Патент на изобретение №2265049
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СРЕДА НАКОПЛЕНИЯ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ БАКТЕРИЙ РОДА YERSINIA
(57) Реферат:
Изобретение относится к биотехнологии и медицинской микробиологии, может быть использовано в производстве питательных сред для выделения иерсиний с клиническими и эпидемиологическими целями. Среда для выделения микроорганизмов рода Yersinia содержит, г/л дистиллированной воды: ферментативный пептон – 5,0-10,0, двузамещенный фосфорнокислый калий – 0,5-1,0. Изобретение обеспечивает ускорение выделения микроорганизмов рода Yersinia. 1 табл.
Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в производстве питательных сред для выделения иерсиний с клиническими и эпидемиологическими целями. Известна питательная среда для накопления иерсиний, содержащая 1/15М фосфатно-буферный раствор [1]. Однако отсутствие в среде питательных веществ ведет к медленному размножению иерсиний, длительности инкубации в холодильнике до 10-20 суток, многократному посеву на плотные питательные среды. Это ограничивает возможность ее применения. Известна среда для накопления иерсиний, содержащая триптоказосоевый бульон с антибиотиками и кристаллическим фиолетовым [2]. Однако она имеет сложный состав, трудоемка в приготовлении, имеет ограниченный срок годности, оказывает ингибирующее влияние на сопутствующую микрофлору, а также на иерсинии. В отечественной практике не применялась. Наиболее близкой по сущности к предлагаемому изобретению является буферно-казеиново-дрожжевая (БКД) среда накопления иерсиний, содержащая гидролизат казеина, пекарских дрожжей, фосфатно-буферный раствор [3,4]. Ее недостатком является многокомпонентность, необходимость специальной предварительной подготовки каждого из компонентов, недостаточная скорость размножения иерсиний – этап накопления длится до 10-15 дней. Изобретение направлено на усовершенствование жидкой питательной среды для накопления иерсиний, при этом обеспечивается упрощение техники ее приготовления, сокращение сроков выделения бактерий рода Yersinia, удешевление бактериологического исследования. Сущность изобретения сводится к следующему. Предлагаемая среда содержит 3 ингредиента, г/л:
Отличия от прототипа: среда включает соль калия и дистиллированную воду, но отличается тем, что она дополнительно содержит ферментативный пептон, а в качестве соли калия – двузамещенный фосфорнокислый калий. Питательная среда может быть получена следующим образом. Навески ферментативного пептона и двузамещенного фосфорнокислого калия растворить в 1 литре дистиллированной воды, вскипятить, установить рН среды 7,6-7,8. Среду стерилизовать автоклавированием 20 минут при 0,5 атмосферы. Хранить в условиях 4-7°С в течение 7-10 дней. Среда готовится из отечественных ингредиентов. В качестве тест-штаммов для оценки ростовых свойств предлагаемой среды использовали штаммы, полученные из коллекции государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов имени Л.А. Тарасевича и Санкт-Петербургского НИИЭМ им. Пастера: Yersinia enterocolitica (6 штаммов), Yersinia pseudotuberculosis (4 штамма). Все культуры микроорганизмов были типичными по культурально-морфологическим, биохимическим и серологическим свойствам. В образцы среды (заявляемой и известной среды БКД) засевали иерсинии в концентрациях 10 КОЕ/мл. Посевы инкубировали до 14 суток при температуре +4°С. Количественные высевы со сред накопления производили ежедневно на плотные питательные среды, через 24-48 часов инкубации при 37°С проводили количественный учет выросших колоний. Соотношение подобранных в среде ингредиентов иллюстрируют примеры. Полученные результаты проведенных исследований представлены в таблице. Приведенные в таблице данные свидетельствуют, что заявляемая среда при оптимальном соотношении компонентов (пример 1 таблицы) значительно превосходит прототип – среду БКД по количеству и скорости размножения в ней бактерий рода Yersinia. Источники информации 2. Park C. A new sensitive technique for isolation of Yersinia enterocolitica from foods. In Psychrotrophic Microorganisms in Spoilage and Pathogenesity, London, 1982. 3. Авторское свидетельство №1645294, от 16.05.1988.
Формула изобретения
Среда накопления для выделения бактерий рода Yersinia, включающая соль калия и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит ферментативный пептон, а в качестве соли калия – двузамещенный фосфорнокислый калий, при следующем соотношении компонентов, г/л дистиллированной воды:
MM4A – Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 27.06.2005
Извещение опубликовано: 20.02.2007 БИ: 05/2007
|
||||||||||||||||||||||||||