Патент на изобретение №2247714

Published by on

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ

(19)

(11)

2247714

(13)

(51) МПК ⁷
_{C07C215/14, A61K31/14, A61P31/16, A61P31/22}

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

Статус: по данным на 27.01.2011 – действует

(21), (22) Заявка: 2001129788/04, 06.11.2001

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:

06.11.2001

(43) Дата публикации заявки: 10.07.2003

(45) Опубликовано: 10.03.2005

(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске:
SU 1591427 A1, 20.05.1996. ЛАВРОВА Л.Н. и др., Химико-фармацевтический журнал, 1990, 1, стр. 29-31. Органикум, Практикум по органической химии, Пер. с нем., М.: Мир, 1979, т.2, стр. 186-187. CHAKRABARTI J.K. ET AL, J. Med. Chem., 1976, 19(7), p. 967-969.

Адрес для переписки:

443100, г.Самара, ул. Молодогвардейская, 244, СамГТУ, Главный корпус, патентный отдел

(72) Автор(ы):

Моисеев И.К. (RU),
Макарова Н.В. (RU),
Поздняков В.В. (RU),
Галегов Г.А. (RU),
Андронова В.Л. (RU)

(73) Патентообладатель(и):

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Самарский государственный технический университет (RU),
НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН (RU)

(54) ГИДРОХЛОРИДЫ (3-R-1-АДАМАНТИЛ)-1-ЭТИЛАМИНОВ, ОБЛАДАЮЩИЕ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ

(57) Реферат:

Изобретение относится к группе новых азотсодержащих соединений, в частности к производным адамантана общей формулы

где R – Cl (Ia), C₂H₅ (Iб), обладающих противовирусной активностью. Изобретение также относится к способу получения этих соединений. Технический результат – получение новых биологически активных соединений адамантанового ряда, которые можно применять в медицине в качестве антигерпетического препарата. 1 з.п. ф-лы, 6 табл.

Изобретение относится к группе новых биологически активных соединений адамантанового ряда, в частности к гидрохлоридам (3-R-1-адамантил)-1-этиламинов, где R-Cl, С₂Н₅, формулы

R=Cl(a), C₂H₅(б)

Изобретение может найти применение в медицине.

Наиболее близким по структуре соединением является ремантадин (гидрохлорид -метил-1-адамантилметиламина)

оказывающий профилактическое действие в отношении гриппа, вызываемого штаммами вируса типа А. Хотя соединения Iа-б и являются 3-адамантилзамещенными аналогами ремантадина, их антигрипповая активность довольно слабая, но при этом все данные соединения проявили высокую биологическую активность в отношении вируса герпеса простого, к которому ремантадин малоактивен, а соединения Iб эффективно ингибировало как чувствительный, так и резистентный к ацикловиру варианты вируса герпеса простого.

Если сравнивать соединение Iб с эффективно используемым в медицине для лечения заболеваний герпетической природы производными адамантана, то его антигерпетическая активность превышает активность тромантадина (гидрохлорида 1-(1-адамантил)-2-[(2-диметиламино)этокси]-ацетамида) в 3 раза, а этмантина (1-(3-этиладамантил)-1-этилкарбамата) в 1,5 раза. (А.с. СССР №1721048, 1992, бюл. №11).

Цель изобретения – ряд соединений, обладающих противовирусным действием, гидрохлоридов (3-R-1-адамантил)-1-этиламинов, где R=Cl, C₂H₅.

Физико-химические свойства и спектры этих соединений приведены в табл.1 и 2.

Согласно изобретению биологическая активность патентуемых соединений подтверждается примерами 1-3.

Соединения Iа-б испытывались в отношении их токсичности для клеточных культур и антивирусной активности на моделях вируса гриппа типа А (классической чумы птиц (ВКЧП) штамм Вейбридж [Hav1N1] и человека Aichi/2/68 [H3N2]) и вируса герпеса простого типа 1 (штамм Л₂).

Пример 1. Изучение токсического действия.

В таблице 3 представлены результаты изучения токсического действия производных адамантана на культуру первично-трипсинизированных ФЭК и культуры перевиваемых клеток МДСК и Vero. Ремантадин использовался в качестве референс-препарата. Как видно из таблицы, ЦД₅₀ Iб была приблизительно в 4 раза меньше ЦД₅₀ ремантадина, а препарат Iа еще менее токсичен для исследованных культур.

Пример 2. Изучение биологической активности против вируса гриппа А.

При изучении чувствительности вируса гриппа к производным адамантана ингибирующий эффект оценивали по наличию цитопатических изменений в клеточном монослое и по накоплению гемагглютининов в культуральной жидкости. Показано, что препараты Ia, Iб обладали слабым эффектом на репродукцию вируса: величины ХТИ были в 10-12 раз ниже, чем у ремантадина. Результаты приведены в таблице 4. Препараты не обеспечивали полного ингибирования развития вирусиндуцированного цитопатического эффекта (ЦПЭ) в диапазоне нецитотоксичных концентраций.

Невысокий антигриппозный эффект исследуемых соединений подтвержден также при изучении способности соединений ингибировать бляшкообразование при их введении в состав агарного покрытия (таблица 5). Ингибирующий эффект обнаруживается в присутствии концентраций соединений, резко превышающих эффективные концентрации ремантадина.

Пример 3. Изучение биологической активности против вируса герпеса простого типа 1.

При изучении антигерпетического эффекта производных адамантана в культуре клеток Vero (таблица 6) установлено, что препарат Ia ингибирует развитие вирусиндуцированного эффекта в концентрациях, близких величине ЦД₅₀, а величина ХТИ приблизительно в 2 раза превосходит ХТИ ремантадина. Iб проявил выраженный селективный эффект в отношении ВПГ-1 (ХТИ=12,82). Близкие результаты были получены при использовании ВПГ-1, обладающего резистентностью к базовому лекарственному противогерпетическому препарату ацикловир.

Полученные результаты были подтверждены при изучении влияния наиболее активного соединения Iб на инфекционный титр ВПГ-1. Максимальные концентрации, использованные в этой серии экспериментов, не превышали 1/2 ЦД₅₀. В присутствии в концентрации 31,2 мкг/мл (приблизительно 1/2 ЦД₅₀) ремантадин снижал инфекционный титр вируса по сравнению с контролем на 0,9 lg БОЕ/мл, а Iб в той же концентрации – на 1,55 lg. При увеличении концентраций Iб до 62,5 мкг/мл снижение титра составило 2,65 lg БОЕ/мл и носило избирательный характер.

Таким образом патентуемые соединения, особенно Iб, представляют собой перспективное действующее начало для разработки более эффективного антигерпетического препарата среди производных адамантана.

Таблица 4 Изучение антивирусного эффекта производных адамантана в культуре клеток МДСК на модели вирусов гриппа А
Препарат	Вирус гриппа А
	ВКЧП				Aichi/2/68
	ИД₅₀ [мкг/мл]		хти		МАК [мкг/мл]		ХТИ
Iа Iб ремантадин	96 48		4,78 3,58		192 96		2,39 1,79
	1,2		40,2		1,8		26,80
Примечание: МИ 0,1 БОЕ/клетка, продолжительность инкубации – 72 ч. Представлены результаты трех независимых опытов. ИД₅₀ и ИД₉₅ – концентрация соединения, предотвращающая развитие вирусиндуцированного ЦПЭ соответственно на 50% и 95-100% при 95-100% ЦПЭ в контроле. МАК (минимально активная концентрация) – минимальная концентрация вещества, полностью предотвращающая РГА. Химиотерапевтический индекс соединений (ХТИ) вычисляли как отношение ЦД₅₀ к ИД₅₀ (или МАК).
Таблица 5 Ингибирование формирования бляшек ремантадином и рядом производных адамантана, включенными в твердое агаровое покрытие, в культуре клеток МДСК, инфицированных ВКЧП.
Концентрация [мкг/мл]		Ингибирование бляшкообразования, % Препарат
		ремантадин		Ia		Iб
0,5		78		0		0
1,0		90		0		0
5,0		91		0		0
10,0		93		0		7
20,0		100		20		19
50,0		ц.т.		34		26
100,0		н.и.		38		32
200,0		н.и.		43		ц.т.
Примечание: МИ 0,5 БОЕ/клетка: продолжительность инкубации 48 ч.ц.т. – цитотоксичность, н.и. – не исследовали, так как концентрации близки или превышают величину ЦД₅₀.

Таблица 6 Изучение антивирусного эффекта производных адамантана в культуре клеток Vero на модели ВПГ-1
Препарат	ИД₅₀	ИД₉₅	ХТИ
Ia Iб	125/125 15,6/15,6	500/250 62,5/62,5	3,68/3,68 12,82/12,82
Ремантадин	31,2/31,2	62,5/62,5	1,64/1,64
ацикловир	0,45/120	0,9/>120
Примечание: МИ 0,1 БОЕ/клетка; продолжительность инкубации 48 ч. ИД₅₀и ИД₉₅ – концентрация соединения, предотвращающая развитие вирусиндуцированного ЦПЭ соответственно на 50% и 95-100% при 95-100% ЦПЭ в контроле. Химиотерапевтический индекс соединений (ХТИ) вычисляли как отношение ЦД₅₀ к ИД₅₀. “/” для эталонного чувствительного к ацикловиру ВПГ-1/S и резистентного к ацикловиру ВПГ-1/R(ВПГ/S/ВПГ/R)

Формула изобретения

1. Гидрохлориды (3-R-1-адамантил)-1-этиламинов, формулы

где R-Cl (Ia), C₂H₅ (Iб),

обладающие противовирусной активностью.

2. Способ получения соединений по п.1, отличающийся тем, что синтез проводят по реакции Лейкарта-Валлаха с формамидом в среде муравьиной кислоты из (3-R-1-адамантил)метилкетонов.

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 07.11.2005

Извещение опубликовано: 27.01.2007 БИ: 03/2007

NF4A Восстановление действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение

Дата, с которой действие патента восстановлено: 10.04.2007

Извещение опубликовано: 10.04.2007 БИ: 10/2007