Патент на изобретение №2263315

Published by on




РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ



ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ
(19) RU (11) 2263315 (13) C2
(51) МПК 7
G01N33/50
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

Статус: по данным на 18.01.2011 – прекратил действие

(21), (22) Заявка: 2002107095/15, 19.03.2002

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:

19.03.2002

(43) Дата публикации заявки: 10.11.2003

(45) Опубликовано: 27.10.2005

(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске:
SU 1262380 A1, 07.10.1986. RU 2170935 С1, 20.07.2001. RU 2176790 C1, 10.12.2001. RU 2052819 С1, 20.01.1996. SU 1802870 A3, 15.03.1993. US 4101648, 18.07.1978. IT 1120500, 26.03.1986.

Адрес для переписки:

603600, г.Нижний Новгород, ул. Семашко, 22, Научно-исследовательский институт детской гастроэнтерологии

(72) Автор(ы):

Комарова Л.Г. (RU),
Коркоташвили Л.В. (RU),
Бадейнова Е.Н. (RU)

(73) Патентообладатель(и):

Нижегородский научно-исследовательский институт детской гастроэнтерологии (RU)

(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ОБОСТРЕНИЯ И РЕМИССИИ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ДЕТЕЙ

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики. Способ заключается в том, что исследуют слюну больного ребенка и определяют в ней содержание мочевой кислоты и при его значении 118,8 мкмоль/л и выше диагностируют обострение заболевания, а 117,5 мкмоль/л и ниже – ремиссию. Способ обеспечивает простоту, атравматичность и доступность диагностики в педиатрической практике. 2 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано в широкой медицинской практике для диагностики фазы обострения или ремиссии гастродуоденальных заболеваний у детей.

Наиболее информативным считается способ эндоскопического исследования с прицельной биопсией, который дает возможность оценить функцию и структуру органов гастродуоденальной зоны (А.И.Волков и др. Современные инструментальные методы в комплексном обследовании гастродуоденальной слизистой у детей. Методические рекомендации. Горький. 1981 г.).

Однако этот способ диагностики достаточно сложен с точки зрения необходимости наличия специального дорогостоящего оборудования, специалиста-эндоскописта и морфолога. Кроме того, данный способ сопряжен с опасностью возникновения осложнений и травматичен.

Известны способы лабораторной диагностики фазы гастродуоденального заболевания: по повышению концентрации гистамина в базальной порции желудочного сока (Способ диагностики обострения язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. Авт. свид. №1264410 от 23.10.86. Комарова Л.Г. и др.). Однако этот способ требует процедуры зондирования, что является травматичным для ребенка. И, кроме того, методика исследования гистамина в любой биологической жидкости трудоемка.

За прототип предлагаемого изобретения выбран лабораторный способ дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний, включающий биохимическое исследование слюны (Л.Г.Комарова, И.А.Переслегина, Л.В.Коркоташвили «Способ дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний». Свидетельство №1262380, зарегистрировано в Государственном реестре 16.10.85 г.).

Данный способ заключается в том, что о наличии обострения или ремиссии гастродуоденального заболевания судят по соотношению содержания в слюне аденозинтрифосфорной и пировиноградной кислот, взятых в процентах от нормы, и при этом показателе ниже 0,5 диагностируют обострение, а выше 0,5 – ремиссию заболевания. Способ атравматичен, позволяет с высокой степенью точности осуществлять диагностику.

Однако использование известного способа требует проведения двух методик, что сопряжено с большим расходом реактивов, наличием специального оборудования и большой затратой времени (5-6 часов).

Целью предлагаемого изобретения является упрощение способа за счет определения одного показателя в той же биологической среде – слюне.

Поставленная цель достигается тем, что в предлагаемом способе, включающем биохимическое исследование слюны, определяют содержание мочевой кислоты в слюне и при ее значении 118 мкмоль/л и выше диагностируют обострение гастродуоденальных заболеваний, а ниже – ремиссию.

Новым в способе является исследование мочевой кислоты в слюне, так как раньше ее определяли в других биологических средах и по другому назначению.

Так, известно участие мочевой кислоты в генезе артериальной гипертонии, патологии почек и др. Пурины в организме являются полифункциональными соединениями, обладающими способностью регулировать соотношение между активностью симпатической и парасимпатической нервной системы, а нарушение равновесия этих систем может приводить к ряду заболеваний, в том числе желудочно-кишечного тракта (Ю.И.Ровда, И.В.Павлов, В.И.Хиченко и др. Педиатрия 1995 г., №3, с.82-84).

Определение мочевой кислоты в слюне необходимо и достаточно для постановки диагноза обострения или ремиссии гастродуоденальных заболеваний у детей.

Работоспособность способа доказана следующими фактами:

Проведено обследование 58 детей с гастродуоденальными заболеваниями. Из них 31 – с обострением и 27 – ремиссией патологического процесса. В слюне определяли содержание мочевой кислоты, величина которой менялась в фазу обострения в диапазоне 118,8-635,3 мкмоль/л, а в фазу ремиссии 15,8-117,5 мкмоль/л.

Таблица 1
Концентрация мочевой кислоты в слюне (мкмоль/л)
Группы обследуемых детей Концентрация мочевой кислоты
Гастродуоденальные заболевания Обострение
Пределы колебаний
232,5+18,8 (n=31) р<0,001
118,8-635,3
Ремиссия
Пределы колебаний
60,2+5,65 (n=27)
15,8-117,5
Таблица 2
Диапазон колебаний содержания мочевой кислоты в слюне при гастродуоденальном заболевании у детей
Фаза обострения Фаза ремиссии
Фамилия Мочевая кислота, мкмоль/л Фамилия Мочевая кислота, мкмоль/л
1 Больной Б. 145,6 1 Больной А. 21,2
2 В. 225,0 2 Б. 32,9
3 В. 566,1 3 В. 47,7
4 Е. 176,5 4 В. 117,5
5 3. 271,4 5 Г. 108,0
6 И. 206,0 6 Д. 39,0
7 И. 165,0 7 Е. 40,0
8 К. 180,3 8 К. 31,6
9 К. 142,1 9 К. 53,7
10 К. 405,0 10 К. 80,1
11 К. 190,8 11 Л. 78,1
12 Л. 316,4 12 Л. 75,0
13 Л. 118,8 13 М. 80,0
14 Л. 273,3 14 М. 15,8
15 Л. 220,0 15 М. 65,9
16 Л. 184,4 16 М. 47,4
17 М. 210,0 17 Н. 37,5
18 М. 281,3 18 Н. 49,0
19 М. 255,8 19 Н. 40,8
20 Н. 305,0 20 О. 31,3
21 Н. 247,0 21 Р. 28,0
22 О. 139,2 22 Р. 88,0
23 П. 164,0 23 С. 63,2
24 Р. 188,0 24 С. 50,0
25 С. 252,6 25 С. 24,0
26 С. 635,3 26 Ф. 40,0
27 С. 158,3 27 Ш. 112,0
28 С. 169,0
29 С. 375,0
30 С. 187,5
31 С. 252,6

Диагноз верифицирован данными гастрофиброскопии и РН-метрии желудочного сока.

Установлено, что все дети с содержанием в слюне мочевой кислоты выше 118,8 имели обострение заболевания, тогда как у детей с уровнем определяемого вещества ниже этого значения диагностировалась ремиссия.

Способ осуществляют следующим образом: утром натощак собирают слюну путем сплевывания в центрифужную пробирку. Затем слюну центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин.

Принцип метода.

Мочевая кислота восстанавливает фосфорнофольфрамовый реактив с образованием голубого цвета, оптическая плотность которого при 640 нм пропорциональна концентрации мочевой кислоты в сыворотке крови.

Состав набора.

1. Натрий вольфрамовокислый, двухводный, 5 г – 1 флакон;

2. Натрий карбонат, 20,6 г – 1 упаковка;

3. Фосфорновольфрамовый реактив, 100 мл – 1 флакон;

4. Основной калибровочный растров мочевой кислоты, 6 ммоль/л, 3 мл – 1 флакон.

Вспомогательные реактивы.

Кислота серная, концентрированная (96%), хч – 1 мл.

В состав набора не входит.

Оборудование.

Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр, центрифуга.

Образец.

Слюна, разведенная дистиллированной водой в 10 раз.

Приготовление рабочих растворов.

1. Раствор серной кислоты, 0,35 моль/л. В мерную колбу вместимостью 50 мл наливают 20 мл дистиллированной воды, 1,0 мл концентрированной серной кислоты и доводят объем водой до метки. Раствор стабилен.

2. Раствор натрия вольфрамовокислого. Содержимое флакона с натрием вольфрамовокислым количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доливают дистиллированной водой до метки. Раствор стабилен.

3. Раствор натрия карбоната. Содержимое упаковки с натрием карбонатом количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл, растворяют в дистиллированной воде, и доводят объем водой до метки. Раствор стабилен.

4. Рабочий калибровочный раствор мочевой кислоты. Отмеряют точно 1,0 мл основного калибровочного раствора мочевой кислоты, переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объем дистиллированной водой до метки. Раствор стабилен в течение 2 недель при хранении при температуре 4-8°С. Полученный раствор содержит 30 мкмоль/л мочевой кислоты.

Ход определения.

В центрифужную пробирку вносят:

Холостая проба, мл Калибровочная проба, мл Опытная проба, мл
Вода дистиллированная 4,0
Биологическая жидкость 0,50
Перемешивают
Раствор серной кислоты 0,35 моль/л 0,25
Раствор натрия вольфрамовокислого 0,25
Тщательно перемешивают, переворачивая пробирку и через 5 минут центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин.
Надосадочная жидкость 2,00
Рабочий калибровочный раствор мочевой кислоты 2,00
Вода дистиллированная 2,00
Растров натрия карбоната 1,00 1,00 1,00
Фосфорнофольфрамовый реактив 0,50 0,50 0,50
Тщательно перемешивают, переворачивая пробирку и через 5 минут центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин.

Через 30 минут определяют экстинцию при 640 (580-700) нм при красном светофильтре ФЭКа. Расчет содержания проводят по формуле

С(мкмоль/л)=Еоп/Ест×Сст×10, где

Еоп – экстинция опытной пробы против холостой пробы;

Ест – экстинция калибровочной пробы против холостой пробы;

Сст – концентрация рабочего калибровочного раствора, 30 мкмоль/л;

10 – пересчет на разбавленную слюну.

Определяют содержание мочевой кислоты в слюне у больного и при содержании ее 118,8 и выше диагностируют обострение гастродуоденальных заболеваний, а при значении показателя ниже этой цифры – ремиссию.

Клинические примеры исполнения способа.

Пример 1.

Больная Лебедева Оля, 10 лет. История болезни №1136/1995 г. Находилась на стационарном лечении в НИИ детской гастроэнтерологии с диагнозом: язвенная болезнь 12-перстной кишки в фазе обострения, хронический гастродуоденит в фазе обострения. При поступлении проведено обследование мочевой кислоты в слюне. В результате содержание мочевой кислоты составило 118,8 мкмоль/л. При повторных исследованиях уровень мочевой кислоты варьировал до 211,6; 316,4; 331,6 мкмоль/л. Все это свидетельствовало об обострении патологического процесса. Последующее гастрофиброскопическое обследование подтвердило диагноз, выявив выраженные признаки обострения. В процессе лечения была достигнута ремиссия. Концентрация мочевой кислоты снизилась до 110,0 мкмоль/л, сопровождаемая улучшением общепринятых лабораторных показателей, включая гастрофиброскопию.

Пример 2.

Воропаев Сергей, 12 лет. История болезни №674/1995 г. Поступил в Нижегородский НИИ детской гастроэнтерологии с диагнозом: язвенная болезнь 12-перстной кишки, хронический гастродуоденит в фазе ремиссии. При поступлении проведено определение мочевой кислоты в слюне. Величина показателя соответствовала 117,5 мкмоль/л, что указывало на фазу ремиссии. Данные гастрофиброскопии (слизистая желудка бледно розового цвета, гиперплазирована, привратник сомкнут, луковица 12-перстной кишки не деформирована, рисунок слизистой сохранен) подтвердили диагноз.

Использование предлагаемого способа дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний в сравнении с известными позволяет получить положительный эффект, который выражается в упрощении и сокращении времени проведения, атравматичности и доступности объекта исследования. Способ дополнительно может использоваться для динамического наблюдения за эффективностью лечения.

Предлагаемый способ особенно ценен в педиатрической практике, так как абсолютно безвреден, прост и доступен в применении в любых условиях.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний у детей, включающий биохимическое исследование слюны, отличающийся тем, что в слюне определяют содержание мочевой кислоты и при его значении 118,8 мкмоль/л и выше диагностируют обострение, а при 117,5 мкмоль/л и ниже – ремиссию гастродуоденальных заболеваний.


MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Извещение опубликовано: 27.11.2006 БИ: 33/2006


Categories: BD_2263000-2263999