Патент на изобретение №2265222
|
||||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ
(57) Реферат:
Изобретение относится к лабораторной диагностике и может быть использовано для прогнозирования инфекционных заболеваний у доношенных новорожденных. Сущность способа состоит в том, что в I триместре беременности (6-13 недель) в периферической венозной крови женщин с угрозой невынашивания определяют относительное содержание CD16+CD56– лимфоцитов и при его значении, равном или менее 11%, прогнозируют развитие инфекционных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни. Техническим результатом является прогнозирование с высокой точностью развития локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни. 1 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и перинатологии, и может быть использовано для прогнозирования инфекционных заболеваний у доношенных новорожденных путем исследования периферической венозной крови женщин в ранние сроки беременности. Актуальность предлагаемого способа. Частота инфекционной патологии в структуре заболеваемости доношенных новорожденных остается высокой и составляет, по данным различных авторов, 6-53% [5, 6, 7]. Удельный вес локальных форм гнойно-воспалительных заболеваний новорожденных составляет 70-80% [5, 6]. Отмечаемый повсеместно рост числа неонатальных инфекций диктует необходимость поиска новых возможностей их прогнозирования с целью профилактики серьезных осложнений. Известен способ прогнозирования бактериальных осложнений у новорожденных путем регистрации индуцированной люминолом клеточной хемилюминисценции в цельной крови в присутствии кристаллов труднорастворимых солей. При повышении свето-суммы в 2 и более раз от исходной прогнозируют развитие бактериальных осложнений [10]. Недостатки способа: 1. Исследование выполняется у новорожденных, тем самым исключая возможность профилактики различных инфекционно-воспалительных осложнений в антенатальном периоде. 2. Способ затруднен большой трудоемкостью при проведении анализа, так как требует постановки одновременно и спонтанной, и индуцированной хемилюминесценции. 3. Метод клеточной хемилюминесценции недостаточно специфичен, так как содержание средних молекул, определяющих уровень хемилюминесценции, неспецифически повышается при любом хроническом воспалительном процессе. 4. Не указывается возраст, в который рекомендуется проводить обследование. 5. Отсутствуют данные о точности способа. Наиболее близким по техническому решению является способ прогнозирования инфекционно-воспалительной патологии у недоношенных новорожденных путем определения содержания IgE в периферической крови новорожденных на 3 сутки жизни: при уровне IgE выше 3,5 МЕ/мл прогнозируют возникновение инфекционно-воспалительной патологии [11]. Недостатки способа: 1. Неонатальные инфекции прогнозируются только у недоношенных новорожденных, у которых всегда присутствуют иммунологические нарушения [12]. 2. Повышение уровня IgE отмечается при ряде иммунодефицитных состояний генетического генеза (синдроме Вискотта-Олдрича, миеломной болезни, дисгаммаглобулинемии), что снижает специфичность и точность способа. 3. IgE может связываться с поверхностью реагирующих клеток, и при этом уровень его в крови не повышается, поэтому возможен большой процент ложноотрицательных результатов. 4. Не указывается точность способа. Указанные недостатки могут быть устранены в предлагаемом способе. Заявляемый технический результат достигается тем, что в I триместре беременности (6-13 недель) в периферической венозной крови беременных женщин с угрозой невынашивания определяют относительное содержание CD16+CD56– лимфоцитов и при значении этого показателя, равном или менее 11%, прогнозируют развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни с точностью 77,42%, чувствительностью 100% и специфичностью 72,00%. Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозировать развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни по определению относительного содержания CD16+CD56– лимфоцитов в периферической венозной крови беременных женщин с угрозой невынашивания в I триместре беременности. Известно, что циркулирующие в периферической крови естесственные киллеры (NK-клетки) с фенотипом CD16+ в значительной своей части не несут на своей поверхности CD56 молекулу и являются CD16+СD56– клетками [13]. Благодаря экспрессии на своей поверхности Fc Способ осуществляется по стандартной методике следующим образом (1): 1) Выделение лимфоцитов из периферической венозной крови; 2) 100 мкл лимфоцитов в концентрации 1×106 кл/мл инкубируют с 20 мкл моноклональных анти-CD16, меченных FITC и с 20 мкл моноклональных анти-СD56, меченных РЕ, в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте, после чего клетки отмывают 1 раз 1 мл физиологического раствора центрифугированием при 1500 об/мин в течение 2 минут. Клетки ресуспендируют в 500 мкл физиологического раствора. Учет реакции проводят на проточном цитометре, определяя содержание CD16+CD56– клеток в лимфоцитарном гейте. Результат читается в процентах (%). Существенными отличиями заявленного способа являются: – предложен новый прогностический параметр относительного содержания CD16+CD56– лимфоцитов в периферической венозной крови у женщин с угрозой невынашивания в I триместре беременности равный или менее 11%, – для прогнозирования развития локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни. Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами. Пример 1. Беременная Л., 25 лет. Настоящая беременность вторая. Первая беременность закончилась самопроизвольным выкидышем в сроке 8 недель. В сроке 6-7 недель поступила в стационар с жалобами на тянущие боли внизу живота, мажущие кровянистые выделения из половых путей. По данным УЗИ – беременность 7 недель, гипертонус матки, эхопризнаки отслойки плодного яйца. Диагноз: Беременность 7 недель. Отягощенный акушерско-гинекологический анамнез. Угрожающий выкидыш. При обследовании заявляемым способом: относительное содержание CD16+CD56– лимфоцитов – 5%, что ниже прогностического уровня на развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни. Заключение по заявляемому способу: прогнозируется развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни. При дальнейшем обследовании на урогенитальную инфекцию – обнаружены антигены хламидий в цервикальном канале и антитела класса Ig М к хламидиям в периферической крови. После проведенной сохраняющей терапии женщина выписана из стационара с прогрессирующей беременностью в сроке 10 недель. Беременность закончилась своевременными родами и рождением доношенного новорожденного массой 3300 г, ростом 54 см, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. При обследовании у ребенка выявлен ринит хламидийной этиологии. Ребенок получил антибактериальную терапию, выписан на 7 сутки. Прогноз развития инфекционных заболеваний у новорожденного по заявляемому способу подтвердился. Пример 2. Беременная С., 26 лет. Настоящая беременность вторая. Первая беременность закончилась своевременными родами и рождением доношенного новорожденного весом 3000 г, ростом 51 см, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. В сроке 12 недель поступила в стационар с жалобами на тянущие боли внизу живота, по данным УЗИ – беременность 12 недель, гипертонус матки. Выставлен диагноз: Беременность 12 недель. Угрожающий выкидыш. При обследовании заявляемым способом: относительное содержание CD16+CD56– лимфоцитов – 14%, что выше прогностического уровня на развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни. Заключение по заявляемому способу: развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни не прогнозируется. После проведенной сохраняющей терапии женщина выписана из стационара с прогрессирующей беременностью в сроке 14-15 недель. Беременность закончилась своевременными родами и рождением доношенного новорожденного массой 3400 г, ростом 51 см, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. Ребенок выписан на 5 сутки с диагнозом: здоров. Прогноз по заявляемому способу подтвердился. Пример 3. Беременная М., 23 лет. Настоящая беременность первая. В анамнезе – бесплодие 3 года. Поступила в стационар с жалобами на тянущие боли внизу живота, по данным УЗИ – беременность 10 недель, повышение тонуса матки. 17-КС мочи – 16,2 мг/сут. Осмотрена эндокринологом. Заключение: гиперандрогения. Гирсутный синдром. Результаты обследования на урогенитальную инфекцию – отрицательные. Выставлен диагноз: Беременность 10 недель. Угрожающий выкидыш. Отягощенный гинекологический анамнез (бесплодие 3 года). Гиперандрогения. Гирсутный синдром. При обследовании заявляемым способом: относительное содержание CD16+CD56– лимфоцитов – 11%, что равно прогностическому уровню на развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни. Заключение по заявляемому способу: прогнозируется развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни. После проведенной сохраняющей и гормональной терапии женщина выписана из стационара с прогрессирующей беременностью в сроке 13 недель. Беременность закончилась своевременными родами и рождением доношенного новорожденного массой 3000 г, ростом 50 см, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. При обследовании у ребенка выявлена инфекция мочевыводящих путей. Ребенок получил антибактериальную терапию. Выписан домой в удовлетворительном состоянии на 7 сутки. Прогноз по заявляемому способу подтвердился. Указанным способом обследована 31 женщина в 6-13 недель гестации. Результаты исследований сведены в таблицу 1
Преимущества заявляемого способа: 1. Исследование периферической венозной крови у женщины проводится в раннем сроке беременности (6-13 нед.), что позволяет еще во время беременности прогнозировать развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни и своевременно провести комплекс профилактических мероприятий, начиная с антенатального периода. 2. Возможно прогнозирование локальной неонатальной инфекционно-воспалительной патологии до появления клинических признаков заболевания. 3. Метод может быть использован в качестве скрининга на развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни. 4. Заявляемый способ прост в исполнении, не требует больших временных затрат и осуществляется в течение 1 часа 40 минут. 5. Высокая точность 77,42%, чувствительность 100% и специфичность 72,00% способа. Таким образом, заявленный способ прост в исполнении и позволяет с высокой точностью прогнозировать развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни у женщин с угрозой невынашивания беременности при обследовании в I триместре беременности, что позволит выбрать правильную тактику ведения женщин с риском развития локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни, своевременно провести комплекс лечебно-профилактических мероприятий и будет способствовать снижению частоты данной патологии плода и новорожденного, и уменьшению экономических затрат на лечение. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ: 2. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врачей. – С-Пб., 1998. – 110 с. 3. Клиническая иммунология: Учебник для студентов медицинских вузов / Под ред. А.В.Караулова. – М.: Медицинское информационное агентство, 1999. – 604 с. 4. Ярилин А.А. Основы иммунологии: Учебник. – М.: Медицина., -1999, – 608 с. 5. Шабалов Н.П. Неонатология. T.1. – СПб.: Специальная литература, 1995. – 494 с. 6. Яцык Г.В. Руководство по неонатологии. – М., 1998. – 400 с. 12. Торубарова Н.А., Кошель И.В., Яцык Г.В. Кроветворение плода и новорожденного – М.: Медицина, 1993. – С.95-117. 13. Хаитов Р.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология: Учебник. – М.: Медицина, 2000. – 432 с.
Формула изобретения
Способ прогнозирования инфекционных заболеваний у доношенных новорожденных путем исследования периферической крови, отличающийся тем, что в I триместре беременности (6-13 недель) в периферической венозной крови женщин с угрозой невынашивания определяют относительное содержание CD16+CD56– лимфоцитов и при его значении, равном или менее 11%, прогнозируют развитие инфекционных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни.
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 05.02.2006
Извещение опубликовано: 27.04.2007 БИ: 12/2007
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 05.02.2006
Извещение опубликовано: 20.06.2007 БИ: 17/2007
|
||||||||||||||||||||||||||||
рецептора III типа (CD16) к Fc-фрагменту иммуноглобулина G NK клетки распознают инфицированные вирусами клетки, на поверхность которых сели антитела класса G против вирусных антигенов, и развивают в отношении этих клеток-мишеней антителозависимую клеточную цитотоксичность. Ранее исследования CD16+CD56– субпопуляции NK у беременных женщин в первом триместре беременности не проводились.