Патент на изобретение №2265847
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ФОТОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЙОДА В МОЧЕ
(57) Реферат:
Изобретение относится к биохимии, а именно к лабораторным методам исследований. Способ фотометрического определения йода в моче включает центрифугирование и упаривание пробы, перевод йода в йодат-ионы с последующей обработкой цветореагентом и измерением оптической плотности полученного раствора. Перед центрифугированием органические соединения в пробе мочи переводят в осадок, к центрифугату добавляют хлороформ, после чего нижний хлороформный слой обрабатывают хлорной водой, отделяют водную фазу, удаляют из нее остатки хлора, добавляют 1 н. раствор йодида калия и 0,1 н. раствор серной кислоты, фотометрируют раствор при длине волны 400 нм. Органические соединения в пробе осаждают добавлением гидроксида бария и сульфата цинка. Способ обеспечивает высокую чувствительность и точность определения. 1 з.п. ф-лы, 2 табл.
(56) (продолжение): CLASS=”b560m”СААР В.Г. и др. Фотометрическое определение содержания йода в биологических образцах сложного состава. Хим-фармац.журн. 2000, № 8, с.50-52.
Изобретение относится к биохимии, в частности к способам определения микроконцентраций йода в моче, и может быть использовано в биохимических, аналитических и других лабораториях для диагностики йоддефицитных заболеваний путем определения экскреции неорганического йода с мочой. Известны способы определения йодидов в воде титриметрическим методом [1] и с ионоселективным электродом [2]. Однако чувствительность этих методов низка (0,2-1,0 мг/дм3), и они не могут быть использованы для определения йода в моче. Наиболее близким к предлагаемому способу по технической сущности и достигаемому результату является каталитический способ определения йодидов, основанный на измерении скорости реакции между церием (IV) и мышьяком (III) в кислом растворе. Метод разработан E.Sandell и J.Kolthoff [3, 4]. Раствор, содержащий ион церия (IV), имеет желтый цвет. В ходе реакции восстановления церия при окислении мышьяком в присутствии йода раствор обесцвечивается. Скорость ослабления желтого цвета раствора в реакции прямо пропорциональна содержанию йода в пробе. Чувствительность метода 0,04 мкг/мл йода. На основе этого метода разработан ряд фотометрических методов определения йода в моче и в крови [5, 6], однако к недостаткам различных вариаций метода следует отнести то, что реакция между церием (IV), мышьяком (III) и йодом протекает довольно быстро, раствор из желтого мгновенно становится прозрачным, и невозможно его фотометрировать ни при каких длинах волн ни на спектрофотометре, ни на фотоэлектрокалориметре. Авторы же разработок предлагают производить замер оптических плотностей растворов и для расчетов строить градуировочный график зависимости оптической плотности от концентрации йода в растворе. Однако в первоначальном источнике [3] авторы строят градуировочный график зависимости времени обесцвечивания раствора от концентрации йода в растворе, что более верно и надежно. Таким образом, к недостаткам каталитического метода следует отнести: – быстрое исчезновение окраски реакции, что не позволяет достаточно точно измерить оптическую плотность раствора; – использование дорогостоящих и дефицитных (сульфат церия) реактивов; – определению могут мешать осмий, рений [4], что может приводить к большим погрешностям. При разработке способа ставилась задача повысить точность и чувствительность определения йода в моче. Для решения этой задачи в предлагаемом способе, включающем подготовку пробы путем ее центрифугирования и упаривания, перевода йода в йодат-ионы, с последующей обработкой цветореагентом и измерением оптической плотности полученного раствора, перед центрифугированием органические соединения переводят в осадок; к центрифугату добавляют хлороформ, после чего нижний слой обрабатывают хлорной водой, добавляют 1 н. раствор йодида калия; фотометрируют окрашенный раствор при длине волны 400 нм. Для осаждения органических соединений используют гидроксид бария и сульфат цинка. Отличительными признаками способа является: – перевод органических соединений в осадок, в результате чего устраняется их мешающее влияние и обесцвечивается раствор; – экстракция молекулярного йода из центрифугата хлороформом с последующей обработкой нижнего слоя центрифугата хлорной водой для перевода йода в йодат-ионы; – обработка полученного раствора 1 н. раствором йодида калия; – фотометрирование окрашенного раствора на фотоэлектрокалориметре при длине волны 400 нм; – органические соединения осаждают путем добавления в пробу гидроксида бария и сульфата цинка. Чувствительность способа повышается до 0,025 мкг/см3 за счет перевода йодат-ионов в трийодатный комплекс с йодидом калия и фотометрирования окрашенных в желтый цвет растворов. Точность определения повышена за счет получения стабильной окраски растворов, сохраняющейся в течение длительного времени (6 часов), а также устранения мешающего влияния органических веществ. Способ осуществляют следующим образом. К 2 см3 мочи в пробирке добавляют 2 см3 0,3%-ного раствора гидроксида бария и 5 см3 5%-ного раствора сульфата цинка. Содержимое пробирки тщательно встряхивают и центрифугируют в течение 4-х минут. Центрифугат сливают в делительную воронку. Осадок в пробирке промывают 3-мя см3 дистиллированной воды и снова центрифугируют в течение 2-х минут. Центрифугат сливают в ту же делительную воронку, добавляют 8 см3 хлороформа и встряхивают. Нижний хлороформный слой переносят в другую делительную воронку, добавляют 1 см3 хлорной воды и 7 см3 дистиллированной воды, тщательно встряхивают. Водную фазу переносят в стаканчики и ставят на песчаную баню на 10 минут для удаления остатков хлора. Охлажденный раствор переносят в мерную колбу на 25 см3, приливают 3 см3 1 н. раствора калия йодида и 4 см3 0,1 н. раствора серной кислоты, доводят водой до метки. Окрашенный в желтый цвет раствор фотометрируют на фотоэлектрокалориметре при длине волны 400 нм в кюветах на 10 мм по отношению к холостой пробе (дистиллированная вода). Содержание йода в моче находят по градуировочному графику, построение которого проводят аналогично пробам из стандартного раствора калия йодида с концентрацией 0,25 мкг/см3 (см. таблицу 1).
В таблице 2 представлена градуировочная зависимость оптической плотности от концентрации йода в растворе.
Шкала стабильна в течение 6 часов, значения оптических плотностей градуировочной шкалы, измеренные спустя 6 часов, были следующими: 0,028; 0,063; 0,12; 0,18; 0,24; 0,305. Предлагаемый способ отличается высокой чувствительностью, точностью и воспроизводимостью. Использованные источники 1. Унифицированные методы исследования воды. – М., 1977. 2. Методические указания 4.1.0-97 ФУ Медбиоэкстрем. Определение йода с ионоселективным электродом “Эком-J”. 4. Яцимирский К.Б. Кинетические методы анализа. – И: “Химия”, 1967. – с.168-169. Формула изобретения
1. Способ фотометрического определения йода в моче, включающий центрифугирование и упаривание пробы, перевод йода в иодат-ионы с последующей обработкой цветореагентом и измерением оптической плотности полученного раствора, отличающийся тем, что перед центрифугированием органические соединения переводят в осадок, к центрифугату добавляют хлороформ, после чего нижний хлороформный слой обрабатывают хлорной водой, отделяют водную фазу, удаляют из нее остатки хлора, добавляют 1н. раствор иодида калия и 0,1 н. раствор серной кислоты, фотометрируют окрашенный раствор при длине волны 400 нм. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что органические соединения осаждают путем добавления в пробу гидроксида бария и сульфата цинка.
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 29.04.2007
Извещение опубликовано: 27.07.2008 БИ: 21/2008
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
