Патент на изобретение №2257585
|
||||||||||||||||||||||||||
(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ИСХОДА ТЯЖЕЛЫХ ФОРМ НЕОНАТАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ
(57) Реферат:
Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии. Для прогнозирования исхода тяжелых форм неонатальных инфекций у новорожденных в возрасте 5-10 дней жизни в периферической крови определяют относительное содержание CD8+HLA-DR+ лимфоцитов. При его значении менее 2,4% прогнозируют выздоровление. Способ обеспечивает высокую точность прогноза при различных видах неонатальных инфекций. 1 табл.
(56) (продолжение): CLASS=”b560m”RU 2173955 С1, 27.09.2001. SU 1748068 A1, 15.07.1992. SU 1755101 A1, 15.08.1992. SU 1700478 A1, 23.12.1991.
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования исхода тяжелых форм неонатальных инфекций у новорожденных. Актуальность разработки способа определяется высокой частотой летальности и инвалидизации детей при тяжелых формах неонатальных инфекций (пневмония, менингоэнцефалит, сепсис и др.) [2, 4, 8]. Это содает необходимость поиска объективных подходов к прогнозированию их исхода, что позволит назначить адекватную терапию и предотвратить тяжелые последствия. Наиболее близким по техническому решению является способ прогнозирования течения и исхода тяжелых инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных путем исследования на 1-3 сутки жизни содержания в крови белков острой фазы воспаления (С-реактивного белка, гаптоглобина, антитрипсина, макроглобина и 1. уровень белков острой фазы и активность ферментов не имеют прямой связи с развитием тяжелых неонатальных инфекций, так как данные показатели не являются специфичными и их изменения могут происходить при различных патологических состояниях, в т.ч. при гипоксии [8]; 2. для осуществления прогноза требуется определение большого количества показателей – 12; 3. для выполнения анализа требуется большое количество (1,5-2 мл) крови, учитывая, что забор крови проводится у новорожденных; 4. сложность методики, ее дороговизна (242,55 руб.). Указанный способ избран нами в качестве ближайшего аналога (прототипа). Указанные недостатки предлагается устранить в заявляемом способе. Техническим решением заявляемого способа является прогнозирование исхода тяжелых неонатальных инфекций у новорожденных путем определения в периферической венозной крови на 5-10 день жизни относительного содержания CD8+HLA-DR+ лимфоцитов и при значениях показателя менее 2,4% прогнозируют выздоровление с точностью 91,67%. Новизна способа Взаимосвязь содержания CD8+HLA-DR+ лимфоцитов в периферической венозной крови новорожденных 5-10 дня жизни с исходом тяжелых форм неонатальных инфекций прослежена впервые. Известно, что при инфекционно-воспалительных заболеваниях наблюдается экспрессия HLA-DR молекул на поверхности CD4+ клеток [9]. Экспрессия HLA-DR молекул на поверхности CD8+ клеток не установлена. По нашему мнению, экспрессия HLA-DR молекул на поверхности CD8+ лимфоцитов является свидетельством активации цитотоксических Т-клеток и наблюдается при развитии повреждающего аутоиммунного процесса в ответ на инфекционный агент. При содержании CD8+HLA-DR+ в периферической крови более 2,4%, по-видимому, развивается аутоиммунная реакция, поддерживающая воспалительный процесс с длительным и тяжелым течением и способствующая формированию инвалидизирующих последствий. При содержании же CD8+HLA-DR+ в периферической крови менее 2,4% иммунный ответ на инфекционные антигены можно считать адекватным, с чем связано выздоровление ребенка. Отличительные признаки способа Определение в периферической венозной крови новорожденного с тяжелыми формами неонатальных инфекций в возрасте 5-10 дней жизни относительного содержания CD8+HLA-DR+ лимфоцитов и установление их прогностического параметра в переделах менее 2,4%, при котором прогнозируется благоприятный исход – выздоровление ребенка. Способ осуществляется по стандартной методике следующим образом. 1. Выделение лимфоцитов из периферической венозной крови [10]. 2. В пробирку, содержащую 100 мкл лимфоцитов в концентрации 1×106 кл/мл, добавляют 20 мкл моноклональных анти-CD8, меченных FITC, и 20 мкл моноклональных анти-HLA-DR, меченных РЕ. Клетки инкубируют с моноклональными антителами в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте, после чего отмывают 1 раз 1 мл физиологического раствора центрифугированием при 1500 об/мин в течение 2 минут. Клетки в пробирке ресуспендируют в 500 мкл физиологического раствора [11]. 3. Учет реакции проводят на проточном цитометре, определяя в лимфоцитарном гейте процентное (относительное) содержание CD8+HLA-DR+ клеток. 4. При значениях показателя CD8+HLA-DR+, меньших 2,4%, прогнозируют выздоровление с точностью 91,67%. Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами: Пример 1. Ребенок А. родился от II беременности, протекавшей на фоне хронического пиелонефрита, осложнившейся угрозой невынашивания. Роды в 39 недель. Оценка по шкале Апгар 6-8 баллов. К концу первых суток жизни состояние ребенка ухудшилось до тяжелого, ребенок угнетен, отмечается разлитой цианоз, появилась одышка до 80 в минуту, участие вспомогательной мускулатуры в акте дыхания, при аускультации дыхание в легких ослаблено, выслушиваются мелкопузырчатые влажные хрипы. Клинико-рентгенологически поставлен диагноз: Пневмония. На 5 сутки по заявляемому способу в периферической крови определялось содержание CD8+HLA-DR+ клеток, которое составило 0,2%, что ниже заявляемого (2,4%) уровня на выздоровление. Дан прогноз благоприятного течения и выздоровления. Общепринятая терапия оказалась эффективной, в возрасте одного месяца ребенок клинически здоров, выздоровление подтверждено рентгенологически. Прогноз по заявляемому способу подтвердился. Пример 2. Ребенок В. родился от I беременности, протекавшей на хронического тонзиллита, хронического пиелонефрита, осложнившейся поздним гестозом, многоводием. Роды в 39 недель. Оценка по шкале Апгар 6-7 баллов. На третьи сутки жизни состояние ухудшилось до крайне тяжелого, ребенок угнетен, не реагирует на осмотр, повысилась температура тела до фебрильных цифр, появились генирализованные клонико-тонические судороги и проявления дыхательной недостаточности – одышка до 68 в минуту, участие вспомогательной мускулатуры в акте дыхания, разлитой цианоз. С учетом клинической картины и данных дополнительного исследования поставлен диагноз: менингоэнцефалит, пневмония. Назначена общепринятая терапия. На 5 сутки в периферической крови по заявляемому способу определялось содержание CD8+HLA-DR+ клеток, которое составило 6,5%, что выше заявляемого параметра на отсутствие выздоровления. Дан прогноз неблагоприятного исхода. К концу неонатального периода у ребенка сохраняются клинические проявления неонатальной инфекции. В возрасте 12 месяцев поставлен диагноз: Детский церебральный паралич. Выздоровления ребенка не было. Пример 3. Ребенок К. родился от II беременности, протекавшей на фоне вегетососудистой дистонии по гипотоничскому типу, хронического пиелонефрита, осложнившейся угрозой невынашивания. Роды в 40 недель. Оценка по шкале Апгар 6-7 баллов. На вторые сутки жизни состояние ухудшилось до тяжелого, появились клонико-тонические судороги и проявления дыхательной недостаточности (одышка до 76 в минуту, участие вспомогательной мускулатуры и западение нижней трети грудины во время акта дыхания). С учетом клинической картины и данных дополнительного исследования поставлен диагноз: Менингоэнцефалит, пневмония. Назначена общепринятая терапия. На 5 сутки в периферической крови по заявляемому способу определялось содержание CD8+HLA-DR+ клеток, которое составило 2,2%, что ниже заявляемого параметра на выздоровление. К концу 5 суток жизни появились признаки сердечной недостаточности – отеки, генерализованный цианоз, тахикардия, появился систолический шум во всех точках аускультации. При ультразвуком исследовании выявлен врожденный порок сердца – транспозиция магистральный сосудов. Пневмония у данного ребенка имела затяжное течение, нарастали признаки недостаточности кровообращения. Воспалительные изменения в ликворе и неврологическая симптоматика купировались. На фоне нарастания сердечной недостаточности и гипоксемии ребенок погиб в возрасте одного месяца от врожденного порока сердца, несовместимого с жизнью, – транспозиции магистральных сосудов. Прогноз по заявляемому способу не подтвердился по объективным причинам. Преимущества способа 1. Возможность прогнозирования исхода тяжелых неонатальных инфекций. 2. Позволяет своевременно провести лечебные мероприятия и улучшить исходы тяжелых неонатальных инфекций (в т.ч. предотвратить инвалидизацию, гибель ребенка). 3. Заявляемый способ не требует больших временных затрат и осуществляется 1 час 10 мин. 4. Предлагаемый способ имеет высокую точность 91,67%. Указанным способом обследовано 36 новорожденных детей на 5-10 дни жизни с тяжелой инфекционно-воспалительной патологией: пневмонией, менингоэнцефалитом, сепсисом. Результаты исследования представлены в таблице. ЛИТЕРАТУРА 1. Дегтярева М.В. Комплексные исследования провоспалительных иммуноцитокинов и функционального состояния лимфоцитов у новорожденных детей в норме и при патологии. Дисс.канд.мед.наук. М., 1995. 2. Дмитриева Н.В., Дмитриев А.В., Гузюкина Е.П., Шатская Е.Е. Особенности пневмонии у детей в раннем неонатальном периоде/ Материалы III съезда Российской ассоциации специалистов перинатальной медицины – Проблемы внутриутробной инфекции плода и новорожденного, Москва, 2000, С.216. 3. Касихина С.А., Кривоножко А.В., Рослый И.М. Определение активности ферментов и белков острой фазы воспаления у новорожденных детей с внутриутробной инфекцией в раннем неонатальном периоде/ Материалы III съезда Российской ассоциации специалистов перинатальной медицины – Проблемы внутриутробной инфекции плода и новорожденного, Москва, 2000, С.113. 4. Лаврова Д.Б., Самсыгина Г.А., Михайлов А.В., Гасанова Т.А. Формирование отдаленной патологии при внутриутробном инфицировании/ Материалы III съезда Российской ассоциации специалистов перинатальной медицины – Проблемы внутриутробной инфекции плода и новорожденного, Москва, 2000, С.279. 5. Назаров П.Г. Реактанты острой фазы воспаления. – СПб.: Наука, 2001.-423с. 6. Торубарова Н.А., Кошель И.В., Яцык Г.В. Кроветворение плода и новорожденного. – М.: Медицина, 1993.- 208 с. 7. Сорокина М.Н., Иова А.С., Злотникова Т.В. Бактериальные менингиты у детей в неонатальном периоде/ Материалы III съезда Российской ассоции специалистов перинатальной медицины – Проблемы внутриутробной инфекции плода и новорожденного, Москва, 2000, С.205. 8. Шабалов Н.П., Любименко В.А., Пальчик А.Б., Ярославский В.К. Асфиксия новорожденных, М.: МЕДпресс, 1999, С.410. 9. Ярилин А.А. Основы иммунологии. – М.: Медицина, 1999.- 608 с.
Формула изобретения
Способ прогнозирования исхода тяжелых неонатальных инфекций у новорожденных путем исследования периферической крови, отличающийся тем, что в возрасте 5-10 дней жизни определяют относительное содержание CD8+HLA-DR+ лимфоцитов и при его значении менее 2,4% прогнозируют выздоровление.
MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Дата прекращения действия патента: 15.10.2005
Извещение опубликовано: 27.01.2007 БИ: 03/2007
|
||||||||||||||||||||||||||
1-кислого гликопротеина) и активности ферментов АЛТ, ACT, ЩФ, ГДГ, ЛДГ, КК, КК-МВ и при снижении содержания С-реактивного белка, при повышении уровня гаптоглобина, антитрипсина, макроглобина и 