Патент на изобретение №2255337

(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОГО ГАСТРОДУОДЕНИТА И ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ДИСПЕПСИИ У ДЕТЕЙ

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии. Для дифференциальной диагностики хронического гастродуоденита и функциональной диспепсии у детей исследуют клинико-лабораторные показатели, при этом дополнительно определяют спонтанную адгезию лейкоцитов и их чувствительность к модуляторам клеточной адгезии – фитогемаглютинину (ФГА), теофиллину, тималину. При показателях функциональной активности лейкоцитов в пределах нормы: спонтанная адгезия нейтрофилов 28,03±2,0%; моноцитов 30,04±1,27%; лимфоцитов 20,81±0,97% и модулированной адгезии нейтрофилов: ФГА 31,02±1,27%, теофиллин 30,88±1,07%, тималин 32,66±2,01%; моноцитов: ФГА-32,15±1,11%, теофилин 31,02±2,07%, тималин 31,54±1,21%, лимфоцитов: ФГА 23,05±1,27%, теофиллин 22,14±1,12%, тималин 21,98±1,09%, устанавливают диагноз функциональной диспепсии. При показателях функциональной активности лейкоцитов, превышающих пределы нормы, диагностируют хронический гастродуоденит. Предлагаемый способ позволяет осуществлять более точную, раннюю и необременительную для организма ребенка диагностику хронического гастродуоденита и функциональной желудочной диспепсии. 1 табл.

(56) (продолжение):

CLASS=”b560m”duodenal mucosa of children Infected with Helicobacter pylori. Zhonghua Er Ke Za Zhi. 2003, Mar. 41(3), p. 168-171, abstr.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии.

Использование данного метода помогает дифференцировать воспалительные и невоспалительные заболевания гастродуоденальной зоны, является нетравматичным, что позволяет использовать его в качестве скринингового теста диагностики хронического гастродуоденита и для целенаправленного отбора детей для проведения инструментальных методов исследования. Применение данного метода позволит сократить сроки пребывания детей в стационаре.

Метод определения функциональной активности лейкоцитов в настоящее время используется для диагностики различных заболеваний у детей: лимфатизма (М.Ю.Федорова, 1999), бронхиальной астмы (О.В.Кузнецова с соавт., 2002).

Мы поставили перед собой задачу разработать диагностические критерии для более точной, ранней и необременительной для организма ребенка диагностики хронической гастродуоденальной патологии и функциональной желудочной диспепсии.

Таким образом, уровень спонтанной адгезии лимфоцитов крови и характер изменения их адгезионной активности в ответ на добавление индукторов (ФГА, теофиллин, тималин) – являются одним из параметров иммунореактивности организма ребенка и могут быть использованы для определения воспалительного и невоспалительного процесса гастродуоденальной зоны.

В качестве прототипа был использован учебник Н.П.Шабалова “Детские болезни” (СПб, Сотис, 1993, с.240-248), где приведены сведения о признаках, используемых для диагностики хронического гастродуоденита и функциональной диспепсии.

Технический результат предлагаемого способа диагностики заключается в определении адгезивной способности лейкоцитов, в котором в качестве дифференцирующего критерия используется различный уровень спонтанной адгезии лейкоцитов и их чувствительность к модуляторам клеточной адгезии – фитогемаглютинину (ФГА), теофилину и тималину.

Способ диагностики осуществляется следующим образом. Разделение клеток крови на популяции проводилось в двойном градиенте плотности фиколл-верографина центрифугированием в течение 35 мин со скоростью 1500 об/мин, и последующим двукратным отмыванием в среде 199 (рН 7,4). Для удаления остаточных эритроцитов использовали гипоосмотический шок: к 1 мл суспензии отмытых клеток добавляли 18 мл холодной дистиллированной воды, а через 20 с осмолярность восстанавливали добавлением 6,25 мл 0,6 М раствора хлорида натрия (Хомерики С.Г. и др., 1993). Жизнеспособность ядросодержащих клеток оценивали путем витального окрашивания суспензии 0,1% раствором трипанового синего, приготовленного на фосфатном буфере (рН 7,4). Содержание жизнеспособных клеток в суспензии составляло 90-95%. В дальнейшем в камере Горяева подсчитывали концентрацию лейкоцитов в 1 мл и готовили необходимые разведения каждой суспензии клеток.

Разделение мононуклеаров на моноциты и лимфоциты проводили методом адгезии к стеклу (Заречнева Н.В., 1989). Для идентификации клеток проводили витальную окраску азурэозином с подсчетом количества лимфоцитов и моноцитов. Популяция клеток, прилипающая к стеклу, на 90% состояла из моноцитов, а не прилипающая – из лимфоцитов. Жизнеспособность мононуклеаров составляла 90-95%.

Оценку миграционной способности лейкоцитов проводили в реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) с применением фитогемаглютинина (ФГА) в качестве индуктора синтеза лимфоцитами фактора, угнетающего миграцию (George M., Vaughan J.H., 1962). РТМЛ ставилась капиллярным микрометодом с цельной кровью (Артомова А.Г., 1973) в модификации Польнера А.А., Серовой Т.И. (1976). Измерялась длина зоны миграции лейкоцитов в опытном (с добавлением ФГА) и контрольном капиллярах, и по отношению последних определялся индекс миграции в процентах. Продукцию фактора, определяющего миграцию, оценивали косвенно по показателю торможения миграции (ПТМ):

ПТМ=100-ИМ, где ИМ – индекс миграции.

Определение спонтанной адгезии нейтрофилов, моноцитов и лимфоцитов проводилось раздельно для каждого типа клеток по методу Goldrosen M.H. (1979) в модификации Вартаняна Н.Л. с соавт. (1988). Показатель спонтанной адгезии определяли как отношение разности количества клеток до инкубации и после нее в 5 больших квадратах камеры Горяева к количеству клеток до инкубации, выраженному в процентах. Оценку резервов функционального состояния рецепторного аппарата, необходимого для усиления адгезии, осуществляли исследованием адгезивной способности клеток с модуляторами адгезии (ФГА, теофиллин, тималин).

Нами обследовано 115 детей в возрасте 6-15 лет: 67 – с хроническим гастродуоденитом, 26 – с функциональной желудочной диспепсией, 22 ребенка составили контрольную группу.

Диагноз хронический гастродуоденит у детей ставился на основании клинико-лабораторных показателей с привлечением ряда дополнительных методов обследования (ЭГДС с биопсией, уреазный тест, микроскопия мазка отпечатка, внутрижелудочная рН-метрия, УЗИ внутренних органов).

Для доказательства адекватности оценки воспалительного и невоспалительного процесса гастродуоденальной зоны по показателям адгезии и чувствительности клеток к ее модуляторам провели сопоставление данных предложенного способа у детей с гастродуоденитом, функциональной диспепсией и у лиц контрольной группы. Выявленные изменения адгезивной активности клеток сравнивались с результатами контрольной группы обследования (см. таблицу).

Проведенные обследования показали, что у детей с ХГД отмечаются повышенные показатели адгезии, как спонтанной, так и индуцированной всех лейкоцитарных клеток, особенно выраженной у нейтрофилов. По-видимому, это связано с тем, что нейтрофилы представляют с собой первую линию защиты от действия агентов и отражают наличие воспалительного процесса. Повышенная способность лейкоцитов к адгезии, как мы полагаем, обеспечивает взаимодействие клеток для реализации эффекторного потенциала в очаге воспаления.

Таким образом, различные уровни адгезии лейкоцитов могут быть использованы для диагностики воспалительных и невоспалительных процессов гастродуоденальной зоны (см. таблицу).

Клинический пример 1

Аня Ч., 11 лет. Поступила в 1 ДКБ с жалобами на периодические боли в животе в эпигастральной области ноющего характера, не связанные с приемом пищи, при осмотре – состояние удовлетворительное, нормального питания, по органам без изменений, живот при пальпации мягкий, болезненный в пилородуоденальной зоне, стул не нарушен. Данные исследования: OAK – эр – 4,0 Т/л; Hв – 122 г/л; ЦП – 0,91; лей – 5,6 г/л; б – 1%; э – 5%; с – 38%; лим – 48%; мон – 8%; СОЭ – 5 мм/час; функциональная активность лейкоцитов: адгезия нейтрофилов: спонтанная – 33,71%; ФГА-стимулированная – 37,66%; теофиллин-модулированная – 36,78%, тималин-модулированая – 42,47%; адгезия моноцитов: спонтанная – 36,77%; ФГА-стимулированная – 48,75%; теофиллин-модулированная – 37,97, тималин-модулированая – 40,98%; адгезия лимфоцитов: спонтанная – 28,54%; ФГА-стимулированная – 55,99%; теофиллин-модулированная – 41,24%, тималин-модулированая – 53,52%; ИМ – 64,85%; МИФ – 35,15%. Учитывая повышенные данные функциональной активности лейкоцитов, предположительный диагноз: хронический гастродуоденит. Направлена на дообследование: проведена ФЭГДС – хронический гастродуоденит; уреазный тест – положительный; микроскопия мазка отпечатка – выявлены НР(++); внутрижелудочная рН – метрия – гиперацидное состояние, декомпенсация ощелачивания в антральном отделе.

Проведено лечение: амоксициллин + фуразолидон 7 дней, гастросидин, гастал, физиолечение (магнитотерапия на пилородуоденальную зону).

Через 12 дней состояние улучшилось, болевой синдром купирован, при пальпации – живот мягкий, безболезненный; общий анализ крови – в норме; функциональная активность нейтрофилов, моноцитов – соответствуют норме, лимфоциты – с тенденцией к нормализации.

Выписана домой в удовлетворительном состоянии.

Клинический пример 2

Илья Г., 12 лет. Поступил в 1ДКБ с жалобами на периодические боли в эпигастральной области ноющего характера, не связанные с приемом пищи, тошноту. При осмотре – состояние удовлетворительное, нормального питания, кожные покровы обычной окраски, по органам без изменений. Живот при пальпации мягкий, умеренно болезненный в эпигастрии, печень не увеличена, стул не нарушен. Данные исследования: OAK – эр – 4,8 т/л; Нв – 12,5 г/л; ЦП – 0,91; лей – 5,1 г/л; э – 4%, с – 48%; лим – 40%, мон – 4; СОЭ – 10 мм/ч.; функциональная активность лейкоцитов: адгезия нейтрофилов: спонтанная – 26,8%; ФГА-стимулированная – 30%; теофиллин-модулированная – 29,8%, тималин-модулированая – 30,5%; адгезия моноцитов: спонтанная – 28,5%; ФГА-стимулированная – 31,9%; теофиллин-модулированная – 30,84%, тималин-модулированая – 30,5%; адгезия лимфоцитов: спонтанная – 19,13%; ФГА-стимулированная – 20,8%; теофиллин-модулированная – 19,65%, тималин-модулированая – 21,5%; ИМ – 45,45%; МИФ – 54,55%. Учитывая, что данные функциональной активности лейкоцитов в пределах возрастной нормы, предположительный диагноз: функциональная желудочная диспепсия. Направлена на дообследование: проведена ФЭГДС: воспалительных изменений в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки не выявлено. Обнаружен дуодено-гастральный рефлюкс. Внутрижелудочная рН-метрия – гиперацидное состояние, компенсация ощелачивания в антральном отделе.

Таким образом, заявленный способ является объективным и информативным и, характеризуя адгезивнный потенциал лейкоцитарных клеток диагностирует наличие хронического гастродуоденита или функциональной диспепсии.

Способ диагностики хронического гастродуоденита и функциональной диспепсии у детей

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики хронического гастродуоденита и функциональной диспепсии у детей путем исследования клинико-лабораторных показателей, отличающийся тем, что дополнительно определяют спонтанную адгезию лейкоцитов и их чувствительность к модуляторам клеточной адгезии – фитогемаглютинину (ФГА), теофилину, тималину и при показателях функциональной активности лейкоцитов в пределах нормы: спонтанная адгезия нейтрофилов 28,03±2,0%; моноцитов 30,04±1,27%; лимфоцитов 20,81±0,97% и модулированной адгезии нейтрофилов: ФГА 31,02±1,27%, теофилин 30,88±1,07%, тималин 32,66±2,01%; моноцитов: ФГА 32,15±1,11%, теофилин 31,02±2,07%, тималин 31,54±1,21%, лимфоцитов: ФГА 23,05±1,27%, теофилин 22,14±1,12%, тималин-21,98±1,09% устанавливают диагноз функциональной диспепсии, а при показателях функциональной активности лейкоцитов, превышающих пределы нормы, диагностируют хронический гастродуоденит.

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 15.07.2005

Извещение опубликовано: 27.01.2007 БИ: 03/2007