против трихофитии и микроспории.

Это удалось достичь благодаря тому, что в состав вакцины вместо штамма Trichophyton equinum №Л 2251/70 (СССР) введен новый отечественный штамм Trichophyton equinum “Английская лошадь” №508, выделенный от завезенной из Англии лошади, оказавшейся больной трихофитией. Спустя некоторое время повторились аналогичные вспышки трихофитии в других хозяйствах. От этой лошади был выделен штамм Trichophyton equinum названный “Английская лошадь” и депонированный под №508.

В процессе аттенуации данный штамм приобрел вакцинные свойства, обеспечивающие устойчивость лошадей к трихофитии, вызываемой циркулирующими на территории РФ вирулентными штаммами.

Предложенный штамм имеет следующие свойства:

КУЛЬТУРАЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА. Колонии белые, складчатые, имеется выраженная зернистость молодых культур, которая связана с группированием вторичного мицелия. Мицелий зернистый септированный неровный, хорошо видны ядра без окрашивания, ширина мицелия 3-5 мкм. Встречаются палочковидные образования до 10 мкм в длину. Также видны гребешковые окончания. Микроконидии почти округлые или грушевидные 4-6 мкм. Макроконидии не найдены. Обратная сторона колоний серовато-коричневая, красноватая.

ВИРУЛЕНТНЫЕ СВОЙСТВА. При нанесении на скарифицированную кожу кролика растертой в ступке культуры гриба вакцинного штамма в концентрации 300-500 млн./мл грибных клеток, на 5-7 день появляется гиперемия скарифицированного участка кожи кролика, которая исчезает на 10-12 день с образованием легкого шелушения и выздоровление на 17-20 день.

ИММУНОГЕННЫЕ СВОЙСТВА. Двукратная иммунизация лошадей вакцинным штаммом формирует у животных напряженный иммунитет сроком на 3-5 лет (срок наблюдения).

РЕАКТОГЕННЫЕ СВОЙСТВА. Внутримышечное введение вакцины у лошадей не приводит к изменению клинического состояния у животных. Лошади не освобождаются от работы на период вакцинации. На месте введения вакцины могут появляться уплотнения (до 5-7 см), рассасывающиеся в течение 3-7 дней, это приводит к формированию специфического очага в виде корочки 2×4 см, отпадающей через две недели.

Вакцинный штамм гриба Trichophyton equinum “Английская лошадь” депонирован в музее «Грибных культур» лаборатории антибиотиков и микологии ГНУ Всероссийского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им. Я.Р.Коваленко г. Москва под №508.

Вакцина против трихофитии и микроспории лошадей представляет собой смесь грибных антигенов Trichophyton equinum “Английская лошадь” №508 и Microsporum canis ВИЭВ №473. Взятых в равных соотношениях в концентрации (1-8)·10⁷ микроконидий в 1 мл прививочной дозы и защитную среду на основе сахарозы и желатина.

Пример 1. Для получения антигена из штамма Trichophyton equinum “Английская лошадь” №508 с матрасов, засеянных культурой вышеупомянутого штамма, проводят съем и гомогенизацию грибной пленки в стерильной дистиллированной воде, содержащей после гомогенизации от 400 до 600 млн. микроконидий в 1 мл.

В качестве второго антигена берут штамм гриба Microsporum canis ВИЭВ №473. Гомогенат получают аналогично. Оба гомогената смешивают в равных соотношениях и добавляют защитную среду (сахароза 30%, желатина 8%, вода) замораживают и лиофилизируют.

Полученную вакцину применяли для лошадей двукратно в дозе 1 мл внутримышечно для профилактики (238 голов). Эффективность составляет 94-96%. Эту же вакцину применяли на 18 больных трихофитией и 21 больных смешанной инфекцией (трихофития + микроспория) лошадях в лечебной дозе 2 мл двукратно внутримышечно. Все лошади выздоровели в течение 3-4 недель. Эффективность 100%.

Пример 2. Гомогенат антигенов готовят, как в примере 1, с той же концентрацией микроконидий и смешивают 250 мл гомогената культуры гриба Microsporum canis ВИЭВ №473 и 250 мл гомогената культуры гриба Trichophyton equinum “Английская лошадь” №508. После этого 500 мл смеси гомогената соединяют с 520 мл защитной среды того же состава, как в примере 1, расфасовывают по 5 мл в пенициллиновые флаконы и так же, как в примере 1, замораживают и лиофилизируют.

Полученную вакцину применяли двукратно в дозе 1 мл для профилактики (318 голов) – эффективность 96%. Эту же вакцину применили на 12 больных смешанной инфекцией лошадях (трихофития + микроспория) в лечебной дозе 2 мл двукратно внутримышечно. Все лошади выздоровели на 25-30 дни.

Применяемая вакцина содержит свежие вакцинные штаммы, ареактогенна и обеспечивает создание напряженного и длительного иммунитета 1 год (срок наблюдения) против 2 инфекций (трихофития + микроспория) лошадей.

Вакцина апробирована нами с положительным результатом в 2001-2003 г.г. в ряде хозяйств РФ.

Вакцина найдет применение в частных и государственных производственных коневодческих хозяйствах

Источники информации

Патент РФ №2097065, кл. А 61 К 39/116, 1997 г.

Формула изобретения

Вакцина против трихофитии и микроспории лошадей, включающая антиген из штамма Microsporum canis ВИЭВ №473 и защитную среду на основе сахарозы и желатина, отличающаяся тем, что содержит антигены из штамма Microsporum canis ВИЭВ №473 и штамма гриба Trichophyton equinum “Английская лошадь” №508, взятых в равных соотношениях с конечной концентрацией (1-8)·10⁷ микроконидий в 1 мл вакцины, и защитную среду на основе сахарозы и желатина.